黎日海 刘建瑜 吴甲文
（桂平市人民医院检验科 广西 桂平 537200）
【摘要】 目的：分析羊水的病原菌构成及其药敏结果，了解羊水标本细菌培养对宫内感染诊断的意义。方法：对2013年1月至2015年6月本院送检886份羊水标本进行细菌培养并对其药敏结果统计分析。结果：886份羊水中，共分离出530株细菌或念球菌，检出率59.8%。G-菌258株，占总48.7%，其中大肠埃希菌占总病原菌第一位，占总菌38.5%。G+菌206株，占总39.4%。以凝固酶阴性葡萄球菌、革兰阳性杆菌、其它链球（草绿色链球）、其它革兰阳性球菌为一组无临床意义污染菌共157株，占总菌29.6%，提示羊水标本细菌培养为高污染标本。大肠埃希菌耐药前三位是氨苄西林71.4%，复方新诺明55%，哌拉西林33.2%。而阿莫西林/棒酸、哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦，头孢他啶、头孢吡肟和头孢西丁敏感率均大于80%。结论：羊水细菌培养为高污染标本，对羊水培养出的病原菌应谨慎分析其临床意义。羊水中分离率最多的病原菌为大肠埃希菌，阿莫西林/棒酸、哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦，头孢他啶、头孢吡肟和头孢西丁这些常规药物敏感率均大于80%，可作为宫内感染治疗的经验用药。
【关键词】 羊水；细菌培养；药敏试验
【中图分类号】R714.14 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）08-0062-03
The results of analysis of amniotic fluid bacterial culture and drug susceptibility test Li Rihai Liu Jianyu, Wu Jiawen.
The People's Hospital of GuipangCity,Guangxi, GuiPing 537200, China
【Abstract】Objective Analysis of the amniotic fluid of pathogenic bacteria and their drug susceptibility results, understanding of the amniotic fluid specimens bacteria culture significance of diagnosis of intrauterine infection. Methods In January 2013 to June 2015 in our hospital were bacterial culture, 886 amniotic fluid samples and statistical analysis of the drug susceptibility results. Results In 886 amniotic fluid, a total of 530 strains bacteria was isolated or read aureus, detection rate of 59.8%. 258 G - bacteria strains, 48.7% of the total. 206 G + bacteria strains, 39.4% of the total.Contaminated bacteria, a total of 157 strains, accounting for 29.6% of the total bacteria.Conclusions Specimens of amniotic fluid bacterial culture for high pollution, pathogens should be careful analysis of the amniotic fluid develop its clinical significance..
【Key words】The amniotic fluid; Bacterial culture; Drug sensitive test
羊水细菌培养常作为宫内细菌感染的临床诊断依据之一，为探讨羊水细菌培养结果及药敏试验结果对宫内感染诊断作用，我们对剖宫产和胎膜早破有浑浊羊水进行了常规细菌培养及药敏试验，并对其统计分析。现将结果报告如下。
1.材料与方法
1.1 标本来源及标本采集
羊水标本来源于2013年1月至2015年6月，在我院产科进行剖宫产或胎膜早破羊水有浑浊的患者，共采集了886份羊水标本。临床医生在手术或检查时发现有羊水浑浊，即用无菌方法采集羊水标本送检。手术患者在手术时发现有羊水浑浊，即用无菌注射器采集羊水5～8ml注入血培养瓶送检；非手术患者在阴道采集标本前，先用茂康碘消毒阴道后用手带手术无菌手套至宫口等2～5ml羊水，然后用无菌注射器采集注入血培养瓶送检。
1.2 菌株鉴定与药敏实验
细菌鉴定应用ATB Expression半自动微生物鉴定系统。药敏实验用K-B法。采用英国Oxoid公司生产的培养基及抗菌药物纸片法。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、大肠埃希菌 ATCC35218、粪肠球菌ATCC29212、铜绿假单胞菌ATCC27853和金黄色葡萄球菌ATCC25923。药敏结果用WHONET5.6统计分析，结果判断采用2014年CLSI推荐标准。
2.结果
2.1羊水细菌培养病原菌分布
在886份浑浊羊水中，共分离出530株细菌或念球菌，检出率59.8%，其中革兰阳性菌206株，占总检出菌39.4%，以凝固酶阴性葡萄球菌为主。根据血培养污染菌的表述，以凝固酶阴性葡萄球菌、革兰阳性杆菌、其它链球（草绿色链球）、其它革兰阳性球菌为一组无临床意义污染菌共157株，占总检出菌29.6%，占革兰阳性菌76.2%；以金黄色葡萄球菌、β-溶血链球菌、肠球菌属为一组有临床感染意义菌，共检出49株，占总检出菌9.2%，占革兰阳性菌23.8%，其中β-溶血链球菌（B群）检出8株，金黄色葡萄球菌11株。
革兰阴性菌共检出258株，占总检出菌48.7%。大肠埃希菌作为阴道定植主要菌，也为羊水细菌感染的主要菌，共检出204株，检出率23%（204/886），占总检出菌38.5%，占总检出病原菌第一位，占革兰阴性菌79.1%。其次克雷伯菌属也检出28株，占总检出菌5.3%，占革兰阴性菌10.8%。
念珠菌作为阴道定植或感染菌之一，也为羊水感染菌之一，共检出63株，占总检出菌11.9%。羊水细菌培养病原菌构成比见表1。
表1 羊水细菌培养病原菌构成比（n=530）
2.2 羊水中大肠埃希菌药敏结果分析
大肠埃希菌在羊水分离菌中占第一位，在革兰阴性菌中也占了79.1%，是占绝对优势的病原菌。根据卫计委2012年84号命令，《抗菌药物临床应用管理办法》。目标细菌耐药率超过30%的抗菌药物则有预警、慎重用药等警告措施。在对羊水的大肠埃希菌进行药敏结果分析，结果表明氨苄西林、复方新诺明、哌拉西林、头孢唑林的药敏结果耐药率>30%。以氨苄西林71.4%，复方新诺明55%，哌拉西林33.2%居耐药前三位。在常用抗生素中阿莫西林/棒酸、哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦，头孢他啶、头孢吡肟和头孢西丁敏感率均大于80%，经验治疗可选用这些药物。羊水中大肠埃希菌药物敏感率最高前三位是亚胺培南100%，哌拉西林/三唑巴坦98%，阿米卡星97.5%。在204株大肠埃希菌中检出产ESBLs共37株，阳性率18.1%，未检出耐碳青霉烯类肠杆菌（CRE）。
表2 大肠埃希菌药敏结果分析
3.讨论
从本文统计结果表明，羊水的细菌培养结果污染菌检出率高，以凝固酶阴性葡萄球菌，革兰阳性杆菌等为主的污染菌检出率达总检出菌29.6%，污染率17.7%（157/886），比血培养<2%污染率的质控指标要求高了许多。说明羊水标本细菌培养是高污染标本，它的培养结果作为诊断宫内感染时应谨慎考虑。羊水细菌培养这种高污染率与采集非手术羊水标本经过有污染菌的阴道采集方式有密切相关。对于羊水中分离出凝固酶阴性葡萄球菌、革兰阳性杆菌及草绿色链球菌等高度怀疑为污染菌的培养结果，应谨慎评估其临床意义，这些菌一般与感染无关。对于培养出大肠埃希菌、肠球菌属、念珠菌这类阴道中定植的条件致病菌，也是因其采集标本通过了阴道，存在着较多污染的可能，对羊水培养出这些菌诊断宫内感染，也应慎重考虑，与临床症状相符的，才能考虑为宫内感染病原菌。而对于羊水β-溶血链球菌（主要为GBS），金黄色葡萄球菌这类致病菌的检出，应作感染病原菌来治疗，但这类菌羊水检出不高，β-溶血链球菌（主要为GBS）检出率0.9%（8/886），金黄色葡萄球菌1.2%（11/886）。
根据国内学者周才，林胜兰报导，羊水病原菌分离大肠埃希菌居第一位，周才报导大肠埃希菌在羊水病原菌中检出率为57.9%。我们大肠埃希菌在羊水病原菌中检出率为38.5%，比周才报导低，但我们羊水大肠埃希菌检出率为23%，周才羊水羊水大肠埃希菌检出5.5%，差别较大，应与我们有非手术羊水标本经过有污染菌的阴道采集方式，造成较高的污染菌有密切相关。
羊水分离的大肠埃希菌比从呼吸道、血液分离的大肠埃希菌耐药率要低，我们统计表明羊水分离的大肠埃希菌耐药率前三位是氨苄西林71.4%，复方新诺明55%，哌拉西林33.2%。周才报导羊水分离的大肠埃希菌耐药前三位是氨苄西林45.5%，复方新诺明27.3%，庆大霉素27.3%，我们的统计与周才报导的差异，我们的耐药率高。从我们的药敏结果来看，莫西林/棒酸、哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦，头孢他啶、头孢吡肟和头孢西丁敏感率均大于80%。符合经验用药的要求，可从这些药物中选用对胎儿或婴儿副作用少的药物。
【参考文献】
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[4]胡付品，朱德妹，汪复等.2013年中国CHINET细菌耐药性监测「J」. 中国感染与化疗杂志2014，14（5）：365-374.
论文作者:黎日海,刘建瑜,吴甲文
论文发表刊物:《医药前沿》2016年3月第8期
论文发表时间:2016/5/13
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