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摘要：本文对头孢唑林钠原料药相关的物质进行研究，利用高效液相色谱法来建立相应的研究方法，选择合适的色谱柱来对其进行检测，同时结合梯度洗脱的方法来对头孢唑林钠原料药进行检查，必须让色谱图基线能够平稳，杂质峰的分离度能够达到相关的要求，能够实现峰形优，检查结果能够达到相关的要求，运用高效液相色谱来对头孢唑林钠原料药相关物质检查，可以得到非常准确的结果，在药品生产的过程中应该被广泛的应用。这种方法能够非常准确、快速的对头孢唑林钠原料药进行检测，在注射用的头孢唑林钠的检测中经常被应用。
关键词：高效液相色谱法；头孢唑林钠原料药；有关物质检查
头孢唑林钠原料药的有关物质，就是头孢唑林钠原料药里存在的有机杂质，这其中、既包括在进行头孢唑林钠原料药降解所产生的杂质，也有在进行加工引入的杂质。被引入的杂质可能是已知的，也可能是未知的，引入的杂质可能具有挥发性，也可能具有不挥发性的特点。头孢唑林钠原料药的杂质成分和一般性的活性成分非常类似，经常被称之为有关物质，相较于国外发达国家的头孢唑林钠原料药，我国在对其质量进行控制方面仍旧存在着很多的问题，具体通常表现为液相峰的分离效果不理想，对于背景的吸收不到位等，在杂质的特性研究上仍旧存在着很多的问题。
近年来，有关头孢唑林钠临床不良反应的报道0较多，如过敏性皮疹、药物热、恶心、呕吐、腹泻等。0引起不良反应的原因之一可能是头孢唑林钠中的杂0质，其来源可能是合成中间体和一些降解产物。0为更好地控制药品质量，保障患者用药安全，需要对0头孢唑林钠杂质的种类和含量进行监控。2010年0版《中国药典》（二部）和《欧国药典》（EP7版）中头0孢唑林钠有关物质项色谱条件中流动相含有离子对0试剂，《美国药典》（35版）中头孢唑林钠有关物质项0色谱条件中流动相含有磷酸盐，故三者流动相系统均不能用于高效液相色谱法检测。
1仪器与材料
U3000系列液相色谱仪和配备紫外检测器（美国赛默飞世尔公司）；Acclaim120C185?m4.6×250mm液相色谱柱（美国赛默飞世尔公司）；KQ-300VDE超声波清洗器（昆山市超声仪器）；XS205DU电子天平（瑞士梅特勒—托利多公司）；ML204电子天平（瑞士梅特勒—托利多公司）；乙腈（色谱纯、韩国SK）；超纯饮用水（娃哈哈公司）；磷酸氢二钠（分析纯）；磷酸二氢钾（分析纯）。
2方法与结果
2.1流动相配制：流动相A为磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠14.54g与磷酸二氢钾3.53g.加水熔解并稀释至1000mL），流动相B为乙腈。
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2.2供试品溶液的配制：标准品溶液：取头孢唑林钠标准品适量，精密称定，用流动相A溶解并制成每lmL中含2.5mg的溶液，精密量取1mL，置100mL量瓶中，加流动相A稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。样品溶液：取头孢唑林钠原料药适量，精密称定，用流动相A溶解并制成每lmL中含2.5mg的溶液。
2.3高效液相色谱条件：精密称取头孢唑林钠原料药10mg，加0.2%氢氧化钠溶液10mL使溶解，静置15~30min，精密量取1mL，置10mL量瓶中，加流动相A稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性试验溶液，进样量10?L，流速为每分钟1.2mL，柱温为45℃，检测波长为254nm，线性梯度洗脱，详见表1，结果头孢唑林峰和相邻杂质峰的分离度应符合要求。应用该色谱条件对样品溶液和标准品溶液进行分析，记录色谱图。
2.4结果：单个杂质峰面积不大于对照溶液的主峰面积的0.14%，各杂质峰面积的和不大于对照溶液主峰面积的0.24%，符合标准的单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积（1.0%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2.0倍（2.0%）。
2.5头孢唑林钠原料药溶液配制
取相应制剂均匀粉末适量（相当头孢唑林钠原料药于头孢唑林钠头孢唑林钠原料药15头孢唑林钠原料药mg），置头孢唑林钠原料药10头孢唑林钠原料药ｍＬ头孢唑林钠原料药玻璃离心管中，加头孢唑林钠原料药入初始比例挥发性流动相头孢唑林钠原料药5头孢唑林钠原料药ｍL，涡旋头孢唑林钠原料药3头孢唑林钠原料药min、超声头孢唑林钠原料药3头孢唑林钠原料药min头孢唑林钠原料药使溶解并稀释至刻度，摇匀，尽量使其溶解，摇头孢唑林钠原料药匀，用头孢唑林钠原料药0.45头孢唑林钠原料药μｍ头孢唑林钠原料药滤膜过滤，取续滤液，配制成浓度约头孢唑林钠原料药3头孢唑林钠原料药mg／ｍL头孢唑林钠原料药的样品溶液作为供试液。头孢唑林钠原料药。
按“1.3.1”项下色谱和质谱条件，通过联用技术头孢唑林钠原料药测定，得到其代表性头孢唑林钠原料药L-ＰＤＡ头孢唑林钠原料药和头孢唑林钠原料药ＬＣ-ＭＳ头孢唑林钠原料药图谱。结果表明，注射用头孢唑林钠中主成分头孢唑林头孢唑林钠原料药（ＣＺＥ）能与杂质完全分离，并可以检测到头孢唑林钠原料药1头孢唑林钠原料药1头孢唑林钠原料药个有关头孢唑林钠原料药物质峰，再根据所测得各有关物质的二级质谱进行头孢唑林钠原料药结构解析。
3头孢唑林钠原料药研究讨论
3.1色谱条件的选择的重要性
根据相关的药典的相关标准，对头孢唑林钠原料药的有关物质进行分析，在进行研究的过程中不能采用对头孢唑林钠原料药添加离子的方式来对其进行研究，因此只能对头孢唑林钠原料药进行醋酸盐的系统来对其进行研究。在该系统下，各有关物质分离良好，可用于质谱定性分析。在流动相梯度中，水相其实比例较高，因此在进行高效液相色谱法分析时采用甲醇进行柱后补偿以提高杂质在质谱离子源中的离子化效率。
3.2裂解规律及来源
头孢唑林钠属于β-内酰胺类抗生素，根据合成工艺，并参照各国药典所规定的有关物质的结构，结合有关物质的一级、二级质谱信息推断其可能的结构发现，其杂质主要来自于降解产物及异构化反应。例如（１）发生开环反应后降解产生的有关物质２、４、５、１0；（２）产生异构化的有关物质６、７、８。也有来自合成过程中原料药的有关物质１、３和来自合成过程中使用的有机催化剂产生的副产物如有关物质１１。各降解产物的裂解规律主要是内酰胺的开环、３-位侧链的断裂脱去噻二唑以及四氮唑环的开裂。
结论
在进行实际的头孢唑林钠原料药应用过程中，对头孢唑林钠原料药的有关物质，进行检测最有效地方法就是色谱柱，其主要采用十八烷基硅烷键合硅胶来作为填充剂，让头孢唑林钠原料药的分离效果得到进一步的加强，让头孢唑林钠原料药的检查更加精确。在进行研究的过程中，要实现由研究来得到标准，到由相关的标准来进行研究的转变。在运用研究方法对头孢唑林钠原料药进行检测的过程中，要对有关物质进行检查方法加强重视，尽量采用公认的方法来对其进行收载，像药典等，在对头孢唑林钠原料药进行研究的过程中，还要不断地结合产品自身的实际情况来进行。
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论文作者:姚振韬
论文发表刊物:《健康世界》2018年12期
论文发表时间:2018/8/24
标签：头孢论文; 原料药论文; 杂质论文; 溶液论文; 物质论文; 色谱论文; 高效论文; 《健康世界》2018年12期论文;