大同市质量技术监督检验测试所 山西大同 037008
摘要：对香菇菌丝体多糖(Lentinusedodesmyceliumpolysaccharides，LMPS)的2种组分(LMPS-1和LMPS-2)进行化学结构特征分析，旨为香菇菌丝体多糖的构效关系研究提供依据。文中利用高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱(GC)、红外光谱(IR)分析等对其化学结构特征进行解析，并测定其抗氧化活性。构成糖分析结果显示：LMPS1单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖和葡萄糖，其摩尔比为2.5：0.8：1：1.8；LMPS-2的单糖组成为鼠李糖、木糖和葡萄糖，其摩尔比为4.2：1：2.7。LMPS-1和LMPS-2均有较强的抗氧化活性，LMPS-2更为显著。香菇菌丝体多糖主要由阿拉伯糖和鼠李糖组成的吡喃型多糖，有较强的抗氧化活性。
关键词：香菇；菌丝体；多糖；化学结构；抗氧化
香菇(Lentinusedodes)又称为花菇，属真菌门(Eumycophyta)，侧耳科(Pleurotaceae)，香菇属(Lenti-ns)，是世界第二大食用菌。香菇口味鲜美，营养丰富，富含多糖、维生素、蛋白质、多元酚、朴菇素、膳食纤维等多种生物活性物质菌丝体多糖是香菇菌丝体中最重要的生物活性物质，作为一种免疫促进剂，已引起人们广泛的兴趣。菌丝体多糖的生物学功能主要有以下几方面：抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、免疫调节、抗炎、保肝护肝和降血糖等作用。有关香菇菌丝体多糖的药理研究，特别是结构方面的研究已引起国内外学者的高度关注，并成为多糖领域的研究热点。本研究对香菇菌丝体多糖(LentinusedodesmyceliumPolysaccharides，LMPS)通过DEAE-52纤维素柱和G-100葡聚糖多糖进行分离纯化。分别研究了LMPS-1和LMPS-2分子质量、单糖组成、键型和抗氧化活性，为香菇菌丝体多糖的研究开发及利用提供参考。
1.两种组分的体外抗氧化活性
1.1LMPS-1和LMPS-2对DPPH自由基的清除作用
在浓度为200mg/L时，LMPS-1和LMPS-2对DPPH的清除率分别为(13.85±0.69)％和(32.96±1.65)％。据报道，当浓度为200mg/L时，桑黄菌丝体多糖对DPPH自由基的清除率为8％。结果表明，LMPS-2对DPPH具有较高的清除率，是桑黄的412％。
1.2LMPS-1和LMPS-2对羟基自由基的清除作用
在1000mg/L时LMPS-1和LMPS-2对羟基自由基的清除率分别为(8.50±0.43)％和(41.2±2.06)％。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆据相关报道，当浓度为1000mg/L时，虫草的清除率为20％，桦褐孔菌的清除率为10％。即LMPS一2对羟基自由基的清除作用是虫草的206．0％，桦褐孔菌的412.0％。
1.3LMPS-1和LMPS-2的还原力测定
在100mg/L时，LMPS-1和LMPS-2在700nm处测得的还原力分别为(0.19±0.O1)和(0.53±0.03)，据报道，桑黄的为0.10，树舌灵芝的为0.40，即LMPS-2的还原力是桑黄的530．0％，树舌灵芝的132.5％。LMPS-2的EC为893.2mg/L。
2.化学结构分析
用高效液相色谱分析多糖分子质量。LMPS．1色谱图出现了2个洗脱峰，说明LMPS-1含有分子质量相对集中的2个组分，因此，LMPS-1为不均一多糖。用GPC分析软件计算后可知，LMPS-1的Mw为5.49X104Da，Mn为2.40×104Da，Mv为5.01×104Da，Mz为1.07×104Da，Mp为1.24×104Da，LMPS-1的Mw/Mn值为2.29。LMPS-2为单一对称峰，说明LMPS-2为均一多糖。其Mw为1.35×104Da，Mn为1.05×104Da，Mv为3.55X104Da，Mz为1.20×104Da，Mp为1.14×104Da。LMPS-2的Mw/Mn值为1.29。根据标样的保留时间来测定单糖的含量，LMPS-1含有37％的阿拉伯糖、11.4％的木糖、18.2％的甘露糖和33.4％的葡萄糖，它们的摩尔比为2.5：0.8：1：1.8，从这些数据可以看出，LMPS-1含量最多的单糖是阿拉伯糖和葡萄糖。LMPS-2含有54.7％的鼠李糖、10.8％的木糖和34.5％的葡萄糖，它们的摩尔比为4.2：1：2.7，可以看出LMPS-2含量最多的单糖是鼠李糖和葡萄糖。LMPS-1在2927.76和3418.64cm附近有明显的吸收峰，其主要由-0H和C-H的伸缩振动引起。而1642.63Cm处的吸收峰说明LMPS-1中含有酰胺羰基。1371.95cm-1处吸收峰为C-O对称伸缩振动引起，1415cm处吸收峰为C-H变角振动引起，在1023.73、1082.21、1156.03cm处的吸收峰是糖环上的C-0和O-H伸缩振动引起的，这表明LMPS-1中存在D-吡喃环。760.15cm处的吸收峰主要由D-葡萄糖吡喃环对称环伸缩振动引起，930.25cm处的吸收峰主要由D-葡萄糖吡喃环非对称环伸缩振动引起的。在3417.98和3441.87cm附近有较强的吸收峰，2个峰分别由-0H和C-H的伸缩振动引起。在2366.27cm处吸收峰为脂肪族C-H伸缩振动特征，1615.74cm-1处的吸收峰说明LMPS-2中含有酰胺羰基，1238.04am为非对称的硫酸酯(S-0)伸缩振动特征，常被用于计算多糖中硫酸酯的含量。在1147.85、1023.13cm处的吸收峰是由C-0和O-H伸缩振动引起的，这表明多糖中存在D-吡喃环。
3.结论
在本试验中，经过DEAE-纤维素离子交换柱和葡聚糖G-100凝胶柱的分离，LMPS分离得到多糖组分分别为LMPS-1和LMPS-2。利用气相色谱法测定了LMPS-l和LMPS-2单糖的组成。发现LMPS-1中主要含有阿拉伯糖和木糖，LMPS-2中主要含有鼠李糖和阿拉伯糖，LMPS-1和LMPS-2中阿拉伯糖的含量都比较高。但是在结构分析中，通过红外光谱法对LMPS-1、LMPS-2在4000～400cm。区段进行扫描，结果显示，2种多糖均为D-毗喃型。其中，LMPS-2中检测到脂肪族C-H伸缩振动特征峰和非对称的S=O伸缩振动特征峰，说明多糖可能是以含有硫酸酯的脂多糖形式存在。由于抗氧化剂对不同的氧化剂或自由基的作用原理各有不同，所以目前没有单一的方法可以一次性准确的反映出所有抗氧化剂或自由基的作用机制。因此，在本试验中选取了羟基自由基、还原力和DPPH自由基3个指标对香菇菌丝体多糖组分的体外抗氧化活性进行测定。结果显示，LMPS-1和LMPS-2对DPPH自由基、羟基自由基均有较强的清除能力；两者均有较强的还原力，并且LMPS-2的体外抗氧化活性更强。
参考文献
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论文作者:郭天华
论文发表刊物:《建筑学研究前沿》2017年第35期
论文发表时间:2018/5/24
标签：多糖论文; 菌丝体论文; 香菇论文; 活性论文; 抗氧化论文; 伸缩论文; 单糖论文; 《建筑学研究前沿》2017年第35期论文;