【摘 要】目的：探讨本临床药学实验室监测肾移植患者血浆中霉酚酸药物浓度方法的可靠性。分析影响病人血药浓度的相关因素，为制定合理的个体化给药方案提供参考。方法：采用酶放大免疫（EMIT）法，选取我院数据收集较为齐全的13 例肾移植患者为研究对象，归纳、总结出影响药物血药浓度的相关因素。结果：实验测得霉酚酸的批内精密度 RSD 分别为7.08%、1.49%、2.16%；批间精密度 RSD 分别为8.51%、5.93%、3.12%；回收率为100.5%、99.8%、100.8%，在2.5—30 ug/ml 范围内线性良好。术后一个月内13 个患者MMF 血药浓度平均值在0.24±0.12—3.68±2.29ug/ml 之间。结论：实验表明本实验室采用EMIT 法测定血药浓度的精密度、准确性和线性良好。对其进行血药浓度监测有助于提高器官移植术后免疫抑制剂治疗的成功率。
【关键词】骁悉；酶放大免疫法；血药浓度监测；合理用药【Abstract】Objective：Reliability mycophenolic acid in human plasma drug concentration in blood of the clinical pharmacy laboratory monitoring inpatients with renal transplantation. To analyze the related factors affecting the blood concentration，for making the rational individual regimen providesreference. Method：The enzyme amplification immune （EMIT），renal transplantation in our hospital from 2012 January to 2013 December were selectedas research object，summed up the factors affecting blood drug concentration. Results：To Mycophenolic acid within RSD were 7.08%，1.49%，2.16%；group RSD were 8.51%，5.93%，3.12%；the recovery rate was 100.5%、99.8%、100.8%，good linearity in the range of 2.5 to 30ug/ml. One month afterthe operation in 13 patients MMF blood concentration of the average value was 0.24 ± 0.12，3.68 ± 2.29ug/ml.Conclusion：Experiments show that theprecision，accuracy and linearity of the laboratory determination of blood drug concentration by EMIT method is good. carries on the monitoring of blooddrug concentration contributes to the immunosuppressive therapy can improve the success rate of organ transplantation.【key words】mycophenolate mofetil；immunization magnify enzyme；blood drug concentration monitoring；rational drug use【中图分类号】R287【文献标识码】A【文章编号】1276-7808（2015）-07-019-02
骁悉（Cellnet）是一种新型免疫抑制剂，化学名为霉酚酸酯（MMF）。霉酚酸酯是从青霉属真菌中提取，纯化而获得的一种微生物产物，它是霉酚酸的2-乙基酯类衍生物，在人体内被吸收后经水解脱酯形成具有免疫抑制活性的代谢产物霉酚酸（MPA）。MPA 通过抑制T 细胞的活化和增殖，抑制B 淋巴细胞抗体的生成和细胞因子的产生，此外MPA 还能通过抑制蛋白质的糖基化而降低粘附分子的表达，从而抑制体内的细胞免疫和体液免疫过程[1，2]。
本实验采用酶放大免疫分析法（EMIT）以我院数据收集较为齐全的13例肾移植患者为研究对象对血浆中酶酚酸药物血药浓度进行监测并对其测定值进行回顾性分析，同时结合其生理、病理以及疾病的所有信息，探讨影响骁悉血药浓度与临床疗效的主要相关因素，为临床制定更好的个体化给药方案提供参考。
1 材料与方法1.1 研究对象所有受试者为入住桂林医学院附属医院泌尿外科院数据收集较为齐全的肾移植术后的患者，共选取其中13 人，女性患者5 例，年龄24—47岁，平均年龄32.4 岁，男性患者8 例，年龄36—57 岁，平均年龄44 岁。
1.2 仪器与试剂Viva-E（生化分析仪（德国西门子公司））；XH-B 型涡旋混合器（江苏康健医疗用品有限公司）；高速离心机（美国雅培公司）。质控液（Tac/CsAControl）（批号：1284）.酶酚酸试剂盒（批号：U3008）、标准液（批号：U3010）、质控液（批号：U3009）均为德国西门子公司提供。
1.3 方法学考查精密度试验 取高、中、低浓度MMF 的质控品，每份标本重复测定5 次，进行批内RSD 实验；每份标本测定5 次/d，连续测定3d，进行批间RSD 实验，同时进行回收试验，结果见表1。稳定性试验 实验结果见表2。标准曲线的绘制 结果见图1。
1.4 测定方法霉酚酸：将EDTA2K3 真空管收集的沉淀血样直接于仪器上进行测定，并配以质控液进行质量控制，待标准液定标曲线完成后，仪器自动拟合出质控品和血样的浓度结果。
EMIT 法使用新启用的试剂盒进行定标试验。定标后每次测试均跟随低、中、高3 个浓度水平的质控液进行质量控制。当质控在规定限度范围内时，沿用首次的定标曲线；如质控超标，需重新定标。
2 结果
2.1 骁悉方法学：
采用SPSS16.0 软件统计分析13 例MMF 的肾移植患者中收集的几项临床指标，结果显示总胆红素与霉酚酸的血药浓度呈负相关性，随着霉酚酸血药浓度的升高而降低（r=0.05，p=0.0004）。MMF 的血药浓度平均值在0.24±0.12—3.68±2.29ug/ml 之间。血肌酐水平与血药浓度之间未发现相关性，这可能是由于肾移植术后第一个月内移植肾功能不稳定导致的，以后在研究骁悉对移植肾功能的影响时应排除术后第一个月内血肌酐水平的数据。由于本临床实验室监测肾移植术后临床指标的时间有限，未对其术后时间与血药浓度的相关性进行分析，以后可以进一步扩大研究样本和观察时间来评估影响血药浓度与临床疗效的相关因素。
3．讨论研究表明，服用相同剂量的霉酚酸酯，不同患者间霉酚酸血浓度和血浆浓度-时间曲线下面积值可相差10 倍。其影响因素包括肝、肾功能损害；白蛋白、胆红素、血红蛋白浓度的不同；合用药物、移植后合用药物的时间；个体特征（年龄、性别、种族等）等。尤其是肾移植患者往往采用多种免疫抑制剂的联合用药，在正常剂量下，霉酚酸酯和环孢素A 或他克莫司联合应用时，其药代动力学是否发生改变尚不清楚。本文结合上述收集的临床数据以及参考总结历年文献，主要从药物吸收、肾功能水平、术后时间和联合用药四个主要方面阐述影响骁悉体内药物代谢动力学的因素。
3.1 影响药物吸收的因素：阿昔洛韦﹑更昔洛韦、丙磺舒可与本品代谢物酚化葡萄糖醛酸（MPAG）竞争肾小管排泄，合用可使二者血药浓度均增加。含有镁和氢氧化铝的抗酸剂可减少本药的吸收[14]。考来烯胺和其他影响肝肠循环的药物，会影响本品的吸收。服用铁离子制剂会造成MMF 的吸收显著降低（AUC、MPA 的Cmax），因此骁悉不宜与铁离子制剂和高含铁食品同服。进食不影响MMF 的吸收，空腹和餐后口服骁悉所测定的MPA-AUC 值无统计学差异，但进食后MPA 的Cmax 将降低25-40%，因此建议空腹给药[6]。
3.2 肾功能水平对其药动学的影响：Holford 等 [7，8]对比研究了不同GFR 水平的肾功能不全患者口服骁悉后的药代动力学参数，发现MPA 的清除率与GFR 无关，但MPAG的清除率与GFR 有很好的相关性，MPA 和MPAG 的清除率都不受血液透析或者腹膜透析的影响。另外，当GFR 降低时Cmax 有升高的趋势。现有的体内外试验均证明肾功能不全时MPA 与蛋白的结合率降低，相应的游离MPA 浓度升高。这可能是由于尿毒症状态影响了蛋白和MPA 的结合率，以及潴留的MPAG 和MPA 竞争蛋白结合位点的共同作用所致。
3.3 术后时间对其药动学的影响：夏橞生等对17 例未成年的同种异体肾移植患者进行跟踪研究：接受同种异体肾移植的未成年患者术后连续服用固定剂量的骁悉，术后3 个月时MPA-AUC 是术后3 周的2 倍，与此同时，游离MPA-AUC的平均值并没有随时间发生明显的变化，而MPA 游离分数下降了35%。成人的试验也表明：肾移植术后稳定期（>3 个月）时的MPA-AUC和峰浓度较肾移植术后近期升高约50%。
参考文献：[1]占锦峰，胡伟新。霉酚酸酯血药浓度监测的临床应用［J]。肾脏病与透析肾移植杂志，2007，16（5）：468-472。
[2]郑荣，董振南等。均相酶免疫分析法测定霉酚酸血药浓度的方法学评价[J]。军医进修学院学报，2010 Nov，31（11）。
基金项目：课题来源 广西卫生厅中药科技专项攻关课题。基金编号：（GZGG13-08）。
论文作者:谭亲友 唐桂芳
论文发表刊物:《世界复合医学》2015年第7期供稿
论文发表时间:2015/9/7
标签：霉酚酸论文; 浓度论文; 术后论文; 患者论文; 肾移植论文; 药物论文; 免疫论文; 《世界复合医学》2015年第7期供稿论文;