无锡市梁溪区南禅寺街道社区卫生服务中心 （原无锡市老年病医院检验科）邮编： 214001
随着第三代头孢菌素的广泛大量使用，细菌因产生超广谱β-内酰胺酶致病菌对抗生素的耐药是临床抗感染治疗过程中经常面临的棘手问题。抗生素耐药不仅仅是一个重要的医学问题，且已经逐渐发展成为一个严重的社会问题。抗生素的滥用问题造成了耐药菌株的大量出现，给临床消炎和抗感染治疗造成了很大困难。现对2007年1月至2009年12月分离得到的产ESBLs的大肠埃希菌的耐药性进行分析，为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。
主要执行过程
1 资料与方法
1.1 菌株来源菌株为2007年1月至2009年12月住院患者的标本中分离的大肠埃希菌。
1.2菌种鉴定 参照《全国临床检验操作规程》分离培养。临床标本鉴定方法均经常规鉴定技术鉴定，采用法国Bio-Merieux公司GNB鉴定卡确认。
1.3药敏试验方法 采用K-B纸片扩散法,培养基采用M-H琼脂。药敏纸片头孢他啶(CAZ)、头孢他啶+克拉维酸(CD02)、头孢噻肟(CTX)、头孢噻肟+克拉维酸(CD03)均为英国Oxoid公司产品。GNB鉴定卡、和 MH 培 养 基 ( 干 粉 ) 均 为 法 国Bio-Merieux公司产品。其他药敏纸片为杭州天和微生物试剂有限公司产品,M-H培养基由本科室自行配制,操作方法与判断标准均严格按美国临床实验室标准化研究所美国临床实验室标准化委员会(CLSI/NCCL S)标准。
1.4 ESBLs检测方法 抗生素纸片组合为CAZ和CD02，CTX和CD03。按标准KB法操作，35 ℃培养过夜。如两组纸片中有任一组含克拉维酸的纸片抑菌环直径比不含克拉维酸的纸片抑菌环直径>5 mm时，即为ESBLs阳性。
1.5 质量控制。 质控菌株:大肠埃希菌ATCC25922(头孢他啶:头孢他晓+克拉维酸≤2mm; 肺炎克雷伯菌ATCC700603(头孢他啶:头孢他啶+克拉维酸≥5mm)。
结果评价
2．1 2007-2009年共检出大 肠 埃 希 菌196 株，其中产ESBLs54株。2007 年 检 出 大 肠 埃 希 菌 41株 ， 其 中 产ESBLs7株，检出率为17.1%， 2008 年 检 出 大 肠 埃 希 菌 60 株 ， 其 中 产ESBLs16株，检出率为26.7%，2009年检出大肠埃希菌95株，其中产ESBLs 31株，检出率为32.6%.检可以看出2007 - 2009年大肠埃希菌感染是逐年增加,已成为医院感染最主要的病原菌之一。 临床分布情况：从患者不同标本分离出产ESBLs菌株主要分布在呼吸科、泌尿外科、康复科。近年来产ESBLs菌株的感染在不同年龄组的构成比均有不同程度的提高,但以老年患者居多。本次所统计的均为老年患者(>60岁)占94.64%,其中(>80岁)占83.92%;在不同类型的标本中,在尿和痰液中检出率较高，尿,占55.35%、痰30.36%，分泌物为10.71%、体液为1.79%、血液为1.79%。
2.2 198 株大肠埃希菌对19种抗生素药敏结果 2007-2009年产ESBLs和非产ESBLs大肠埃希菌耐药率 见表2，产ESBLs肠杆菌株的耐药率均明显高于非产ESBLs肠杆菌株。从三年检测情况分析未发现美洛培南，亚胺培南耐药菌株。对产ESBLs肠杆菌株，NCCLS规定在报告中注明对第三带头孢菌素类和氨曲南耐药。
3实验讨论
超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)多由肠杆菌科细菌产生,其中以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌最为常见[1]。ESBLs的编码基因位于质粒上,可以通过转化、转导、接合、转移等各种方式在不同细菌之间传递,使耐药基因在菌间扩散,使敏感菌变成耐药菌,且产ESBLs菌耐药谱广,表现为多重耐药,因此易造成耐药菌的流行[2]近年来随着β-内酰胺类抗生素的大量使用，导致产ESBLs的菌株明显增加，国内肠杆菌科细菌产ESBLs的发生率多介于20%~40%之间[3]。结果显示，大肠埃希菌产ESBLs的检出率虽然也在此范围，但有上升的趋势。从产ESBLs的病区来看，主要集中在呼吸科、泌尿外科、康复科。此现象与这些病区患者年龄偏大，免疫力较低，住院时间长易发生交叉感染，抗菌药物的应用量及种类比其他病区多有关。因此，上述科室在合理使用抗菌药物治疗的同时，还需要控制多重耐药菌的播散，加强病原菌的监测管理。经统计分析，产ESBLs肠杆菌株的耐药率均明显高于非产ESBLs肠杆菌株，前者不仅对头孢类药物和氨曲南耐药，还对氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类呈交叉耐药，这提示临床在抗感染治疗时要区别对待，防止耐药率和多重耐药的进一步上升。三年里产ESBLs肠杆菌株对头孢噻肟和氨苄西林的耐药率达到100%。产ESBLs肠杆菌株在三年里对氨曲南，三代、四代头孢的耐药率逐年在升高。可能与临床滥用这些抗生素有关。据报道，亚胺培南目前作为产ESBLs菌株最为敏感的药物，其耐药率的上升会给临床抗感染治疗带来很大的困难。总的来说，我院产ESBLs的大肠埃希菌耐药现象日趋严重，临床应限制超广谱抗菌药物的经验性使用，可采用轮换用药等策略，根据药物敏感性试验结果合理选用抗菌药物；同时应注意改善卫生条件，定期监测细菌的耐药情况，减少产ESBLs菌株的产生和播散，从而延长抗生素的使用时间。
参考文献
[1] SridharRN, Basavarappa KG, Krishna GL. Detection of extended spec-trum beta-lactamase from clinical isolates in Davangere[ J]. Indian J
PatholMicrobio,l 2008, 51(4): 497-499.
[2] 胡丽华,周建英,吴佳丽,等.超广谱β-内酰胺酶分子流行病学研究[J].医学杂志, 2008, 25(5): 281-283.
[3] LIAO G L, XIE Y W. The distribution of Gram-negative bacteria in clinical and analysis of antibiotic resistance [J]. JPract Med(实用医学杂志), 2008, 24(4): 662-663.
论文作者:周薛英,
论文发表刊物:《中国结合医学》2019年第01期
论文发表时间:2019/3/12
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