刘玲玲
奥芙莉（广州）食品有限公司
摘要：社会经济的高速发展使得人们的生活水平不断提高，人们也对生活质量提出了更高的要求，这里也包括对生活饮用水的水质要求。生活饮用水的水质若达不到人们的饮用标准，就会有害人的身体健康。因此，要对生活饮用水中存在的水质微生物进行有效的检测分析，确保饮用水中存在的微生物必须是对人们身体无害的或者是其存在的数量不会影响人的身体健康。
关键词：生活饮用水;菌群;滤膜法;稀释方法;能力验证
引言
保证生活饮用水的质量就需要对水质进行监测，而且也需要对水质检测的各个环节进行严格把控，以便确保生活饮用水能够达到一定的标准，让人们安全放心的饮用，对人们的生命安全有所保障，也是对国家、社会稳定发展的重要保障。微生物指标是判定饮用水水质是否适合饮用的重要依据,其中,大肠菌群是重要的检验项目。大肠菌群是食品是否被粪便污染的理想指示菌,耐热大肠杆菌和大肠埃希氏菌可作为致病菌指标。
1生活饮用水水质微生物检验分析的重要性
1.1 样品采集
在对生活饮用水进行微生物检测前，需要对所要检测的饮用水进行取样。在进行取样时要选择具有代表性的生活饮用水采集样品，在采集样品的过程中必须要进行无菌操作，这样才能确保采集的水样在进行检验前不会受到污染，而且在进行检验时要保证水样采集的时间是在4h之内，主要是为了避免水样在过长的放置时间里会产生变化或被污染，这样才能保证检测的准确性。避免因检测失误让人们误饮水质，导致人们的身体受到不好的影响。
1.2生活饮用水水质微生物检验
在对采集的饮用水样品进行检测时，要根据不同类型的水质微生物选择科学合适的检验方法对其进行检验，检验员还要考虑水样采集时的实际情况以及进行水样检验的环境等多方面，在进行检验时灵活变通，确保检验结果的准确性、实用性以及有效性，为人们能够安全饮水提供保障基矗
1.3生活饮用水水质微生物的检验结果分析
在对生活饮用水水质微生物的检验完成后，就需要对检验结果进行分析，通过对水质微生物准确的检验结果的分析，就能及时了解生活饮用水中的微生物的含量以及质量。若是含量超标，需要相关人员进行及时处理，保证人们的饮水安全；若是饮用水中含有致病性的微生物，则需要相关人员对其进行消毒杀菌，确保生活饮用水的安全性。以免对人们的身体造成伤害，发生不可挽回的后果，影响人们的幸福生活，进而影响社会经济的发展。
2生活饮用水中微生物检测的处理方法
2.1采集样品
在进行生活饮用水微生物检验方面，采集生活饮用水标本是一个极其重要的环节，首先采集的生活饮用水样本要具有代表性和广泛性，另外一方面收集样品的用具要尽量使用经过杀菌消毒处理的一次性用品，如果不能使用一次性用品，就要做好样品用具的消毒杀菌处理，保证样品不受其他污染源的污染。在样品采集时一般都是直接从水龙头获取样本，但是在获取样本前要对水龙头进行消毒杀菌处理，并将水管中贮存的自来水先放完，这样可以获取最为新鲜的饮用水样本，之后在含糖的培养基上贴上微孔滤膜，将培养基置于恒温37℃的环境下培养。
2.2方法
2.2.1阳性菌液的制备
将大肠埃希氏菌(ATCC25922)从磁珠保存管中接出,置于灭菌肉汤中,37℃培养24h。对照麦氏比浊管,使用灭菌生理盐水制备约100CFU/100mL的菌悬液,即为阳性菌液。
2.2.2待测水样的制备
按照能力验证参试指导书的方法处理2份冻干样品,无菌操作,使用灭菌生理盐水对冻干粉再水化,充分溶解、混匀,得到220mL待测水样。
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2.2.3试验方法
按照GB4789.1-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验总则》及GB/T5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》(以下简称GB/T5750.12-2016)的要求开展检测。阳性菌液分别过滤50、20、10、1mL菌液,不够100mL的使用灭菌生理盐水补齐,并按照
2.2.4的方法进行培养、验证、计数。
对照组则按照优化方法:使用生理盐水将阳性菌液稀释一倍,混匀,得到对照菌液。过滤对照菌液100、40、20、2mL,并在过滤2mL菌液前,往滤杯中加入10mL灭菌生理盐水。倒入菌液后沿滤杯壁旋转加入生理盐水补齐100mL,立即过滤。按照2.2.4的方法进行培养、验证、计数。
2.2.5能力验证待测水样的测定
能力验证待测水样根据以上试验得出的最优方法进行稀释、过滤。由于待测水样量有限,总大肠菌群和大肠埃希氏菌检验操作由2名实验人员独立操作,耐热大肠菌群由一名实验人员独立操作。
(1)总大肠菌群测定
过滤菌液后的滤膜夹取,滤膜截留细菌面朝上,紧贴在品红亚硫酸钠培养基上,平皿倒置于恒温培养箱内37℃培养24h。挑取特征菌落进行革兰氏染色,再接种乳糖蛋白胨培养液,于37℃培养24h,有产酸产气为阳性,并计算结果。
(2)耐热大肠菌群
过滤菌液后的滤膜夹取,滤膜截留细菌面朝上,紧贴在MFC培养基上,用防水胶带封贴每个平皿,并放入塑料袋内,浸到44.5℃恒温水浴里,培养24h。对可疑菌落转种EC培养基,44.5℃培养24h,如产气为阳性,并计算结果。
(3)大肠埃希氏菌
2.2.4中培养的有典型菌落生长的滤膜,细菌截留面朝上转移到NA-MUG平板上,于36℃培养4h。培养后将平板在暗处用波长为366nm功率为6W的紫外光灯照射,有荧光产生为阳性,计算结果。以上方法均使用生理盐水及空白滤膜做空白试验。
2.3分析
根据过滤系统的使用说明,滤膜计数的最佳菌落数为小于50CFU/片,因此本实验选取阳性菌量小于50CFU的水样进行。本实验先使用未经稀释的阳性菌液和经稀释的对照阳性菌液进行对比试验。对照阳性菌液为阳性菌液先经1倍稀释,并且在过滤水样量较少的情况下(2mL),在滤杯内先倒入一定量无菌生理盐水,再加水样,再补齐100mL,防止菌落聚集。经过对比试验,发现阳性菌液滤膜上菌落生长分散性较差,特别是滤杯边缘滤膜上的菌落,有聚集成片现象;稀释梯度菌落数比例不明显。对照阳性菌液菌落生长分散性较好,易于观察菌落特征和挑取,在低稀释度时可测出含菌量;同时旋转加入稀释液,一定程度上避免了滤杯边缘滤膜菌落聚集的现象。因此,选用对照菌液的处理及过滤方法,测定能力验证待测水样,结果比较满意,证实方法可行。
3讨论
水是人体最为重要的一种组成元素之一，是生命繁衍必不可少的元素，而生活饮用水质量的高低对人们的生活质量造成直接的影响，随着经济和生产业的迅速发展，人们对于生活饮用水的标准要求越来越高，研究表明，我们可以通过检测饮用水中的微生物数量来衡量饮用水的质量，在实际运用时,要根据待测水样的来源,对稀释倍数进行初判,再运用本论文优化的方法,以提高检验结果的准确性,从而提高实验室的检验检测能力。
结束语
综上所述，对生活饮用水水质微生物的检验分析可以为人们的安全用水提供保障，也有利于对生活饮用水水质微生物出现的问题进行早期处理，避免对人们的生活造成影响。经过对不同季节和不同区域的生活饮用水进行检验分析，我们发现，农村生活饮用水达标率低于城市，夏秋季节生活饮用水合格率低于冬春季节。
参考文献
[1]冯雪娇.关于水中总大肠菌群检测方法的探讨[J].黑龙江科技信息,2013,(14):32.
[2]扎丽帕?热合曼,董宪春.生活饮用水水质微生物检验分析的重要性[J].世界最新医学信息文摘,2017,17(77):175.
论文作者:刘玲玲
论文发表刊物:《中国西部科技》2019年第21期
论文发表时间:2019/11/26
标签：滤膜论文; 微生物论文; 生活饮用水论文; 菌落论文; 水质论文; 生理盐水论文; 水样论文; 《中国西部科技》2019年第21期论文;