江秀全 刘晓军 林燕青 游琴秀 郭琳琳
（福建省龙岩市第二医院院感科检验科 福建 龙岩 364000）
【摘要】 目的：了解我院临床分离病原菌的分布特点及其对常用抗菌药物的敏感性和耐药性情况。方法：细菌分离按常规方法进行，抗菌药物敏感试验按CLSI2012年版进行并判断结果。结果：5231株临床分离菌中：革兰阳性菌1236株，占23.6%（1236/5231），革兰阴性菌2147株，占41.0%（2147/5231）。革兰阳性菌中，金黄色葡萄球菌为分离菌株的第一位。葡萄球菌属细菌中耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林CNS（MRCNS）检出率分别为11.6%和39.5%，万古霉素对革兰阳性球菌的抗菌活性最强，未发现万古霉素中介金葡菌（VISA）和耐万古霉素金葡菌VRSA菌株。屎肠球菌对测试药物的耐药率普遍高于粪肠球菌，未发现对利奈唑胺、替加环素耐药株。革兰阴性菌中，大肠埃希菌位居第1位（占32.1%），肺炎克雷伯菌位居第2位（占17.3%）。厄他培南对革兰阴性肠杆菌的抗菌活性最强，其次是亚胺培南。铜绿假单胞菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢替坦、呋喃妥因、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢呋辛酯、头孢曲松的耐药率在97%以上，呈现多重耐药。鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星的耐药率分别是3.7%和8.3%低于亚胺培南耐药率30.8%，对呋喃妥因、头孢唑啉、头孢曲松的耐药率100%，并呈现广泛耐药株。结论：微生物检验为临床提供可靠用药依据，合理选用抗菌药物是治疗和预防细菌耐药的关键。
【关键词】 耐药性；细菌；细菌耐药性监测；细菌药物敏感性试验
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）11-0387-04
Distribution and antibiotic resistance of bacterial pathogens isolated during the period 2012 in our hospital Jiang xiuquan,Liu Xiaojun, Lin Yanqing, You Qinxiu, Guo Linlin. The Second Hospital of Longyan ,Fujian Province, Longyan 364000, China
【Abstract】Objective To investigate the distribution and antibiotic resistance of bacterial pathogens isolated during the period 2014 in our hospital. Methods Clinical isolates were identified and subjected to antimicrobial susceptibility testing by means of a unified protocol. The results were analyzed according to CLSI breakpoints(2012). Results Of the 5231 clinical isolates, gram positive and gram negative organisms accounted for 23.6% (1236/5231 )and 41.0%(2147/5231), respectively. Coagulase negative Staphylococcus (VISA)was the most frequently isolated gram positive bacteria. The prevalence of methicilin-resisitant strains was 11.6% in Staphylococcus aureus(MRSA),and 39.5% in coagulase-negative Staphylococcus(MRCNS).Vancomycin was the most active antimicrobial agent against gram positive cocci. No BISA or VRSA strain was identified. E. faecium strains are more resistant to most of the antibiotics tested than E. faecalis. No strain was resistant to linezolid or tigecycline. Escherichia coli were the most frequently isolated gram negative bacteria in our hospital, accounting for 32.1%, followed by Klebsiella strains. Ertapenem was the most active antibacterial agent agent tested against gram negative bacilli. About 3.7%and 8.3% of the A. baumannii strains were resistant to cefoperazone or shubatan and amikacin,respectively in our hospital,lower than imipenem 30.8%. P. aeruginosa showed relatively lower resistance to ceftazidime, amikacin and ciprofloxacin. More than 97% of these P. aeruginosa strains were resistant to other antibiotics. Conclusions The microbial test provide reliable scientific evidence for clinical medication, which should be paid more attention in clinical and laboratory practice. Rational antimicrobial therapy is a key for control of antimicrobial resistance.
【Key words】Antibiotic resistance; Bacterium; Surveillance of antimicrobial resistance; Antimicrobial susceptibility testing
随着抗菌药在临床的广泛应用，多重耐药和泛耐药菌株日益增多，已成为公共卫生领域的严重问题。现将2014年我院细菌耐药性监测结果报道如下。
1.材料与方法
1.1 材料
1.1.1菌株来源 收集2014年1月1日至12月31日临床分离株(5231 )菌株，按统一方案进行细菌对抗菌药的敏感性试验。
1.1.2培养基 药敏试验用Mueller-Hinton琼脂，抗菌药物纸片为OXOID公司产品。
1.2 方法
1.2.1菌种鉴定和药敏试验 细菌鉴定用法国生物梅里埃的产品VITEK2-compact仪器.按CLSI推荐Kirby-Bauter纸片扩散法进行，质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC 25923、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎链球菌ATCC 49619和流感嗜血杆菌 ATCC 49247。
1.2.2 β内酰胺酶检测 采用头孢硝噻酚纸片（英国OXOID公司产品）检测流感嗜血杆菌的β内酰胺酶。
1.2.3 ESBLs检测 按CLSI推荐的纸片筛选和酶抑制剂增效确证实验测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌中产ESBLs菌株。
1.2.4肺炎链球菌的青霉素E实验 苯唑西林纸片测定抑菌圈直径≤19mm的肺炎链球菌菌株，用青霉素E实验条测定其MIC值，按CLSI2012年非脑膜炎和脑膜炎肺炎链球菌标准，分别判定为对青霉素中介或耐药株。
1.2.5耐万古霉素肠球菌（VRE）检测 万古霉素纸片法测定为非敏感菌株，用万古霉素和替考拉宁E试验条测定MIC值确认。
1.2.6药敏试验结果的判读和数据分析 按CLSI2012年版标准判读药敏试验结果，采用WHONET5.6版本统计分析数据。
2.结果
2.1 病原菌分布 2014年我院临床分离病原菌5231株，临床分离菌中：革兰阳性菌占23.6%（1236/5231），革兰阴性菌占41.0%（2147/5231）。革兰阳性菌中最多见者依次为金黄色葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、肺炎链球菌和屎肠球菌。革兰阴性菌中最多见者依次为为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、奇异变形杆菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、粘质沙雷氏菌。主要的革兰阳性菌及革兰阴性菌株分布见表1、表2。
排在前6位主要细菌依次为大肠埃希菌13%、肺炎克雷伯菌7%、铜绿假单胞菌4%、金黄色葡萄球菌4%、鲍曼不动杆菌3%、溶血性葡萄球菌3%、粪肠球菌3%、屎肠球菌2%、阴沟肠杆菌1%。
2.2 临床主要病原菌对常用抗菌药物的耐药性
2.2.1 葡萄球菌属细菌 我院分离的金葡菌中耐甲氧西林金葡菌（MRSA）的检出率为11.6%（79/683），明显低于MRCNS的检出率39.5%（370/683）。药敏试验结果显示MRSA和MRCNS对万古霉素均敏感，结果见表3。
药敏试验结果显示MRSA和MRCNS对β内酰胺类、大环内酯类、奎若酮类和氨基糖苷类抗菌药物表现为耐药率均高于MSSA和MSCNS。复方新诺明、克林霉素例外。葡萄球菌属细菌中均未发现对万古霉素、替加环素、利奈唑胺耐药的菌株。
2.2.2肠球菌属细菌 肠球菌属细菌中屎肠球菌83株占32.2%（83/258），粪肠球菌159株占61.6%（159/258），其他肠球菌占6.2%（16/258）。屎肠球菌比率低于粪肠球菌。未发现屎肠球菌和粪肠球菌对替加环素、利奈唑胺的耐药株，但是万古霉素出现少量耐药菌株与往年耐药率0不同[7]。屎肠球菌对青霉素、氨苄西林的耐药率在90%以上，莫西沙星、环丙沙星和左氧氟沙星耐药率在85%以上，除奎奴普丁/达福普汀、四环素、克林霉素外屎肠球菌耐药率明显高于粪肠球菌。见表4。
2.2.3主要肠杆菌科细菌 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对抗菌药物的耐药率见表5。厄他培南对肠杆菌科各类细菌的抗菌活性最强，其次为亚胺培南。头孢吡肟对主要肠杆菌的抗菌活性较头孢他啶、头孢曲松、头孢唑林强。大肠埃希菌对氨苄西林耐药率比较高83.3%，大肠埃希菌对头孢唑林、头孢曲松、氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星、复方新诺明耐药率50%以上，对头孢吡肟的耐药率均低于20%。肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药率比较高87.3%，除对氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉、头孢曲松、复方新诺明、呋喃妥因外对其他受试抗菌药物的耐药率均低于30%。阴沟肠杆菌对头孢唑林及氨苄西林耐药率高为90%以上，对其他受试抗菌药物的耐药率均低于50%。肠杆菌科细菌对亚胺培南和厄他培南89%或100%以上敏感。
2.2.4 革兰阴性杆菌主要非发酵菌菌株 铜绿单胞菌占据革兰阴性菌的第3位，鲍曼不动杆菌位居第4位。铜绿假单胞菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢替坦、呋喃妥因、复方新诺明、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢呋辛酯、头孢曲松耐药率90%以上，对氨曲南和头孢他啶的耐药率分别为19.3%和13.1%，对其他测试抗生素的耐药率均在10.7%以下，对亚胺培南耐药率为5.9%。鲍曼不动杆菌对头孢唑啉和头孢曲松的耐药率为100%，对头孢替坦、头孢呋辛、头孢呋辛酯的耐药率为87%以上，对亚胺培南耐药率为30.8%，耐药率低于10%抗菌药物只有头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星。见表6。
3.讨论
2014年本院5231株非重复临床分离菌中：革兰阳性菌1236株，占23.6%，革兰阴性菌2147株，占41.0%。排在前6位细菌依次为大肠埃希菌13%、肺炎克雷伯菌7%、铜绿假单胞菌4%、金黄色葡萄球菌4%、鲍曼不动杆菌3%、溶血性葡萄球菌3%、粪肠球菌3%、屎肠球菌2%、阴沟肠杆菌1%。
革兰阳性菌中，葡萄球菌属细菌中耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林CNS（MRCNS）检出率分别为11.6%和39.5%，MRCNS检出率高于MRSA。未发现万古霉素中介的金葡菌（VISA）和万古霉素高度耐药的金葡菌（VRSA）株。药敏试验结果显示MRSA和MRCNS对β内酰胺类、大环内酯类、奎若酮类和氨基糖苷类抗菌药物表现为耐药率均高于MSSA和MSCNS，与2011年CHINET细菌耐药性监测相同[1]，复方新诺明、克林霉素、奎奴普丁/达福普汀例外。MRSA和MRCNS对利奈唑胺、替加环素和万古霉素保持高度敏感，未检出耐药菌株，以上三类药是患者MRSA和MRCNS感染的首选治疗药物。
肠球菌属细菌中屎肠球菌83株占32.1%，粪肠球菌159株占61.6%,其他肠球菌占6.2%。屎肠球菌比率低于粪肠球菌。发现屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素的耐药率分别是3.6%和1.9%与往年不同[7]，这与临床上广泛应用万古霉素有关，未发现屎肠球菌和粪肠球菌对替加环素、利奈唑胺的耐药株。屎肠球菌对青霉素、氨苄西林的耐药率在90%以上，环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、克林霉素、红霉素的耐药率在85%以上，除奎奴普丁/达福普汀、四环素、克林霉素外屎肠球菌耐药率明显高于粪肠球菌。粪肠球菌对青霉素G、氨苄西林耐药率较低，分别6.9%、3.2%。可以用于粪肠球菌引起的感染。据报道利奈唑胺在体内对粪肠球菌和屎肠球菌均有较好的抑菌活性[2]，美国FDA批准可用于治疗耐万古霉素屎肠球菌感染。本次检测结果也表明肠球菌属细菌对利奈唑胺高度敏感，未分离到耐药株。目前国内外均有报道利奈唑胺耐药的肠球菌属细菌，与临床上广泛应用利奈唑胺有关。因此严格掌握应用利奈唑胺的适应证，极为重要。
大肠埃希菌为我院分离菌株中革兰阴性菌中的第1位（32%），肺炎克雷伯菌居第2位（17%）。大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌产ESBLs的检出率分别为63.21%（512/810）和29.51%（239/810）与往年不同[6]有明显增高。大肠埃希菌和克雷伯菌属的主要耐药机制之一是细菌产ESBL，致细菌对β内酰胺类抗生素耐药，因此及时检测细菌是否产ESBLs，对指导临床合理用药很有帮助。
由于广谱抗生素和免疫抑制剂的广泛使用，出现了多重耐药和广泛耐药菌株。碳青霉烯类抗生素是治疗鲍曼不动杆菌重症感染的首选药物，但近年来出现了对碳青霉烯类抗生素耐药的菌株，同时对常用广谱抗菌药物敏感性也显著下降A. baumannii（n=157）。有报道鲍曼不动杆菌对亚胺培南的敏感率由95%逐年下降，至2011年已经降至40%以下[3]。我院资料显示该菌对亚胺培南耐药率为30.8%，敏感率为69.2%。鲍曼不动杆菌的耐药机制包括产生耐药酶，菌莫通透性降低、主动外排增加、基因突变及整合子基因扩散[4]。其对碳青霉烯类抗生素的耐药主要是产碳青霉烯酶，我国主要存在OXA23型碳青霉烯酶，耐药株可在医院内科室间传播[5]。本监测数据显示鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦敏感率90.7%、阿米卡星敏感率89.7%这两种抗生素敏感率较高，可为临床用药提供依据。铜绿假单胞菌对阿米卡星、妥布霉素、庆大霉素、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦敏感率90%以上。对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、呋喃妥因、头孢替坦、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢呋辛酯、头孢曲松耐药率95%以上，铜绿假单胞菌亦为医院感染常见病原菌，并常呈现多重耐药，应引起重视。
我院ICU、肿瘤科和呼吸科患者病情危重、基础病多、免疫功能低，加之接受放疗、化疗后骨骼抑制使白细胞下降，使用糖皮质激素、免疫抑制及广谱抗菌药物，极易发生细菌感染以及耐药菌感染。因此，了解细菌分布、检测细菌耐药性，指导合理选用抗菌药物极为重要。微生物实验室应认真做好细菌的流行病学调查和耐药性检测工作，为临床医师提供合理的用药依据。同时，医院应加强抗菌药物的使用管理，规范抗菌药物的应用，按照患者的病情及抗菌药物使用原则定制正确的用药方案，控制医院感染和细菌耐药性发展。
【参考文献】
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[6]江秀全，林燕青等.2012年我院临床分离细菌分布及耐药性监测.医药前沿杂志,2013,3（8）：87-89.
论文作者:江秀全,刘晓军,林燕青,游琴秀,郭琳琳
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第11期供稿
论文发表时间:2015/7/29
标签：头孢论文; 球菌论文; 杆菌论文; 细菌论文; 霉素论文; 菌株论文; 氨苄西林论文; 《医药前沿》2015年第11期供稿论文;