广西省柳州市潭中人民医院 广西柳州 545001
【摘 要】目的：探讨痰液标本预处理在细菌学检验中的临床价值。方法：选取我院内科及儿科2013年6-2015年6月收治的患者为对象，送检其380例痰标本，所有标本经革兰染色筛选出合格标本，将合格标本进行预处理后接种培养，与直接接种结果比较，对比其结果阳性率。结果：合格痰标本阳性检出率为58.08%，不合格标本阳性检出率为7.15%；经过痰液预处理有效提高了阳性菌株的检出率，但预处理时的孵育时间过长会使得需氧型阳性菌的检出率降低。结论：对痰标本进行细胞学镜检及消化液预处理，有利于提高痰标本的质量，并有效提高其阳性菌检出率，值得临床广泛推广使用。
【关键词】痰液；预处理；细菌学检验
对于呼吸道感染患者，临床常需要取患者痰液进行微生物检验，以确定治疗方案。而通常情况下痰标本是通过患者咯痰采集，而上呼吸道中的正常菌群会不同程度的污染送检标本。选取我院内科及儿科2013年6-2015年6月收治的患者为对象，对其痰标本进行细菌学检查，研究痰标本在预处理前后的阳性检出率，分析预处理对痰标本细菌学检验的临床应用价值，现具体报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选取我院内科及儿科2013年6-2015年6月收治的患者为对象，收集痰标本380例，所有标本均为自然咯痰法收集，为患者清晨起床清水漱口数次后，尽力从气管深部咳出的第一口痰，收集于无菌容器中及时送检。标本送检后，进行细菌培养前，先做细胞学镜检，取适量标本涂片行革兰染色，显微镜下观察白细胞及鳞状上皮细胞数，在低倍视野下检查，白细胞高于25个每低倍视野，鳞状上皮细胞小于10个每低倍视野，即为合格痰标本[1]。其中合格标本167例，不合格标本213例。
1.2方法
痰标本接种：接收标本后，按照《全国临床检验操作规程》[2]标准操作，用无菌接种环挑取脓性或有血丝等病变部位标本，每个标本均同时接种于麦康凯平板、血平板及巧克力平板，在35℃培养箱中培养24～48小时后观察；观察比较合格标本和不合格标本对细菌学检查结果的影响。痰标本预处理：筛选出的合格标本分别加等量痰消化液后，于35℃孵箱中孵育15min、30min后分别接种于上述三种平板中，比较观察痰标本预处理前后的细菌学检查结果。
1.3观察指标
比较合格痰标本和不合格痰标本的细菌学检查结果的阳性率，并比较在预处理前和预处理后15min、30min的细菌学检查结果的阳性率。以评价痰标本预处理对其细菌学检查的影响。
2结果
2.1合格菌株和不合格菌株直接接种培养结果比较
所有标本均为呼吸道感染患者痰液，分离菌株主要为革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌、流感嗜血杆菌及念珠菌，其中革兰阴性杆菌占75.1%、革兰阳性球菌占17.7%，其余为念球菌、流感嗜血杆菌等。其中主要致病菌为流感嗜血杆菌，以及部分条件致病菌。两组标本直接接种的细菌学检查结果阳性率比较，详见表1。
2.2比较合格标本预处理前后的细菌学检查结果
合格痰标本预处理后进行培养，其结果与直接接种比较，在孵育15min和孵育30min后其检出率均较直接接种高，详见表2。
3讨论
有临床研究表明[3]临床痰标本的留取采用自然咯痰法，因此其标本的合格率较低，一般在40%左右，因此，痰标本在培养前要进行严格筛查。自然咯痰法采集痰标本时，痰液经过上呼吸道时会被其中正常菌群不同程度的污染[4]，因此痰液培养常难以辨别其致病菌。而且痰培养结果的准确性与标本质量、病原菌生长速度及患者是否大量使用抗生素等因素有关[5]。因此在培养前对痰液进行预处理能有效提高痰标本的细菌学检查结果。
本次研究，首先通过革兰染色筛选合格标本，在直接涂片染色镜检筛选合格标本时，同时在油镜下观察痰标本中的细菌染色情况、排列和形态可初步判断菌种及细菌数量，有利于判断痰标本的质量；并可有效判断是否存在真菌感染，有利于真菌感染的诊断并增加细菌阳性检出率，提高细菌学检查结果的可靠性。而且，痰液标本具有显著的非均质性，其中细菌分布浓度不均，这使得痰标本的培养在接种时选择的部位也极为重要，因此，此次预处理将痰液经等量消化液处理，并放于35℃孵育，以促使痰液从胶冻状转化为液体状态，改变其非均质性，使其细菌分布较为均匀，并涂抹时更易分散，从而使在胶冻状痰块包裹下的致病菌可生长出单个菌落，最终有效提高标本中致病菌的检出率。
本次研究结果显示，经镜检筛出的合格标本为167例，占总送检标本的43.94%，与临床常规情况相符。而比较合格标本与不合格标本的阳性检出率，合格标本阳性检出率为58.08%，不合格标本阳性检出率仅为7.15%。表明标本质量是影响阳性检出率的重要因素。而预处理后，孵育15min时阳性检出率为67.06%，而孵育30min时阳性检出率为61.68%，此差异是由于痰液标本孵育时间过长会对需氧菌有较大影响，并且脓性标本经均质化处理后，其菌落数目增多更明显。
综上所述，在进行接种培养前，对痰液进行一定的预处理措施，提高痰标本质量，并同时对痰液进行均质化预处理，减少痰液本身对结果的影响，能够有效的提高痰标本培养的阳性检出率，从而提高检查结果的准确性。
参考文献：
[1]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京：东南大学出版社，2006：744-745.
[2]陈东科，孙长贵.实用临床微生物学检验与图谱[M].北京：人民卫生出版社，2011：145-146.
[3]桂勇.三种细菌培养痰标本预处理方法学评价[J].中国现代医生，2012，50（28）：101-102.
[4]瞿良，王惠萱，李雪梅等.临床痰检验存在的问题调查分析[J].国际检验医学杂志，2010，31（12）：1423-1425.
[5]柯俊，陈媛，陶治洲等.痰标本预处理对细菌学检验结果的影响[J].检验医学与临床，2008，5（13）：814-815.
论文作者:何燕
论文发表刊物:《航空军医》2015年18期
论文发表时间:2016/4/15
标签：标本论文; 细菌学论文; 检出论文; 阳性论文; 合格论文; 检查结果论文; 不合格论文; 《航空军医》2015年18期论文;