【摘 要】目的：观察刺五加中紫丁香苷和刺五加苷E的含量。方法：采用HPLC法，AgilentZorbaxSB·C18(4．6mm×250mm，5斗m)色谱柱，以甲醇．乙腈m．1％磷酸溶液(5：10：85)为流动相，流速1．0ml／min，检测波长为210nm，进样量为10ml/min，测定刺五加苷E的含量；《中国药典)2010年版一部方法测定紫丁香苷的含量。结果刺五加苷E质量浓度在0．02032—0．2032mg／ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0．9999)，加样回收率97．7％，RSD=0．56％(n=9)。结论：测定刺五加中刺五加苷E的含量非常必要。
【关键词】刺五加；HPLC；含量测定
刺五加是刺五加科植物的一种，其以干燥根茎入药，功能主治为益气健脾，其对于脾肺气虚有着很好的疗效同时也可以有效补肾安神，用于治疗食欲不振、缓解肾虚腰膝方面的病症作用显著，并且也可以治疗失眠。现在刺五加是我国的一种重要的中药饮片，并且收录于我国的药典当中，并且对于其中的活性物质含量和其他有效成分都提出了相应的要求。刺五加在我国明朝时就被李时珍的本草纲目所载，以五叶相交而得名，并且对于其在风湿和强筋壮骨方面的作用加以肯定。刺五加药物当中，药效主要发挥成分是丁香苷和刺五加苷e以及异嗪皮啶，其对于关节肿胀的缓解作用非常明显，可以有效改善关节炎的症状，在临订应用当中并无明显缺点。其中最为重要的两种有效成分就是刺五加苷e和紫丁香苷，针对其进行有效测定作用非常重要。
一、试验方法
（一）色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：AgilentZorbaxSB-C18柱(4．6mm×250mm，5恤m)；柱温为30℃；流动相：甲醇．乙腈m．1％磷酸溶液(5：10：85)；流速：1．0ml／min；检测波长：210rim；进样量10“l。作者单位：063000河北唐山市食品药品检验中心在上述色谱条件下，理论板数按刺五加苷E峰计不低于2500。
（二）溶液的制备
（1）对照品溶液的制备：精密称取五氧化二磷减压干燥的刺五加苷E对照品适量，加甲醇制成每1毫升含O．1mg的溶液，作为对照品溶液。
（2）供试品溶液的制备：取本品粗粉约2g，精密称定，置25IIll量瓶中，加甲醇适量，超声处理30min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
（3）阴性样品溶液的制备：以溶剂即甲醇为阴性样品溶液。
（三）专属性考察
精密量取（二）项下的对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液，按（一）项下的色谱条件进样，记录色谱图。刺五加苷E峰保留时间为30．968，且杂质峰与刺五加苷E峰分离完全(分离度大于1．5)，不干扰刺五加苷E的测定。
（四）线性关系考察
取五氧化二磷减压干燥的刺五加苷E对照品适量，精密称定，加甲醇制成浓度为2．032mg／mt的对照品储备液，精密吸取上述储备液1．0、2．0、4．0、6．0及10．0ml，分别置tOOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，按色谱条件进行分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归方程，得回归方程Y=278。47X一0．01326。r=0．9999(昆=S)。结果表明刺五加苷E浓度在0．02032-0．2032rag／rot范围内与峰面积呈良好的线性关系。
（五）精密度试验精密量取对照品溶液10ml，连续进样6次，记录蜂面积。结果RSD=0．55％(n=6)，表明本方法精密度较好。
（六）稳定性试验
取供试品(批号：G12120102)适量，按“2：2．2”项下方法制备供试品溶液，分别于0、2、4、8、12和24h进样分析，记录峰面积。结果RSD=0．60％，表明刺五加苷E在甲醇溶液中24h内稳定性良好。
二、含量测定和实验结果
取刺五加样品(紫丁香苷含量8批合格与8批不合格)16批，精密称定，按相应的方法制备供试品溶液，按相应的色谱条件，进样，测定，用外标法计算样品中刺五加苷E的含量。同时我们按《中国药典}2010年版一部收载的方法进行了“7批刺五加中紫丁香苷的含量测定。见表2。
表1刺五加苷E加样回收率试验结果
表2刺五加中紫丁香苷与刺五加苷E含量测定结果
三、讨论
（一）关于检测波长
在本次实验当中应用的是二极管阵列检测设备，应用甲醇来作为溶剂使用，波长的选择为180-240nm，在该区间内来进行扫描，就可以发现刺五加苷e的最大吸收峰在波长210nm处，所以可以将测定波长定为210nm。
（二）关于流动相的选择
在本次研究当中，分别应用了乙腈和水、甲醇和乙腈和水、乙腈和磷酸溶液、甲醇和磷酸溶液来进行检测，其中可以发现，应用甲醇-乙腈和磷酸溶液有着最好的分离性，同时其峰形最好，所以可以将其作为流动相使用。
（三）溶剂提取方式
在本次研究当中，分别对于超声提取法和加热回流提取方式进行了分析，并且应用了水和不同含量的甲醇容量进行了总结和对比，结果可以确定，最好的解决方式就是应用甲醇溶液来进行0.5h的提取，提取方式为超声，其可以取得最好的提取效果。
在相关资料当中，可以轻易得到，刺五加当中的最重要的两种活性成分就是紫丁香苷和刺五加苷e，但是其中紫丁香苷其并不在刺五加药物当中专有，所以并不具备很强的专属性，其在很多其他药材当中也有一定的成分含量。在本次研究当中，针对多批次的刺五加皮中紫丁香苷的含量进行对比，我们不难发现，随着贮存时间的加长，紫丁香苷的含量会不断降低，同时经了解我们也可以得知，紫丁香苷的含量本身并不是非常稳定的，所以对于其质量的评价也并不能非常好地体现出药品质量。但是即使其中的紫丁香苷的含量较低，但昌刺五加苷e的含量并不会受到影响，其作为一项有效成分来说，有着更好的稳定性，所以不难看出，刺五加苷e的检验就非常重要，是刺五加药物质量保证当中的一个非常重要的环节。在本次研究当中，提出了一些可靠有效的质量检定方法，希望可以给相关工作的开展提供一些参考。
参考文献
[1]曹淑娟, 李保军, 高翠雪, et al. 刺五加中两种主要活性成分的含量比较[J]. 河北医药, 2015, 37(18):2847-2849.
[2]孟祥才, 颜丙鹏, 孙晖, et al. 不同性别类型刺五加叶有效成分含量季节积累规律研究[J]. 时珍国医国药, 2011, 22(1):88-90.
[3]谭五丰, 袁艳秋, 于笛笛, et al. 刺五加与短梗五加中紫丁香苷、刺五加苷E及异嗪皮啶含量比较[J]. 现代食品科技, 2017(10):302-307.
[4]崔立勇. 生境条件对刺五加生长发育和活性成分影响的研究[D]. 2015.
论文作者:董胜春
论文发表刊物:《世界复合医学》2018年第10期
论文发表时间:2019/2/21
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