赵瑞
（六安市中医院药剂科 安徽 六安 237000）
【摘要】 目的：优选养阴清咽颗粒的最佳提取工艺。方法：采用简单传统的水煎煮法，选择三因素三水平正交试验,以出膏率、浸膏中绿原酸含量为考察指标，对提取次数、提取时间、加水量进行考察。结果：确定的最佳提取工艺为提取2次，每次1h，第一次加10倍量水，第二次加8倍量水。结论：此工艺可作为养阴清咽颗粒的提取工艺，方法简便，结果稳定。
【关键词】 养阴清咽颗粒；提取工艺；正交设计；绿原酸
【中图分类号】R94 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）09-0380-02
本实验采用正交实验法优选养阴清咽颗粒的最佳提取工艺，以出膏率结合君药金银花中主要有效成分绿原酸在干膏中的含量为指标，综合优选出最佳提取工艺。
1.仪器与试药
Agilent 1200 高效液相色谱仪（自动进样系统），紫外检测器，Sartorius BT125D电子天平，KQ5200DA超声仪。
绿原酸对照品（中国药品生物制品检定所，110736-200934）
乙腈(色谱纯) ，水为双重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。
2.方法与结果
2.1 干膏得率的计算
将正交试验所得各组提取液浓缩并于80℃烘干，移至干燥器中冷却30min，迅速称重，计算干膏得率。
干膏得率=干膏重量/原药材的重量×100%
2.2 干膏中绿原酸含量的测定[1,2]
色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：Agilent TC-C18(4.6×250mm，5μm)；流动相：乙腈∶0.1%磷酸水溶液（13:87）；检测波长：327nm； 流速：1.0ml/min；柱温：25℃；进样量：10?l；理论塔板数按绿原酸峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量，加50%甲醇制成1ml含80μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品适量，研细，称取2g，精密称定，置50ml棕色容量瓶中，精密加入50%甲醇40ml，称定重量，超声处理（功率200W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45um滤膜滤过，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
绿原酸含量（mg/g）=样品峰面积/对照品峰面积×对照品浓度×稀释倍数
2.3正交实验设计
以提取次数、提取时间、加水量为考察因素，每个因素在预试验的基础上设3个水平。选用L9(34)正交表安排实验，优选提取工艺，见表1,2。
2.4正交试验及结果
结果分析表明，以出膏率为考察指标，直观分析显示各因素作用主次为A>B>C，其中A3>A2>A1， B3>B2>B1，C3>C2>C1；方差分析显示，A因素对结果有及其显著影响，B因素有显著影响，C因素无显著影响。以绿原酸含量为考察指标，直观分析显示各因素作用主次为A>B>C，其中A3>A2>A1， B3>B2>B1，C3>C2>C1； 方差分析显示，A因素对结果有显著影响，B、C因素无显著影响。综合考虑：因素A选提取2次较为合适，不能单纯的以出膏率为考察指标，应兼顾成分的含量，提取2次和提取3次比较，绿原酸并见明显差别。因素B和C从省时、降耗、节约成本考虑可选择提取时间为1h，加水量为10倍，故最佳工艺科考虑为A2B2C2，鉴于第一次加水后煎煮过滤，药渣可吸收部分药液，故第二次加水量根据实际情况可调整为8倍量，即金银花等十味药材加水煎煮2次，第一次加入10倍量水，煎煮1h，第二次加入8倍量水，煎煮1h。
表1 提取因素水平表
注：F O.05(2.2)=19；FO.01(2.2)=99.
2.5 验证试验
为了进一步考察优选工艺的稳定性，按照优选出的最佳工艺进行了三次验证试验，结果过表明优选的条件可靠、稳定。
表6 验证试验结果
3.讨论
考虑到本制剂为我院的医院制剂，根据医院制剂申报相关规定，提取工艺应采取传统的水提工艺，方中未见含有需要经过特殊提取且与本制剂药效相关的成分，故本工艺将所有药味一起进行水煎煮。传统单纯的以出膏率为指标并不能很好反应有效成分的提取情况，故在提取过程中，结合君药中主要有效成分绿原酸在干膏中的含量作为另一指标进行优选。由实验数据可以看出，若单纯以出膏率为指标势必选择提取次数为三次，而随着提取次数的增加，杂质也会有所增加，但绿原酸含量并未有明显增加，故综合考虑选取的提取次数为2次，提取时间对出膏率有显著影响而对绿原酸无显著影响，故综合考虑选择提取时间为1h，加水量对出膏率和绿原酸均未有显著影响，故选择第一次加水量为10倍，第二次加水量为8倍。
本文通过正交试验设计的方法优选丹蛭降糖胶囊的提取工艺，确定了提取的最佳工艺，优选后的最佳工艺条件为A3B2C2，即加10倍量水，提取3次，每次1.5h。通过验证试验证明最佳工艺稳定、可靠。
【参考文献】
[1]胡生俊，徐岳鑫，董赛文，等.高效液相色谱法测定复方金银花颗粒中绿原酸含量[J].中国药业,2011,20(3):23.
[2]辛华，丰杰，程若敏，等.HPLC测不同产地金银花中绿原酸和木犀草苷[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(2):60.
表3 正交试验结果
论文作者:赵瑞
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第9期供稿
论文发表时间:2015/7/23
标签：正交论文; 工艺论文; 因素论文; 加水论文; 量为论文; 指标论文; 溶液论文; 《医药前沿》2015年第9期供稿论文;