【摘要】 目的通过检测分析,研讨卵巢癌组织中CIP２A 的表达水平和临床价值.方法以我院２０１１年１月至２０１５年３月间通过手术切除的５１例卵巢癌组织(研究组)及８例正常卵巢组织(对照组)为研究对象.采用SP免疫组化法检测分析CIP２A 表达与临床病理因素的关系.结果在对照组８例的CIP２A 的表达为阴性或低表达;而研究组中,３５．２９％(１８/５１)具有CIP２A 阳性表达.CIP２A 在卵巢浆液性癌、子宫内膜样癌、黏液性癌和透明细胞癌中的阳性表达率分别为４１．９４％(１３/３１)、２７．２７％(３/１１)、１２．５０％(１/８)和１００％(１/１).CIP２A 的表达水平与肿瘤病理分级及FIGO 分期有关.实时定量PCR结果显示较之正常卵巢组织,卵巢癌组织CIP２A 转录水平显著提高(P＜０．０５).结论卵巢癌中CIP２A 水平呈现高表达,且与肿瘤病理分级和FIGO 分期密切相关.CIP２A 可能作为一种诊断卵巢癌新指标,并成为其治疗新靶点. 【关键词】 卵巢癌;CIP２A;肿瘤病理分级【中图分类号】R７３７．３【文献标识码】B 【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－１３２６－０２
作为女性生殖器官的恶性肿瘤之一,卵巢癌拥有最高的死亡率[１].寻找新诊断指标和治疗新靶点一直是国内外医学界重点研讨的课题目标,其对提高病患生存率至关重要.研究表明,癌蛋白CIP２A(Proteinphosphatase２A)可以抑制蛋白磷酸酶２A 对c－myc的去磷酸化作用,加快肿瘤细胞的发生发展[２].然而在上皮性卵巢癌中CIP２A 的作用尚不明确,其与卵巢癌的临床病理因素间的关系也尚不清楚.本文通过通过检测分析,研讨卵巢癌组织中CIP２A 的表达水平和临床价值,为卵巢癌的诊断治疗提供新的方法.
１ 资料与方法
１．１ 对象 以我院２０１１年１月至２０１５年３月间通过手术切除的５１例卵巢癌组织(设为研究组)及８例正常卵巢组织(设为对照组)为研究对象,所有病患术前均为执行放化疗.研究组５１例卵巢癌组织中,含１１例子宫内膜样癌,３１例浆液性癌,１例透明细胞癌,８例黏液性癌.通过临床及病理资料分析,FIGO 分期分别为:２３例Ⅰ期,９例Ⅱ期,１１例Ⅲ期,８例Ⅳ期.肿瘤分化程度分别为:高分化１３例,中分化１６例,低分化２２例.研究组患者年龄２２~７３岁(平均４９岁),对照组年龄２１~６９岁(平均４８岁),两组年龄等一般资料比较无统计学意义(P＞０．０５). １．２ 方法
１．２．１ 免疫组化染色 所有组织均采用中性福尔马林溶液(１０％) 进行固定并石蜡包埋,切片(厚４μm),采用SP法染色,具体流程为:pH６．０枸橼酸缓冲液中高温高压抗原修复,H２O２(０．３％)室温孵育(１０min),非免疫性动物血清室温孵育(１０min),CIP２A 兔多克隆抗体室温孵育２h,以兔IG为阴性对照.生物素标记的二抗孵育(１０min),链霉菌抗生物素－过氧化物酶溶液孵育(１０min).进行DAB显色并执行苏木素复染,应用中性树胶封固.１．２．２ 结果判定采用两位病理专家独立阅片.单切片计数取５个高倍视野(×４００),单视野计数１００个细胞.CIP２A 阳性信号定位在细胞浆,按照半定量法评分[３]:(１)阳性着色:黄褐色３分,棕黄色颗粒２分,淡黄色１分,无色０分.(２) 阳性细胞数:阳性细胞数＞７５％~１００％为４分,＞５０％~７５％为３分,＞２５％~５０％为２分,１０％~２５％为１分,＜１０％为０分.两类分数乘积得到分数０~１２,阴性(－):０分,高表达(＋＋＋):≥９分,中表达(＋＋):５~８分,低表达(＋):≤４分.(＋)~(＋＋＋)为阳性表达. １．３ 实时定量PCR 两组组织匀浆后,采用TRIzol法提取组织总RNA,总RNA经PrimeScriptRTreagentKit试剂盒反转录合成cDNA,用该cDNA 进行实时定量PCR反应. １．４ 统计学分析数据处理采用SPSS１１．５软件包,χ２ 检验,P＜０．０５为差异有统计学意义.
２ 结果
２．１ CIP２A 两组的表达 在正常组８例组织中,CIP２A 呈现阴性或低表达. 而在研究组,CIP２A 出现细胞核或细胞浆表达,但是用兔IG 孵育的相同对照组织没有着色.在研究组中,出现CIP２A 阳性表达者共有１８例(３５．２９％),其中子宫内膜样癌２７．２７％(３/１１)、浆液性癌４１．９４％(１３/３１),透明细胞癌１００％ (１/１)、黏液性癌１２．５％(１/８). ２．２ 实时定量PCR验证 采用实时定量PCR 对两组中CIP２A mRNA 水平进行验证,结果显示较之对照组,研究组CIP２A 转录水平也显著提高. ２．３ CIP２A 表达与卵巢癌临床病理因素的关系 由于癌组织样本有限,本研究将浆液性腺癌的CIP２A 表达与本研究其他类型卵巢癌中的CIP２A 表达进行了比较,发现差异无统计学意义(P＞０．０５).CIP２A 的表达在Ⅱ~Ⅳ期卵巢癌(Ⅱ期４４．４４％;Ⅲ期４５．４６％;Ⅳ期５０．００％)中显著高于Ⅰ期(２１．７４％)(P＜０．０５).此外,CIP２A 的表达在高恶性度肿瘤(低分化５９．０９％)中高于低恶性度肿瘤(高分化１５．３８％;中分化１８．７５％)(P＜０．０５).(表１)(P＜０．０５).
３ 讨论
近年来有研究发现,作为一种癌蛋白,CIP２A 的阳性表达可能与多种肿瘤恶性进展相关,相关报道显示,在乳腺癌中,CIP２A 与p５３突变、高增殖指数及高肿瘤分级密切相关[４];还有资料显示,CIP２A 在非小细胞肺癌中的阳性表达与预后密切相关[５].有研究实验发现,前列腺癌组织的CIP２A 阳性率显著高于良性增生症组织,同时CIP２A 的高表达与前列腺癌的预后密切相关. 本研究结果显示,在研究组中,出现CIP２A 阳性表达者共有１８ 例(３５．２９％),其中子宫内膜样癌２７．２７％(３/１１)、浆液性癌４１．９４％(１３/３１),透明细胞癌１００％(１/１)、黏液性癌１２．５％(１/８).CIP２A 在内膜样癌、浆液性癌、黏液性癌及透明细胞癌等多种上皮性卵巢癌中出现的高表达,提示其参与了卵巢癌发生与发展.作为一种异质性疾病,卵巢癌的每种分型都有其不同的遗传风险因素和mRNA 表达,但是并未发现不同卵巢癌中CIP２A 表达差异,显示其在不同类型卵巢癌中表达广泛,与组织异型性无关.本研究结果显示,CIP２A 在卵巢癌Ⅱ~Ⅳ期的表达显著高于Ⅰ期,提示CIP２A 的高表达与FIGO 分期关系密切;CIP２A 在高恶性度肿瘤的表达高于低恶性度肿瘤,提示其高表达与肿瘤病理分级有关.证实卵巢癌中细胞浆的CIP２A 表达是细胞增殖的标志, 同时也恶性进展的标志.通过本研究我们发现,在卵巢癌中,CIP２A 呈现高表达,并且与FIGO 分期和肿瘤病理分级密切相关,在卵巢癌诊断中CIP２A 可能成为的新指标,并成为其治疗新靶点. 参考文献[１] 杨梅琳,康玉,洪珊珊,等．不同腹膜后淋巴结转移能力的卵巢癌细胞小[ RNA(miRNA)表达差异[J]．复旦学报(医学版),２０１４,４１(４):７２１－７２３ ２] 胡茜,刘昆．CIP２A 及c－Myc在宫颈癌组织中的表达及相关性分析[J]． 重庆医学,２０１５,４４(８):１０７２－１０７４ [３] 车爱文,陈淑苹,谭旭东,等．CIP２A 在宫颈癌中的表达及其临床意义[J]． 海南医学,２０１５,２６(２):２６６－２６８ [４] 郭庆,王建军,韦玮,等．卵巢浆液性肿瘤组织CIP２A 和p５３表达临床意义探讨[J]．中华肿瘤防治杂志,２０１４,２１(２０):１６０６－１６０９ [５] 师海蓉．靶向CIP２A 的shRNA 对人胃癌BGC－８２３细胞增殖、凋亡及侵袭的影响[J]．华中科技大学学报(医学版),２０１４,４３(５):８２３－８２５
论文作者:华杰
论文发表刊物:《中国综合临床》2015年12月供稿
论文发表时间:2016/3/8
标签：卵巢癌论文; 组织论文; 肿瘤论文; 阳性论文; 细胞论文; 病理论文; 浆液论文; 《中国综合临床》2015年12月供稿论文;