吉雁鸿[1]2000年在《L-精氨酸对热应激小鼠免疫功能影响的研究》文中进行了进一步梳理目的：探讨补充L-精氨酸对热应激小鼠免疫功能的影响及可能机制。 方法：将175只6—8周龄BALB/C雄性小鼠随机分为给水组和给不同浓度精氨酸组，各组中小鼠又分别分为常温组和热应激组，给药14天后热应激组入41±0.5℃高温仓2小时后分别在0、2、4、8、12、24小时处死，测量并比较不同情况下各组小鼠胸腺指数、脾脏指数、淋巴细胞增殖活性、IL-2浓度及其受体的表达、活化胸腺细胞的［Ca~(2+)］、血清NO浓度等各指标的变化。 结果：1、热应激后小鼠的各项免疫指标均有显著性下降，其中在2.8小时降到最低，提示在这个时间段小鼠的免疫功能受到最大损害；2、适量补充精氨酸有助于缓解热应激导致小鼠胸腺和脾脏的急性萎缩；3、常温组，补充适量精氨酸后小鼠淋巴细胞增殖活性、IL-2的浓度及IL-2R的表达均有显著性上升，而热应激后三指标均显著降低，其中在精氨酸给予浓度为1.5mg/g.bw时三指标的降低程度最少，提示该浓度可最大程度缓解热应激对小鼠免疫功能的抑制；4、补充精氨酸组的活化胸腺细胞［Ca~(2+)］较给水组有显著性上升，说明精氨酸对热应激小鼠胸腺细胞具有保护作用，并发现在精氨酸给予浓度为1.5mg/g.bw时活化胸腺细胞的胞浆钙离子荧光强度达到最大；5、热应激后小鼠血清NO的浓度均有不同程度的上升，补充精氨酸后血清NO上升更加明显，但并非随精氨酸给予浓度的增加而增加。 结论：1、在热应激后2-8小时左右，小鼠免疫功能受到的损伤最大；2、适量补充L-精氨酸可以对热应激损伤小鼠的免疫功能起到保护作用，而在精氨酸给予浓度为1.5mg/g.bw时精氨酸能够最大限度的减少热应激对小鼠免疫功能的损伤。
罗海吉, 吉雁鸿, 张云山, 卢晓翠[2]2002年在《高温应激下补充L-精氨酸对小鼠免疫功能的影响》文中提出探讨补充L 精氨酸对高温应激小鼠免疫功能的影响 ,结果显示 :1.高温应激后各项免疫指标均有显著下降 ,其中 2～ 8h免疫功能受到最大损害 ;2 .补充适量L 精氨酸可减轻小鼠胸膜和脾脏急性萎缩 ;3.补充L 精氨酸后淋巴细胞增殖活性、IL - 2浓度和IL - 2R的表达与对照组比较有显著上升。 4.补充L 精氨酸组的活化胸腺细胞 [Ca2 + ]显著高于给水对照组 ,说明L 精氨酸对热应激小鼠胸腺具有保护作用。实验观察到当补充L 精氨酸浓度达到 1.5mg/g .bw时 ,四项指标效果最好 ,揭示该浓度可最大程度缓解热应激对小鼠免疫功能的抑制
周爱军[3]2005年在《精氨酸对热应激损伤大鼠胸腺和巨噬细胞保护作用机制探讨》文中进行了进一步梳理研究背景: 应激是指各种有害或过强刺激引起的机体非特异性全身反应,高温作为一种环境热应激可导致机体多种生理、生化和组织学的改变,脂质过氧化增强,并引起胸腺和淋巴组织萎缩,甚至造成机体代谢紊乱,组织器官功能衰竭。 胸腺是机体重要的免疫器官,是T细胞发育和成熟的场所,在整个免疫系统中起着中枢作用。而各种应激如严重感染、创伤、高温、高渗、缺氧、辐射和氧化应激等,都能导致胸腺损伤,造成胸腺萎缩,影响胸腺细胞分化、发育,诱导胸腺细胞凋亡。 在免疫营养的发展中,精氨酸(L-Arg)以其独特的生理与药理作用而引入注意。具有两个碱基的L-Arg是碱性最强的半必需氨基酸,仅在未成熟状态或严重应激时,对于机体才是必不可少的,有利于机体蛋白质的合成,调节机体免疫功能。关于L-Arg对热应激损伤机体免疫器官的保护作用国内外有不少报道,但其确切机制仍有待于进一步研究和探讨。 目的: 通过观察热应激后大鼠生理反应、胸腺和脾脏指数、下丘脑-垂体-肾上腺轴皮质醇的释放、细胞膜脂流动性以及脂质过氧化的变化情况,探讨补充L-Arg对热应激损伤大鼠免疫器官保护作用的可能机制。 方法: 将SD青春期雄性大鼠144只,采用三因素析因设计模型进行分组。首先,随机分为三组,A组:灌水组;B组:补充L-Arg(1.5g/kg.bw)组;C组:饲以VE饲
曾静, 罗海吉, 张勇, 卢晓翠[4]2003年在《L-精氨酸对热应激小鼠胸腺T细胞亚群的影响》文中指出目的 探导补充L 精氨酸对高温应激小鼠胸腺T淋巴细胞亚群及免疫器官重量的影响。方法 将NIH小鼠随机分组 ,灌胃给予精氨酸 1 4d后 ,将热应激组动物放入 (4 1± 0 5 )℃高温仓中热暴露 1 2 0min后间隔 2h处死 ,测量各组小鼠胸腺、脾脏指数 ,应用流式细胞术分析CD3、CD4、CD8亚群的变化。结果 补充L -精氨酸的各组小鼠胸腺指数、脾脏指数和CD3、CD4细胞百分比、CD4 /CD8细胞比值均高于常温对照组及热应激对照组。结论 热应激后小鼠免疫功能受抑制 ,补充适量L 精氨酸可减轻热应激小鼠胸腺和脾脏的急性萎缩 ,增加热应激小鼠T细胞亚群数量及辅助性和抑制性T细胞的比例
吉雁鸿, 罗海吉[5]2002年在《精氨酸对热应激小鼠免疫功能的影响》文中进行了进一步梳理目的 探讨精氨酸对热应激小鼠免疫功能的影响及可能机制。方法 将雄性小鼠随机分为给水组和给不同浓度精氨酸组 ,各组小鼠又分为常温组和热应激组 ,给药 1 4天后热应激组入 41℃± 0 5℃高温仓 2h后分别在 0 ,2 ,4,8,1 2 ,2 4h处死 ,测量各组小鼠胸腺指数、脾脏指数、淋巴细胞增殖活性、IL 2浓度及其受体的表达等指标的变化。结果 热应激后小鼠的各项免疫指标均有显著下降 ,其中在 2～ 8h降到最低 ;常温组小鼠补充适量精氨酸后淋巴细胞增殖活性、IL 2的浓度及IL 2R的表达均有显著性上升 ,而热应激后 3指标均显著降低 ,其中精氨酸浓度为 1 5mg/ g·体重时各指标的降低程度最少。结论 热应激 2～ 8h后 ,小鼠免疫功能受到的损伤最大 ;适量补充L 精氨酸可以对热应激损伤小鼠的免疫功能起到保护作用 ,补充 1 5mg/g·体重精氨酸能够最大限度的减少热应激对小鼠免疫功能的损伤。
张灿菲[6]2008年在《精氨酸对急性热应激鸡肠道黏膜免疫的影响》文中研究说明黏膜免疫对机体抵抗感染有重要的作用。精氨酸对应激免疫抑制作用的研究多集中在整体免疫水平,而关于精氨酸对应激黏膜免疫的影响及其影响机制研究较少。本研究目的在于探讨精氨酸对急性热应激鸡黏膜免疫的影响及其机制。135只1日龄尼克红蛋用公鸡随机分为3组:对照组、试验一组和试验二组,分别饲喂基础日粮(1%精氨酸)、试验日粮Ⅰ(基础日粮+0.3%精氨酸)和试验日粮Ⅱ(基础日粮+0.6%精氨酸)。35日龄实施急性热应激,每组分别在应激前、应激(39±1℃,3h)和应激恢复(应激后常温恢复3小时)取样,采用组织学和免疫组化方法分析鸡十二指肠、空肠和回肠绒毛高度、杯状细胞数量、上皮内淋巴细胞(IEL)数目和分泌型sIgA细胞平均光密度,并分析外周血T_(ANAE)~+阳性率、肠道黏膜一氧化氮(NO)含量和总抗氧化能力(T-AOC),观察精氨酸添加水平对肠道黏膜免疫影响及其可能作用机制。主要的试验结果如下:1.精氨酸对热应激造成的肠道黏膜免疫机械屏障的损伤有保护作用热应激可造成对照组十二指肠和空肠的绒毛高度显著下降(P＜0.05),但热应激中肠道绒毛上杯状细胞数目显著上升(P＜0.01);应激前,试验一组十二指肠、空肠的绒毛高度和杯状细胞数目与对照组相比显著增加(P＜0.01),试验二组显著增加了杯状细胞数目(P＜0.01);应激中,试验一组十二指肠、空肠的绒毛高度和杯状细胞数目与对照组相比显著增加(P＜0.01),试验二组十二指肠、空肠的杯状细胞数目比对照组高(P＜0.01),空肠的绒毛高度高于对照组(P＜0.05);应激后,试验一组和试验二组与对照组相比在绒毛高度和杯状细胞数目上没有显著差异。以上结果显示:热应激对十二指肠和空肠绒毛有显著损伤作用,同时应激可显著提高小肠杯状细胞数量。外源精氨酸可缓解热应激对绒毛的损伤,增加肠道绒毛高度和杯状细胞数目。2.精氨酸对热应激造成的肠道黏膜免疫免疫屏障的损伤有保护作用热应激可显著降低对照组十二指肠、空肠的IEL数目(P＜0.01)和十二指肠sIgA分泌细胞平均光密度(P＜0.05),但回肠的IEL数目和sIgA分泌细胞平均光密度变化不明显。精氨酸能够增加IEL的数目和sIgA分泌细胞平均光密度。应激前,试验一组和试验二组显著增加了十二指肠、回肠的IEL的数目和sIgA分泌细胞平均光密度(P＜0.01);应激中,试验一组显著增加了十二指肠、空肠的IEL的数目和sIgA分泌细胞平均光密度(P＜0.01),试验二组十二指肠IEL的数目显著下降(P＜0.01);应激后,试验一组显著增加了十二指肠、空肠的IEL的数目和空肠、回肠的sIgA分泌细胞平均光密度。试验结果显示:适宜外源精氨酸水平可提高小肠正常情况和应激状态下sIgA分泌细胞和IEL的数量。3.精氨酸机体的细胞免疫功能有提高作用热应激可显著降低对照组T淋巴细胞阳性率(P＜0.01):应激前,试验一组的T淋巴细胞阳性率显著高于对照组(P＜0.05),对照组和试验二组没有显著差异(P＞0.05);应激中,试验一组和试验二组的要显著高于对照组(P＜0.05);应激后试验组高于对照组但差异不显著。结果显示:精氨酸可显著改善机体T细胞免疫功能。4.精氨酸对肠道黏膜T-AOC和NO的含量有提高作用热应激可降低对照组空肠黏膜的T-AOC(P＜0.05),增加对照组空肠、回肠黏膜中NO的含量(P＜0.01);应激前,试验一组十二指肠的T-AOC高于对照组(P＜0.05),试验二组空肠、回肠的抗氧化能力高于对照组(P＜0.05),试验一组和试验二组肠道黏膜的一氧化氮能力均高于对照组(P＜0.01);应激中,试验一组十二指肠、空肠、回肠的T-AOC和十二指肠、回肠的NO含量均高于对照组(P＜0.05),其中空肠、回肠的T-AOC和十二指肠的NO含量极显著高于对照组(P＜0.01),试验二组除回肠的T-AOC其余肠道黏膜的T-AOC和NO含量均极显著高于对照组(P＜0.01);应激后试验一组和试验二组十二指肠、空肠的T-AOC极显著的高于对照组(P＜0.01),试验二组空肠、回肠黏膜NO的含量高于对照组(P＜0.01),其余的均低于对照组。结果表明:热应激可造成肠道黏膜T-AOC下降,NO含量上升。而精氨酸在常温下和热应激下均可增加肠道黏膜T-AOC和NO含量。通过本试验可得出如下结论,热应激可造成肠道黏膜屏障的损伤,血液中T淋巴细胞的功能受到抑制,而精氨酸能够在正常条件和应激状态下维护肠道黏膜屏障和保护淋巴细胞功能,但精氨酸的这种功能在不同的肠段作用效果不同,且与饲料中精氨酸的水平相关。
张云山[7]2000年在《L-精氨酸对热应激大鼠胸腺细胞凋亡影响的实验研究》文中研究表明目的：探讨热应激对大鼠胸腺及其细胞的影响和L-精氨酸（L-Arg）对胸腺的作用。 方法：将SD大鼠分为不同高温处理组和常温对照组，通过灌胃补充不同剂量L-Arg，在热应激前、后分别测量各组大鼠的体重、胸腺指数、脾脏指数、呼吸和肛温等生理指标，并利用光镜技术、电镜技术、凝胶电泳技术、FCM和体视学定量分析技术，探讨L-Arg对热应激大鼠胸腺细胞凋亡的影响。 结果：1、常温下，胸腺细胞结构清晰，形态规则，自然凋亡率低，补充L-Arg组的自然凋亡率低于灌水对照组（析因分析显示，组间比较，下同，P＜0.001）。而不同温度的热应激均可导致胸腺细胞凋亡，电镜和光镜显示其典型的形态学特征，DNA凝胶电泳呈“梯状”条带，FCM检测出现凋亡峰，但补充L-Arg两组轻于灌水对照组，而且，热应激后2h便可见凋亡细胞，4～8h达高峰，随后下降，24h后补充L-Arg组基本恢复到正常水平，灌水对照组稍差。细胞周期分析发现，S期和G2/M期细胞数量的变化基本上和凋亡率的变化相一致，G0/G1期细胞数量的变化则相反。 2、大鼠胸腺指数和脾脏指数，热应激组明显低于常温对照组（P＜0.05），灌水对照组低于补充L-Arg两组，但补充L-Arg两组间无显著性差异（P＞0.05），并且两指数的变化具有温度和热应激后时间依赖性。 3、常温下，补充0.5g L-Arg/kg.bw组大鼠体重增加高于灌水对照组（P＜0.05），而补充L-Arg两组之间无显著性差异 吓＞0．05人 热应激后，同一温度各组大鼠体重下降无显著性差异 吓＞0．0引，但体重下降与不同温度热应激有关（P＜0．0引。 4、常温和热应激下，各组大鼠呼吸和肛温的变化均无显著性差异（P＞0刀5）。 5、体视学定量分析显示：热应激大鼠胸腺细胞线粒体体密度、形状因子明显增加，表面积与体积比降低；细胞核核浆比。表面积密度减小，表面积与体积比增大。而补充L－Arg具有减轻上述体视学参数变化的作用。 结论：1、综合利用光镜、电镜、DNA凝胶电泳、FCM 以及体视学定量分析技术测定热应激条件下大鼠胸腺细胞凋亡，既灵敏、特异，又可定性、定量。 2、不同温度的热应激均可诱导大鼠胸腺细胞凋亡，且具有温度和热应激后时间依赖性。 3、补充适量的L－Arg对热应激大鼠胸腺有较好的保护作用，可减少胸腺细胞凋亡率和减轻胸腺细胞的损伤，减轻热应激时胸腺和脾脏的萎缩，但对热应激大鼠体重、呼吸、肛温等影响不大。 4、常温下，补充适量的L－Arr可使大鼠体重、胸腺指数和脾脏指数增加，对呼吸和肛温的影响不十分明显。
郭祎玮[8]2014年在《精氨酸对肉仔鸡生长性能和免疫功能的影响及其机理研究》文中指出本论文共分5个试验,研究日粮中不同水平精氨酸对肉仔鸡生长性能、免疫功能、血清一氧化氮浓度、诱导型一氧化氮合酶活性及组织中诱导型一氧化氮合酶基因表达以及血液和肌肉组织中氨基酸含量的影响。动物试验选择300只1日龄AA肉仔鸡,随机分为5个日粮处理,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。以玉米和玉米蛋白粉为主要原料配制低精氨酸基础日粮,五个日粮处理分别为在每千克基础日粮中添加0(精氨酸缺乏组)、4.5(精氨酸正常组,对照组)、9.0、13.5和18.0克精氨酸。饲养试验进行42d,分为前期(1-21d)和后期(22-42d)两个阶段。试验1通过动物饲养试验,研究日粮中添加不同水平的精氨酸对肉仔鸡生长性能和相关内分泌指标的影响。试验2通过对肉仔鸡外周血淋巴细胞转化率、新城疫抗体滴度、免疫球蛋白、细胞因子、免疫器官指数和单核巨噬细胞吞噬指数的测定,研究不同水平精氨酸日粮对肉仔鸡免疫功能的影响。试验3通过研究日粮中不同水平的精氨酸对肉仔鸡血清一氧化氮含量、诱导型一氧化氮合酶活性及小肠iNOS mRNA表达的影响,从诱导型一氧化氮合酶途径探讨精氨酸对肉鸡免疫功能作用的分子机制。试验4通过体外试验,研究不同水平精氨酸对肉仔鸡淋巴细胞免疫功能和一氧化氮生成的影响。试验5通过动物饲养试验,研究日粮中添加不同水平的精氨酸对肉仔鸡血液和肌肉组织中氨基酸含量的影响。试验结果表明：(1)在整个试验期内,随着日粮中精氨酸添加剂量的增加,肉仔鸡的平均日增重呈现一次线性或二次曲线升高,料肉比呈现显著的二次曲线降低的变化。在第21d,胰岛素和胰岛素样生长因子-Ⅰ呈现显著的二次升高变化。(2)随着日粮中精氨酸添加剂量的增加,21d时的胸腺指数、免疫球蛋白A和白细胞介素-2呈现显著的二次升高变化,42d时的新城疫抗体滴度、淋巴细胞增殖和免疫球蛋白M呈现显著的二次升高变化。(3)随着精氨酸添加剂量的增加,21d时血清中一氧化氮含量、诱导型一氧化氮合酶活性及回肠和肝脏诱导型一氧化氮合酶mRNA表达呈现显著的二次升高变化。(4)淋巴细胞培养液中白细胞介素-2和诱导型一氧化氮合酶的含量与精氨酸添加量之间呈现极显著的二次剂量依赖关系,最高值出现在80μg/mL的精氨酸添加组。(5)对肉鸡生长和免疫有较好促进作用的精氨酸添加剂量不会显著影响血液和肌肉组织中其他氨基酸的含量。本试验结果提示,在正常日粮中再添加一定剂量的精氨酸可以进一步提高肉鸡生长性能和免疫功能。在本试验中,精氨酸的适宜添加剂量为0.97%～1.05%,相当于在正常日粮中再添加0.52%～0.60%的精氨酸。
袁超[9]2016年在《精氨酸对蛋鸡采食及组织蛋白质代谢调控的机理研究》文中指出本论文研究饲粮添加精氨酸对蛋鸡采食及相关因子、蛋白质代谢调控的影响,并在建立鸡胚肠上皮细胞模型的基础上,研究精氨酸对鸡胚肠上皮细胞精氨酸转运、代谢和相关转运载体及蛋白质合成与相关基因表达水平的影响。结果发现,精氨酸可影响蛋鸡下丘脑(激素)和肝脏(脂肪酸氧化)中调控采食的相关蛋白表达；研究揭示了精氨酸对蛋鸡组织(肝脏和小肠)蛋白质代谢相关调控因子基因表达规律；体外试验也发现,精氨酸可以通过提高碱性氨基酸转运载体-1和诱导性一氧化氮合酶基因表达水平,增加外源精氨酸利用率及一氧化氮的生产量。研究结果,丰富了蛋鸡采食理论,为功能性氨基酸在蛋禽组织蛋白质代谢的调控提供了依据。研究结果如下：1蛋鸡产蛋期精氨酸需要量的研究本试验旨在研究国内杂交品种蛋鸡(新杨黑)产蛋期精氨酸的需要量。选取31周龄的新杨黑商品代蛋鸡864只,随机分为6组,每组4个重复,每个重复36只鸡。蛋鸡分别饲喂精氨酸水平为0.64%、0.86%、1.03%、1.27%、1.42%和1.66%的玉米-玉米蛋白粉型饲粮。结果表明：随着饲粮精氨酸水平的升高,采食量、日产蛋重、产蛋率及料蛋比的变化呈现显著的二次效应(P<0.05)；1.27%精氨酸水平组的蛋白高度显著高于其他各组(P<0.05)。基于二次曲线-折线回归模型分析,结果提示：以采食量和日产蛋重为评判指标,33-45周龄新杨黑蛋鸡精氨酸需要量分别为1.26%和1.28%。2精氨酸对蛋鸡采食的调控研究本试验在饲养试验的基础上,研究精氨酸对蛋鸡下丘脑NPY、瘦素、血清胃饥饿素、胰岛素、一氧化氮含量的影响,同时利用同位素标记相对与绝对定量技术检测精氨酸对下丘脑和肝脏蛋白组分的影响。结果显示：下丘脑NPY的含量在1.27%精氨酸组表现为最高(P<0.05)；随着精氨酸水平的增加,血清NO含量表现为升高的趋势,1.27%精氨酸组胃饥饿素含量显著低于其他各组(P<0.05)。质谱鉴定到的下丘脑蛋白共计3715个,0.64%精氨酸组与1.27%精氨酸组差异表达蛋白235个(P<0.05)；质谱鉴定到的肝脏蛋白共计3797个,两组间共有373个蛋白表达差异显著(P<0.05)。结果提示：饲粮中适宜水平的精氨酸可以通过提高下丘脑NPY和血清NO的含量,降低血清胃饥饿素的含量,进而提高蛋鸡的采食量；精氨酸对采食量的调控可能与其提高了下丘脑激素相关蛋白的表达水平,同时降低了肝脏脂肪酸氧化相关蛋白的表达水平有关。3精氨酸对蛋鸡组织蛋白质代谢的调控研究本研究探讨了精氨酸对蛋鸡肝脏和小肠蛋白质代谢的影响及其调控作用的分子机制。结果显示：1.27%精氨酸组血清总蛋白和白蛋白含量最高(P<0.05),血清尿酸含量最低(P<0.05)；与基础饲粮组相比,1.27%精氨酸组肝脏和空肠蛋白质相对合成率最高(P<0.05); RT-PCR和Western blot检测TOR信号通路相关基因的表达水平发现,1.27%精氨酸组肝脏TOR、S6K1基因mRNA相对表达量及TOR蛋白磷酸化最高(P<0.05),蛋白质降解相关基因20S蛋白酶体和组织蛋白酶B基因mRNA相对表达量最低(P<0.05)；此外,与基础饲粮组相比,1.27%精氨酸组空肠TOR蛋白相对表达量及磷酸化水平均显著提高(P<0.05)。结果提示：饲粮中添加适宜水平的精氨酸可以提高蛋鸡肝脏和空肠蛋白质相对合成率和蛋白质相对生长率,精氨酸对肝脏蛋白质合成的促进作用是通过上调TOR蛋白的表达和磷酸化水平以及抑制组织蛋白酶B和20S蛋白酶体基因mRNA表达水平,而精氨酸对空肠蛋白质合成的促进作用主要是通过提高空肠TOR蛋白的表达和磷酸化水平以及抑制20S蛋白酶体基因mRNA表达水平。4鸡胚小肠上皮细胞模型的建立本试验比较了不同日龄的鸡胚通过不同的消化酶作用后对鸡胚肠上皮细胞分离及体外培养的影响,旨在建立一种适宜的肠上皮细胞分离与培养方法,为后续试验提供材料。选取14 d、16 d和18d的SPF鸡胚小肠肠段,分别用胰蛋白酶、Ⅰ型胶原酶、嗜热菌蛋白酶及Ⅰ型胶原酶与嗜热菌蛋白酶联合消化。采用免疫组化及免疫荧光染色对细胞进行鉴定,MTT法检测细胞增殖。结果显示：14d鸡胚小肠肠段通过Ⅰ型胶原酶消化分离得到的肠上皮细胞贴壁及生长均较好；传代培养后可以产生大量肠上皮细胞；免疫组化及免疫荧光染色显示分离得到的细胞对细胞角蛋白18抗体呈阳性。结果提示：选用14d鸡胚通过Ⅰ型胶原酶消化,可以分离得到较好的鸡胚肠上皮细胞。5精氨酸对鸡小肠上皮细胞精氨酸转运、代谢及相关基因表达的影响以建立的鸡胚小肠上皮细胞为模型,探讨外源精氨酸对碱性氨基酸转运载体1和4 (CAT-1、CAT-4)及诱导性一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。细胞在含10、100、200、400和600μM精氨酸的培养基中培养4d后,结果显示细胞活力在10-400州精氨酸范围内达到最大值；与10μM精氨酸组相比,外源添加100、200和400μM精氨酸显著增加L-[3H]-精氨酸的吸收、细胞NO及L-[3H]-瓜氨酸的含量(P< 0.05); CAT-1基因mRNA和蛋白相对表达量随着外源精氨酸浓度的增加而增加；精氨酸显著上调iNOS基因mRNA相对表达量(P<0.05),200和400μM精氨酸组iNOS蛋白相对表达量显著高于10和100μM精氨酸组(P<0.05)。结果提示：精氨酸能够提高(?)AT-1及iNOS基因的表达水平,增加外源精氨酸的利用率及NO的生成量；CAT-1对精氨酸的转运发挥着重要作用,同时由精氨酸介导通过iNOS产生的NO能够促进细胞生长。6精氨酸对鸡小肠上皮细胞蛋白质代谢及相关基因表达的影响本试验以鸡小肠上皮细胞为模型,旨在探讨精氨酸对细胞蛋白质代谢及TOR通路相关基因表达的影响。细胞在含10、100、200和400μM精氨酸的培养基中培养4d后,测定细胞周期、细胞蛋白质合成与降解、雷帕霉素靶蛋白(TOR)、核糖体蛋白S6激酶(S6K1)及真核生物起始翻译因子4E结合蛋白(4E-BP1)基因mRNA相对表达量。结果显示,S和G2/M期细胞数量随着精氨酸浓度的增加而增加,而G0/G1期则降低；与10μML-精氨酸相比,100、200和400 μM精氨酸组细胞蛋白质合成量增加而蛋白质降解量减少,同时TOR、4E-BP1和S6K1基因mRNA相对表达量也显著增加(P<0.05)。结果提示：精氨酸通过上调TOR通路相关基因mRNA表达水平,从而促进鸡胚小肠上皮细胞蛋白质的合成,降低蛋白质的降解。
唐丽[10]2013年在《缬沙坦抑制非对称二甲基精氨酸诱导的内皮细胞LOX-1的表达》文中研究说明背景内皮一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)抑制剂-非对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)可竞争性抑制eNOS的活性,使NO合成减少,在多种致动脉粥样硬化的疾病中升高,被认为是心血管疾病独立的预测因子。凝集素样低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized low-density lipoprotein recpterl,LOX-1)是外源性的清道夫受体,在生理状态的内皮细胞表达量很少,但在病理状态下,如糖尿病、高血压、高血脂时表达明显升高,并特异的结合、吞噬氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL),进一步促进内皮细胞功能紊乱、平滑肌细胞增殖及参与泡沫细胞形成等动脉粥样硬化的病理过程。国内外研究发现,ADMA可能通过增加细胞氧化应激水平,激活NF-kB途径上调人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)LOX-1基因的表达,进而增加其对oxLDL的摄取,促进动脉粥样硬化的发生、发展。动物实验表明,灌注ADMA可致血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)基因表达上调,活性氧(reactive oxygen species, ROS)产生增加,诱导冠状微动脉斑块的形成；而血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitor,ACEI)和血管紧张素受体拮抗剂(angiotensin receptor blocker,ARB)可阻断ADMA对ACE基因表达的上调作用,减少冠状微动脉斑块的面积。另有研究发现,ADMA可通过血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, AT Ⅱ)途径,刺激烟酰胺腺嘌呤核苷酸还原型辅酶Ⅱ(nicotinamide adenine nucleotide coenzymes, NADPH)氧化酶p22phox亚基的表达,促进ROS生成,诱导氧化应激,而氧化应激是动脉粥样硬化的核心环节,以上结果提示ADMA的部分作用是通过AT Ⅱ进行的。缬沙坦是临床上常用的一种血管紧张素受体拮抗剂,广泛用于高血压及糖尿病肾病的治疗。大量研究表明,其具有独立于降压作用外的血管内皮保护作用和抗氧化应激作用。另有研究发现缬沙坦可逆转AT Ⅱ所致的LOX-1表达的上调。那么缬沙坦是否可阻断ADMA对LOX-1表达的影响及是否是通过抗氧化应激途径发挥作用呢?本研究通过观察缬沙坦对ADMA诱导的HUVECs LOX-1mRNA转录和蛋白表达的影响,探讨其可能的机制。目的研究ADMA对HUVECs LOX-1mRNA转录和蛋白表达及氧化应激的影响,并探讨缬沙坦是否可拮抗ADMA的上述作用及可能的机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,随机分为以下几组：①正常对照组(人脐静脉内皮细胞培养24小时)；②15umol/LADMA组(加入15umol／L的ADMA干预细胞24小时)；③15umol／LADMA+缬沙坦预处理组(分别给予10-7mol／L、10-6moll/L及10-5mol／L缬沙坦预作用1小时后再加入15umol/LADMA,细胞继续培养24小时)；④正常+缬沙坦组(10-5mol／L缬沙坦干预细胞24小时)。以2,,7,-二氯双氢荧光素二乙酸盐(DCFH-DA)为荧光探针标记细胞,运用流式细胞仪测定细胞内活性氧(reactive oxygen species ROS)的含量；逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定NADPH氧化酶p22phox亚基及LOX-1mRNA的转录；细胞酶联免疫法(ELISA)检测细胞LOX-1蛋白的表达。采用SPSS17.0软件进行统计学分析,多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA),两两比较采用t检验。以a=0.05为显著性检验水准,p<0.05为有统计学意义。结果1.与对照组相比,ADMA组ROS水平明显升高p<0.05),p22phox mRNA转录显著、LOX-1mRNA转录和LOX-1蛋白的表达明显上调(p<0.05)。2.与ADMA组相比,不同浓度缬沙坦组呈剂量依赖的降低细胞ROS水平(p<0.05),下调p22phx、LOX-1mRNA转录和LOX-1蛋白的表达(p<0.05)；而正常+缬沙坦组与对照组相比对上述指标的影响差异无统计学意义(p>0.05)结论1. ADMA可能通过上调NADPH氧化酶p22phox亚基mRNA的转录,增加细胞ROS的水平,促进细胞LOX-1mRNA转录和蛋白的表达。提示这可能是ADMA致动脉粥样硬化的机制之一。2.缬沙坦可能通过抑制NADPH氧化酶p22phox亚基mRNA的表达,减少细胞ROS的水平,逆转ADMA对细胞LOX-1mRNA和蛋白表达的影响。提示缬沙坦可通过抗氧化效应保护与改善内皮细胞,起到抗动脉粥样硬化的作用。
参考文献：
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[3]. 精氨酸对热应激损伤大鼠胸腺和巨噬细胞保护作用机制探讨[D]. 周爱军. 第一军医大学. 2005
[4]. L-精氨酸对热应激小鼠胸腺T细胞亚群的影响[J]. 曾静, 罗海吉, 张勇, 卢晓翠. 热带医学杂志. 2003
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[7]. L-精氨酸对热应激大鼠胸腺细胞凋亡影响的实验研究[D]. 张云山. 第一军医大学. 2000
[8]. 精氨酸对肉仔鸡生长性能和免疫功能的影响及其机理研究[D]. 郭祎玮. 内蒙古农业大学. 2014
[9]. 精氨酸对蛋鸡采食及组织蛋白质代谢调控的机理研究[D]. 袁超. 浙江大学. 2016
[10]. 缬沙坦抑制非对称二甲基精氨酸诱导的内皮细胞LOX-1的表达[D]. 唐丽. 郑州大学. 2013