中国人民解放军第三0三医院药剂科 广西南宁 530021
【摘 要】目的：建立用HPLC法测定母婴宝口服液中6-姜辣素的含量。方法：采用岛津-C18柱（4.6×250mm，5μm），用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-水（50：5：45）为流动相；柱温为室温，流速为1ml/min，检测波长为280nm，进样量为10µl。结果：以6-姜辣素微克数为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程为Y＝1721566.21X+168101.61，相关系数r＝0.9996。结果表明6-姜辣素在0.1775～5.9023µgµg范围内与峰面积积分值成良好线性关系。结论：该方法简便、准确，可用于母婴宝口服液中6-姜辣素的质量控制。
【关键词】6-姜辣素；母婴宝口服液；HPLC；含量
母婴宝口服液[1]是中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂，处方由龙眼肉、大枣、鸡血藤、章鱼、木瓜、生姜、王不留行、通草等八味中药组成的复方制剂，功能补气益血，通脉催乳。用于改善妇女产后气血亏损，少乳，乳汁不通。为控制母婴宝制剂质量，本文采用高效液相法测定了母婴宝口服液中主要成份6-姜辣素的含量。
1 仪器与试药
LC-10AP型高效液相色谱仪（日本岛津公司）；SPD-10Avp紫外-可见检测器；LC-10ATVP7725（i）型手动进样器；威玛龙色谱数据工作站；Aglient 8456紫外可见分光光度计；kh-250db型超声处理器（昆山禾创超声仪器有限公司）。
6-姜辣素（购自中国药品生物制品检定院，供含量测定用，批号：100065-201201）；母婴宝口服液（购自A厂，共10批）；乙腈、甲醇为色谱纯；其余试剂为分析纯，水为超纯水。
2 实验方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent Eclipse XDB-C18（4.6×250mm，5μm）；流动相：乙腈-甲醇-水（50：5：45）；流速：1ml/min；检测波长：280nm；柱温：室温；进样量：10µl，理论塔板数按6-姜辣素计算不低于3500。根据色谱图可知，供试品中6-姜辣素分离度较好，主要色谱峰重没有重叠，故色谱条件适用于本实验。
2.2 对照品溶液的制备 精密称定6-姜辣素对照品适量3mg，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，即可。
2.3 供试品溶液的制备 取本品10 ml，精密加乙腈25ml，超声提取1小时，冷至室温，摇匀后过滤，精密量取续滤液10ml，浓缩成粘稠物，后用乙腈-甲醇-水（50：5：45）溶解，移至10ml量瓶中，用乙腈-甲醇-水（50：5：45）稀释至刻度，搅匀后过滤，取续滤液作为供试品。
2.4 测定法 按上述色普条件进行测定，根据6-姜辣素峰面积，计算出其在供试品中的含量。
2.5 线性关系考察 取6-姜辣素对照品适量，精密称定，加流动相制成每ml分别含0.4011mg的溶液，作为样品溶液1。取样品溶液1适量依次稀释2倍、4倍、8倍、16倍、32倍，分别作为样品溶液2、样品溶液3、样品溶液4、样品溶液5。分别精密吸取10µl，注入液相色谱仪，测定。以6-姜辣素微克数为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线。经计算得回归方程为Y＝1721566.21X+168101.61，相关系数r＝0.9996。结果表明6-姜辣素在0.1775～5.9023µgµg范围内与峰面积积分值成良好线性关系。
2.6 精密度试验 取供试品溶液（批号20100601），连续进样6次，测定6-姜辣素的峰面积。6次测定结果RSD为0.24%（n=6），表明仪器精密度良好。
2.7 稳定性试验 精密吸取供试品溶液（批号：20100602）10µl，分别于0，4，8，12，24小时进行测定，其峰面积RSD为1.05%，表明供试品溶液在24h内稳定。
2.8 阴性对照试验 因6-姜辣素为生姜特有成份，本处方其他成份在已知文献中，并未检索到含有6-姜辣素的报道，故可证明处方中其它成分对测定无干扰。
2.9 重复性试验 取样品（批号：20100702）按样品溶液制备项下的方法制备供试品溶液6份，进样10μl，按上述色谱条件测定，计算含量，求得6-姜辣素平均含量为16.77 mg/g，RSD为1.15%（n=6），表明重复性良好。
2.10 加样回收率试验
取批号（20120601）本品内容物各10ml，平行5份，精密量取，各加入6-姜辣素对照品0.27mg，按供试品的制备方法制备试液，依次测定各份样品中6-姜辣素的含量由表1可得，本方法测定6-姜辣素的含量准确度高。
表16-姜辣素加样回收试验结果
3.讨论
3.1 波长的选择，
本品用紫外可见分光光度计200～400nm波长处扫描，结果在248nm和280nm处有最大吸收，结合有关文献[2]和最大吸收波长的吸光度大小，选用280nm作为高效液相检测波长。
3.2流动相的选择
文献报道测定6-姜辣素含量的流动相有乙腈-甲醇-水（40：5：55）[3]，甲醇-水（55：45）[4]，考虑到本品成份较复杂，乙腈洗脱能力强，故选择乙腈-甲醇-水（50：5：45）系统，在试验中发现有效的改善了峰形，分离度较好。
3.3柱温的考察
根据一些文献，在不同的温度下，出峰保留时间有所区别，本实验分别考察对比了 30℃[5]，35℃[6]，室温下的出峰保留时间，发现并没有明显区别，故在柱温选择了室温。
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂（5）.65
[2]国家药典委员会. 中华人民共和国药典2010版（一部）[S].北京：化学工业出版社，2005.214.
[3]国家药典委员会. 中华人民共和国药典2010版（一部）[S].北京：化学工业出版社，2005.214.
[4]孟喜成，杨青，王青兰.高效液相色谱法测定十滴水中6-姜辣素的含量[J].中国药物与临床，2012，（2）.188-189
[5]汪新体，常明泉，陈芳，汪依林.高效液相色谱法测定颠胃酸口服液中6-姜辣素的含量[J].儿科药学杂志，2014，20（2）.50-51
[6]王维皓，王智民，徐丽珍. HPLC法测定生姜中有效成分6-姜辣素的含量[J].中国中药杂志，2002，（05）
论文作者:江溱
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2017年3月第6期
论文发表时间:2017/7/18
标签：溶液论文; 色谱论文; 含量论文; 甲醇论文; 口服液论文; 精密论文; 样品论文; 《中国医学人文》(学术版)2017年3月第6期论文;