黑龙江省北安市中心血库 164000
摘要：目的 研究并探讨核酸检测与酶联免疫检测血液病毒的临床效果。方法 此次研究的对象是选取2013年7月—2016年7月该血站检验科血液样本500例，将其临床资料进行回顾性分析，并分别给予核酸检测与酶联免疫检测，并且计算与对比两种检测方法的阳性率。结果 在HBV（乙型肝炎病毒）检测中，核酸检测阳性率为3.0%（15/500），同酶联免疫检测的1.2%（6/500）进行比较，差异有统计学意义（P <0.05）；在HCV（丙型肝炎病毒）检测中，核酸检测阳性率为1.8%（9/500），同酶联免疫检测的1.6%（8/500）进行比较，差异无统计学意义（P>0.05）；在HIV（人类免疫缺陷病毒）检测中，核酸检测阳性率为0.4%（2/500），同酶联免疫检测的1.8%（9/500）进行比较，差异有统计学意义（P <0.05）。结论 在血液病毒检测中，核酸检测与酶联免疫检测各具优势，存在一定的互补性，因此，可结合实际情况，给予两者联合应用，以此提高血液病毒检测准确性。
关键词：血液病毒；核酸检测；酶联免疫检测
[Abstract] Objective To study and explore the clinical effect of nucleic acid detection and enzyme linked immunosorbent assay for detection of blood virus. The object of this study is from July 2013 to July 2016 for the inspection of blood blood samples in 500 cases，the clinical data were retrospectively analyzed，and were given nucleic acid detection and enzyme-linked immunosorbent assay，and the positive rate was calculated with two methods for detection of contrast. Results in HBV（hepatitis B virus）detection，the positive rate of nucleic acid detection was 3%（15/500），and enzyme-linked immunosorbent assay（6/500）1.2% were compared，the difference was statistically significant（P <0.05）；HCV（hepatitis C virus）detection，the positive rate of nucleic acid detection was 1.8%（9/500），the same ELISA 1.6%（8/500）were compared，the difference was not statistically significant（P>0.05）；HIV（human immunodeficiency virus）detection，the positive rate of nucleic acid detection was 0.4%（2/500），and enzyme-linked immunosorbent assay（9/500）1.8% were compared，the difference was statistically significant（P <0.05）. Conclusion the blood virus detection，nucleic acid detection and enzyme-linked immunosorbent assay have their respective advantages and complementarities，must therefore be combined with the actual situation，given the combination of the two，in order to improve the accuracy of blood virus detection.
[Keywords] blood virus；nucleic acid detection；enzyme linked immunosorbent assay
输血是HBV、HCV、HIV传染的主要途径，加强血液的抗体检验或抗原检验，可以有效减少甚至避免输血中病毒的传染。现今，解决病毒传染“窗口期”是血液筛查技术的重要所在[1]。随着PCR探针、病毒核酸提取自动化的不断发展，在血液筛查检测中核酸检测应用越来越普遍。相较于酶联免疫检测而言，其“窗口期”更短，减少了假阳性。为了更好地落实血液病毒检测工作，对该血站检验科2013年7月—2016年7月抽检的500例血液样本进行分析，探究核酸检测与酶联免疫检测的应用效果，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年7月—2016年7月该血站检验科血液样本500例为研究对象，其中女性220例，男性280例；最小年龄是19岁，最大年龄是62岁，平均为（42.1±4.4）岁。每份血液样本均放置于5 mL、7 mL的真空抗凝管中，保存在2～8 ℃的冰箱中。其中5 mL真空抗凝管中的血液样本在3h内予以血浆分离，之后给予核酸检测；7 mL真空抗凝管中的血液样本在24 h内予以血浆分离，之后给予酶联免疫检测。
1.2 方法
1.2.1 核酸检测
在室温条件下，离心处理5 mL真空抗凝管中的血液样本，离心时间为20 min，并且保存在2～8 ℃的冰箱中。在血液样本常规检查合格之后，置于加样仪样品条架上，按照一级分配试剂程序予以操作。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆具体如下：向A号96孔深孔板中加入600 μL结合液与50 μL磁珠，向B号96孔深孔板中加入100 μL洗脱液及100 μL的A、B洗液，裂解血液样本，并且在操作过程中注意防范污染。裂解血液样本之后，利用核酸提取仪从A号96孔深孔板、B号96孔深孔板中提取核酸，同时配备扩增核酸的反应液。根据血液样本量，按照四级核酸扩增程序，向八联管中加入提取核酸后的结合液，并且置于PCR仪上予以扩增，详细记录结果，挑出呈现阳性的血液样本，之后给予拆分实验，从而对血液样本阳性率予以确定。
1.2.2 酶联免疫检测
在室温条件下，离心处理7 mL真空抗凝管中的血液样本，离心时间为20 min，并且保存在2～8 ℃的冰箱中。在完成离心处理后，利用全自动加样仪予以自动加样，并且采用全自动酶免分析仪进行分析，详细记录检测结果。
1.3 观察指标
对两种检测方法的检测结果进行观察与记录，通过对比，探析核酸检测与酶联免疫检测的应用效果。
1.4 统计方法
将观察数据导入SPSS 19.0版统计学软件中予以分析，用百分比的形式表示检测阳性率，并进行χ2检验。
2 结果
2.1 对比HBV的核酸检测与酶联免疫检测
在HBV检测中，核酸检测阳性率为3.0%，同酶联免疫检测的1.2%进行比较，差异有统计学意义（χ2=3.940，P<0.05）。
2.2 对比HCV的核酸检测与酶联免疫检测
在HCV检测中，核酸检测阳性率为1.8%，同酶联免疫检测的1.6%进行比较，差异无统计学意义（χ2=0.060，P>0.05）。
2.3 对比HIV的核酸检测与酶联免疫检测
在HIV检测中，核酸检测阳性率为0.4%，同酶联免疫检测的1.8%进行比较，差异有统计学意义（χ2=4.504，P<0.05）。
3 讨论
目前，病毒标记物检测的内容主要为病毒抗原、抗体的检测，从病毒进入机体至能够检测到病毒抗原或者抗体的过程，称之为病毒感染的“窗口期”[2]。在血液检测现行方法中，血清学检测技术的“窗口期”相对较长，对于处在“窗口期”的血液病毒检测而言，其结果均呈阴性，而事实上血液中已经存在病毒，并且具有一定的复制能力，所以，怎样缩短病毒检测“窗口期”，有效检测到血液病毒，成为了专业研究的重点内容。
在血液病毒检验中，核酸检测得到了广泛应用，因为其灵敏度与特异性较高，使其检测效果更好，有效提高了医疗质量。尽管核酸检测优势明显，但其对血液样本、检测环境及操作人员技术水平的要求较高，倘若检测前无法确保血液样本的质量，那么也就无法确保核酸检测的效果，致使检测失败，出现漏检[3]。因此，为了有效提高血液病毒检测准确性，一定要加强核酸检测与酶联免疫检测的互补。
在HBV检测中，核酸检测阳性率为3.0%，同酶联免疫检测的1.2%进行比较，差异有统计学意义（P<0.05）。此研究结果与相关文献报道[4]十分相似。通过总结分析可知，致使出现漏检的原因主要有：①乙肝酶联免疫检测的“窗口期”较长：在HBV漏检中，乙肝酶联免疫检测的“窗口期”较长是主要原因，通常而言，HBV的“窗口期”在0.5～3.0个月之间，少数情况下可达到4.0～5.0个月[5]。②存在HBV变异株：HBV-S基因变异造成病毒衣壳抗原决定簇改变，进而引起相应的抗体变化，易造成漏检。③隐匿性HBV感染：因为季节因素的影响，导致HBV感染存在一定的隐匿性，易出现漏检。在实际检测中，两种检测方法均存在一些漏检的弱阳性情况，各具优劣势，所以，在实践应用中，可充分考虑实际情况，给予两种检测互补，以此提高检测准确性。
在HCV检测中，核酸检测阳性率为1.8%，同酶联免疫检测的1.6%进行比较，差异无统计学意义（P>0.05）。此研究结果与相关文献报道[6]十分相似。由此可以看出，在血液病毒检测中，核酸检测与酶联免疫检测均存在着一定的不足，应重视两种检测方法的互补，以此增强血液病毒检测质量。
在HIV检测中，核酸检测阳性率为0.4%，同酶联免疫检测的1.8%进行比较，差异有统计学意义（P<0.05）。此研究结果与相关文献报道[7]十分相似。由此可以看出，核酸检测血液HIV的阳性率明显低于酶联免疫检测，考虑到酶联免疫检测的假阳性较高，可采用两种检测方法联合应用的方案，以此避免血液浪费，提高检测效果。在该次检测中，核酸检测未出现漏检情况，原因可能为：①血站检测规章制度较为完善，并且质控措施落实到位。②达到了100%的自愿无偿献血，减少了恶意献血对血液样本质量的干扰。③二次酶联免疫检测得到了充分落实。④HIV酶联免疫检测的“窗口期”相对较短，进一步确保了血液样本的质量。然而有关文献研究显示，因为急性艾滋病毒感染者的病程中，血清中P24抗原减少、抗体增加，导致出现“第2窗口期”，其抗原、抗体浓度要比试剂检测限值低，进而致使出现漏检现象[8]。随着血液样本量的不断增加，在进行核酸检测的时候，不排除出现漏检的情况。为了有效控制艾滋病毒感染，必须重视HIV抗原、抗体的检测，从而尽早发现感染者，以此对其进行有效控制，避免传播。在进行检测的时候，一定要加强核酸检测与酶联免疫检测的联合应用，以此最大限度地提高检测准确性。
当然，在血液病毒检测中，核酸检测也不是绝对可靠的，无法用核酸检测完全代替酶联免疫检测，因为核酸检测易受到众多因素的干扰，导致检测假阳性率较高。所以，在血液病毒检测中，核酸检测与酶联免疫检测各具优势，存在一定的互补性，因此，可结合实际情况，给予二者联合应用，以此提高血液病毒检测准确性。
综上，为了减少输血感染，提高医疗用血安全性，一定要重视核酸检测与酶联免疫检测联合应用。
参考文献：
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论文作者:张文艺
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2017年第20期
论文发表时间:2017/12/15
标签：核酸论文; 血液论文; 免疫论文; 病毒论文; 样本论文; 阳性论文; 统计学论文; 《中国误诊学杂志》2017年第20期论文;