1.石河子大学药学院 石河子 832002；2.新疆克拉玛依市中心医院 克拉玛依 834000
摘要：目的 建立复方辛夷滴鼻剂中木兰脂素的含量测定方法。方法 采用HPLC法，色谱柱为Kromasil C18（250mm×4，6 mm，5μm）；流动相为乙腈-四氢呋喃-水（35：1：64）；流速为1.00 ml / min；柱温为35℃；检测波长为278nm。结果 木兰脂素的质量浓度在0.977～125μg/mL范围内呈良好线性关系，平均回收率为98.33％，RSD为1.91％。结论 本方法准确可靠、重现性好，可用于复方辛夷滴鼻剂的质量控制。
关键词：HPLC法；复方辛夷滴鼻剂；木兰脂素；含量测定
复方辛夷滴鼻剂是由辛夷、薄荷、冰片三味药材组成，具有益气固表，滋阴养阳，散风通窍的功效，临床可用于治疗过敏性、急慢性鼻炎、前额胀痛、嗅觉减退及讲话带有鼻音等症。辛夷为方中君药，有散风寒、通鼻窍的作用，而木兰脂素为其主要有效成分，具有抗炎、抗过敏作用[1-2]。本实验在参考文献[3-4]的基础上，采用HPLC法测定复方辛夷滴鼻剂中木兰脂素的含量，为制定该制剂的质量标准的制定提供依据。
1仪器与试药
1.1仪器
SCL-10AVP型高效液相色谱仪、SPD-10AVP检测器、Ver5.33色谱工作站（日本岛津）；AK-1001A摇摆试中药粉碎机（温岭市奥为中药机械有限公司）；BS2202S精密天平（德国Sartorius）；GB11240-80型恒温水浴锅（北京市医疗设备厂）；KQ3200DE超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；SHB-III型台式循环水式多用真空泵（郑州长城仪器有限公司）。
1.2试药与试剂
复方辛夷滴鼻剂（本实验室自制，批号20140526、20140527、20140528）；木兰脂素对照品（中国药品生物制品检定所，批号为0731-200205）；乙腈和四氢呋喃均为色谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件及系统适应性试验
色谱柱为Kromasil C18（250mm×4.6 mm，5μm），流动相为乙腈-四氢呋喃-水（体积比35：1：64），检测波长为278 nm，流速为1.0mL/min，柱温为35℃。理论板数按木兰脂素峰计算，应不低于9 000，拖尾因子为1.01，保留时间约为21.6min，木兰脂素与其它组分的分离度大于1.5，阴性样品不干扰样品测定，色谱图见图l。
图1 对照品（A）、供试品（B）与阴性对照品（C）的HPLC色谱图
2.2 对照品溶液制备
精密称取木兰脂素对照品6.25mg，置25 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制备浓度为250μg/mL的木兰脂素对照品储备液。
2.3 供试品溶液制备
精密量取复方辛夷滴鼻剂制剂5mL，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯20mL，称定重量，超声30min，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，精密量取3mL，加入中性氧化铝柱（100-200目，7g，内径9mm，湿法装柱，用乙酸乙酯5mL预洗）上，用甲醇15mL洗脱，收集洗脱液，置25mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜0.45μm过滤，取续滤液，即得。取不含辛夷的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备阴性样品。
2.4 标准曲线的制备
精密吸取木兰脂素对照品储备液适量，制备成1.95、3.91、15.63、31.25、62.50、87.50、125μg/mL的系列标准溶液，按“2.1”项下色谱条件分别进样20μL测定，以对照品的峰面积（A）为纵坐标，对照品质量浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程A= Y=16696 C -10137，r=0.9995，结果表明在1.95～125μg/mL范围内，线性关系良好。
2.5 精密度试验
取木兰脂素对照品溶液20μL，按“2.1”项下色谱条件连续测定5次，记录峰面积并计算，结果日内RSD为0.41％；连续分析5d考察日间误差，RSD为1.21％，表明仪器进样精密度良好。表明仪器精密度良好。
2.6 稳定性试验
取供试品溶液一份在0、2、4、6、8、10、12 h分别进样20μL，记录峰面积，结果木兰脂素峰面积的RSD为0.81％，表明供试品溶液在12 h内稳定。
2.7 重复性试验
取同一批样品5份，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，分别进样20μL，记录峰面积，结果木兰脂素峰面积的RSD为0.66％，表明该方法重现性良好。
2.8 回收率试验
采用加样回收率法。精密量取已知含量的样品6份，分别加入相当于已知样品含量80％、100％及120％的对照品溶液按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样20μL，测定，并计算回收率，结果木兰脂素平均回收率为98.33％，RSD为1.91％，结果见表1。
表1 木兰脂素回收率测定实验结果（n=6）
2.9 样品含量测定
取3批复方辛夷滴鼻剂（20140526，20140527，20140528），分别按“2.3”项下操作制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进行测定，结果3批样品中木兰脂素的含量分别为1.30，1.33，1.28 mg/mL。
3 讨论
本品为复方中药制剂，化学成分较复杂，君药辛夷的指标性成分木兰脂素为水溶性成分，制剂中含有辛夷挥发油，薄荷脑等大量脂溶性成分，用高效液相色谱仪测定制剂含量时，需用氧化铝色谱柱将制剂中维生素A、挥发油等脂溶性成分分离，可除去大部分杂质成分使木兰脂素洗脱完全且无杂质峰干扰，提高了测定的精密度。所建立的含量测定方法简便、灵敏、专属性强、重现性好，可以作为有效的质量控制方法。
参考相关文献[4，5]，本研究对流动相系统的种类和比例进行了筛选，比较乙腈、水和乙腈、四氢呋喃、水的分离效果，后者作为流动相分离效果较好，进一步考察其比例后确定35：1：64（体积比）的分离效果最佳，可使木兰脂素与其它组分分离完全，且保留时间适中，分离度达1.5以上，峰形较好，可作为木兰脂素定量检测方法。
参考文献：
[1]国家药典委员会.中国人民共和国药典（一部）[S]． 北京：中国医药科技出版社，2010：169-170．
[2]李小莉，张永忠．木兰脂素抗炎、抗过敏作用的实验研究[J]．中草药，2002，33（11）：1014-1015．
[3]吕洁，孟祥军，邹春阳，等．HPLC法测定鼻通宁滴剂中木兰脂素的含量[J]． 辽宁中医药大学学报，2007，9（4）：159-160．
[4]黄景宏．鼻康喷雾剂的质量控制标准研究[J]．海峡药学，2014，26（3）：68-69．
[5]李坚，周杰，刘志雄，等．HPLC法测定鼻敏清丸胶囊中木兰脂素的含量[J]．广东药学院学报，2009，28（5）：486- 488．
作者简介：匡丽萍（1976-），女，在读硕士研究生，从事临床药学研究。
通讯作者：谭 勇（1976-），男，教授，从事药用植物资源及天然产物化学方面的研究。
基金项目：石河子大学自然科学重点项目（ZRKX2009ZD05）资助。
论文作者:匡丽萍1，2,谭勇1（通讯作者）
论文发表刊物:《健康世界》2015年7期
论文发表时间:2015/10/30
标签：木兰论文; 辛夷论文; 色谱论文; 溶液论文; 复方论文; 含量论文; 精密论文; 《健康世界》2015年7期论文;