Sysmex异常嗜酸性粒细胞散点图筛检疟原虫感染的探讨论文_幸娟霞1,张麟燕2,刘琪1,彭军容1,罗国霞1,施

(1重庆市涪陵中心医院医学检验科 重庆 408000)(2重庆市涪陵中心医院耳鼻喉科 重庆 408000;3重庆市涪陵区疾控中心 重庆 408000)

【摘要】 目的:探讨Sysmex XE-2100血细胞分析仪嗜酸性粒细胞(eosinophil,EO)增高和散点图异常,综合镜检筛检疟原虫。方法:对XE-2100提示EO比值增高的样本制片染色镜检,若E0无异常,则关注红细胞,筛查疟原虫。结果:仪器300例报警EO+增高样本中,镜检有4例EO与仪器报警不符,最终确定疟原虫感染。结论:用XE-2100进行血常规分析时,如仪器示“EO+”而镜检不符者,提示感染疟原虫的可能性大。

【关键词】 血细胞分析仪;疟原虫;嗜酸性粒细胞

【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2018)24-0043-01

SysmexXE-2100为普遍使用的血细胞分析仪,具有CBC、CBC+DIFF、RET等通道模式。它与很多血细胞分析仪同样虽不能很正确识别异常细胞,但能提示较可靠的报警信息,检验者可据信息推片复检,核对其准确性。我科对300例仪器提示嗜酸增高样本中发现4例报警信息与镜检结果不一致,最后分析散点图特征,并结合仪器原理和镜下红细胞形态,最终发现疟原虫感染。

1.材料和方法

1.1 材料

1.1.1仪器和试剂

(1)血细胞分析仪:日本Sysmex XE-2100血细胞分析仪,采用核酸荧光染色技术(DIFF通道)和激光流式分析技术(WBC/BASO通道)双方法检测WBC总数和分类,该仪器用侧向散射光(SSC,细胞内容物复杂程度)和侧向荧光强度(SFL,细胞内RNA和DNA含量)行WBC分类计数。同时在溶血素中加入大分子有机酸,让有机酸特异性结合到EO颗粒上,以增加EO内容物的复杂性,从而达到区分EO的目的[1]。

试剂、校准品、质控品:Sysmex公司原装配套产品。

(2)显微镜Olympus BX41;BASO刘氏染色液。制片按《全国临床检验操作规程》第4版执行[2]。

1.1.2病例及样本 2016年1月—2017年6月,EO异常的门诊和住院患者300例;其中疟原虫感染者:男4例,45~49岁,平均年龄46.5岁,均为重庆本地人,均有境外工作或居住史,因发热、寒战、畏寒等就诊。

1.2 方法

(1)血细胞分析仪检测 用乙二胺四乙酸二钾(EDTA—K2)抗凝真空管,采集2mL静脉血充分混匀,于抽血后1h内用XE-2100上机检测。仪器按期校正,每日室内质控,双水平;运行良好。

(2)镜检 仪器示EO增高或异常报警的样本,制备合格的血涂片,用刘氏染液染色镜检复核。若出现镜检与仪器结果不一致时,观察RBC形态查找疟原虫。

2.结果

2.1 血细胞分析仪

XE-2100检测300例EO增高样本中,4例镜检与仪器不符,占1.3%,查看WBC散点图,发现异常,细看散点图上EO与中性粒细胞间距变小,紧密连接,表现为EO假性增高(疟疾感染者)。

2.2 镜检结果

4例疟疾感染者镜检示EO均正常,同时RBC内见疟原虫裂殖体、配子体或滋养体。检测结果见表。

3.讨论

Sysmex XE-2100血液分析仪功能齐全,应用广泛,能对异常信息提示,在总300例EO增高患者中,4例疟原虫感染样本的仪器信息提示与镜检不一致,其散点图示EO与中性粒细胞间紧密连接,而余296例散点图无明显异常。分析原因可能为:该XE-2100 WBC分类计数原理是利用SSC和SFL,而疟原虫感染的主要发病原因在于红细胞内疟原虫裂解增值,疟原虫感染RBC消化Hb后产生疟色素,为一种双折光晶体,当RBC破裂,疟色素释放出来被WBC所吞噬[3-5],吞噬了疟色素的WBC侧射光强度发生改变,显示在EO散点图区域略左侧,故仪器上此类样本被误认EO增高,造成EO+比值增高假象;而现实正常EO增高与假性EO增高的散点位置有差异,余296例为真性EO增多,显示为正常散点图。

回顾总结,虽然此类疟原虫标本仅占标本总量的1.3%,工作中在仪器报警提示与镜检不符时,不能就轻易认可报警信息而不查找真正原因,应严格认真执行复检流程。其次需要对仪器工作原理掌握,重视各种报警信息含义,才能明确引起异常报警的真正原因。所以在工作中使用SysmexXE-2100时,认识“特征性”的散点图筛检疟原虫有很好的临床价值,但仅用于过筛并不能确认疟原虫类别,需进一步镜下确认。鉴于病例数有限,仍待进一步累积病例,证实感染疟原虫的“特征性”散点图。

【参考文献】

[1] Jerelyn W,Patricia G.Performance Evaluation of the Sysmex XE-2100 Hematology Analyzer[J].Laborato—Ry Hematology,2000,6(2):8392.

[2]尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第4版.南京:人民卫生出版社,2015:t24、838-839.

[3] Jungwon H,Junseop J,Hyungdu Y,et a1.Pseudoeosi—Nophilia associated with malaria infection determined In the SysmexXE一2100 hematology analyzer[J].Ann Hematol,2005,84(6):400402.

[4] Rosenthal PJ,Meshnick SR.Hemoglobin catabolism And iron utilization by malaria parasites[J].Mol Bio—Ehem Parasitol,1996,83(2):131-139.

[5] Noland GS,Briones N,Sullivan DJ Jr.The shape and Size of hemozoin crystals distinguishes diverse plasmo—Dium species[J].Mol Biochem Parasitol,2003,130(2):9199.

作者简介:幸娟霞(1983-),女,汉族,重庆人,主管技师,学士学位,临床检验及血液病学方向.

通讯作者:王村建(1982-),男,汉族,山东人,主治医师,学士学位,职业病防治方向.

论文作者:幸娟霞1,张麟燕2,刘琪1,彭军容1,罗国霞1,施

论文发表刊物:《医药前沿》2018年8月第24期

论文发表时间:2018/9/3

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