双流县妇幼保健院 儿科 610200
摘要：目的：探讨血清白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）的浓度的在小儿支原体肺炎（MPP）中的临床意义。方法：选取我院2014年6月～2015年6月我院收治确诊的MPP患儿60例，应用酶联免疫法（ELISA）检测MPP 患儿治疗前后的血清IL-6、IL-8 浓度，选取同期健康体检的儿童60例作为对照组。结果：MPP 组治疗后的血清IL-6、IL-8的浓度明显低于治疗前，差异有统计学意义（P<0.05）；MPP 组治疗后的血清IL-6和IL-8 浓度与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：血清IL-6和IL-8参与了MPP的发病，可能作为诊断对肺炎支原体肺炎的生物学标记物。
关键词：小儿支原体肺炎；白介素-6；白介素-8
[Abstract]Objective：To investigate the role and importance of the determination of serum concentrations of IL-6 and IL-6 in children with MPP.Methods：From June 2014 to June 2015，select 60 healthy children were used as control group，（ELISA）were adopted to respectively detect the levels IL-6 and IL-8 in serum of 60 MPP children before and after treatment.Results：The serum concentrations of IL-6 and IL-8 in MPP after treatment were lower than thos groupbefore treatment，differences were statistically significant（P<0.05）；there is no significant difference of serum concentrations of IL-6 and IL-8 between MPP group after treatment and control group（P>0.05）.Conclusion：Serum IL-6 and IL-8 were involved in the pathogenesis of MPP，which may be used as a biomarker for the diagnosis of Mycoplasma pneumoniae pneumonia.
[Key words]Children mycoplasma pneumonia；Interleukin-6；Interleukin-8
支原体肺炎（MPP）又称原发性非典型肺炎、冷凝集阳性肺炎，是由支原体（MP）感染引起的、呈间质性肺炎及毛细支气管炎样改变，临床表现为顽固性剧烈咳嗽的肺部炎症。MP是儿童时期肺炎和其他呼吸道感染的重要病原之一。本文通过60例MPP 患儿及健康对照组在治疗前后外周血白介素-6（IL-6）和白介素-8（IL-8）的浓度水平检测，旨在进一步探讨支原体肺炎的发病机制，为MPP 患儿的诊断和治疗提供新的方向[1]。
1 资料与方法[2]
1.1 一般资料 选取我院2014年6月～2015年6月我院收治确诊的MPP患儿60例，男31例，女29例；年龄3～10 岁，平均（5.1±0.8）岁。临床诊断符合《实用儿科学》中MPP 患儿入选标准[1]，血清抗体肺炎支原体（MP）IgM 阳性，且无其他病原感染的临床及实验室证据。患儿采血前统一给予相关对症治疗（退热、止咳、祛痰），未经抗MP 等特殊治疗。同期门诊健康体检者为对照组60例，年龄为（2—11）岁，平均年龄为（5.3±0.7）岁，入选者均无实验室指标异常。各组间性别、年龄差异均无统计学意义。所有参与者均知情同意。
MPP治疗后恢复期标准：①临床症状消失，体温恢复正常，咳嗽缓解，有肺外合并症者病情明显好转；②肺部体征明显减轻或消失；③根据以上标准跟踪，采集患儿恢复期血液。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 MPP 组患儿，在治疗前后分别采集清晨空腹静脉血5ml，对照组同样采集静脉血5 ml，置入EDTA抗凝的PC管，离心5分钟，2 000转/分，分装编号，保存于-80℃备用。
1.2.2 IL-6及IL-8的检测[3]
主要步骤如下：（1）标准品配制：每瓶标准品加入标准品稀释液1ml，盖好后置室温10分钟，同时反复颠倒以助溶解。（2）准备7个稀释标准品的清洁EP管，每个EP管中加入500µl的标准品稀释液，向第一个EP管中加入500µl标准品混匀，然后从第一个EP中取500µl加入第二个EP管中混匀。如此反复作对倍稀释至第7管。（3）从已平衡至室温的密封袋中取出酶标板等试验品。向第一排的8个酶标孔中加入100µl标准品，空白对照孔加标本通用稀释液，其余各孔均加入100µl待测样本。封住所有酶标孔在36℃孵箱中孵育1.5小时。（4）弃去孔内残余液，甩干，洗板5次。（5）将 IL-6 ELISA 试剂盒内的生物素抗人 IL-6 抗体工作液按每孔100µl依次加入（TMB 空白显色孔加生物素抗体稀释液），36℃反应 60 分钟。（6）倒掉酶标孔内的生物素化抗体，洗板5次。7）空白孔加酶结合物稀释液，其余每孔100µl 依次加入酶结合物工作液，封住所有酶标孔，36℃避光反应 30 分钟。（8）洗板5次。（9）向每孔中加入100µl TMB显色底物。封住所有酶标孔在36℃避光反应15分钟。（10）向孔中加入100µl终止液，此时蓝色立转黄色，即刻用酶标仪在 450nm 测定 OD 值。（11）根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度，乘以稀释倍数 5 即得样品 IL-6/ IL-8浓度。
1.3 统计学方法
采用SPSS 16．0统计软件分析数据。所有计量数据用x±s表示，用t检验法分析，以P<0．05为差异具有统计学意义。
2 结果
肺炎支原体主要通过飞沫传播，患儿发生肺炎支原体感染导致下呼吸道相关疾病临床表现与其年龄密切相关：①若患儿年龄偏大，则疾病早期表现为阵发性干咳，且干咳程度剧烈，可对其睡眠质量造成一定应先个，后期则痰量显著增加，且痰液较黏稠，偶尔可见少量血丝，若患儿病情较重则可能发生喘息情况；②婴幼儿肺炎支原体所致下呼吸道感染疾病临床表现可未具有典型特征，多伴有呼吸困难或喘息现象。有研究显示，肺炎支原体感染除可引起肺部损伤外，还可对患儿肺外系统造成一定损伤，如皮肤黏膜、神经系统、血液系统、心血管系统、泌尿系统、消化系统以及关节和肌肉损害等。IL-6是趋化因子家族中的一员，也是一种分子量为26kD的蛋白质，由184个氨基酸组成。人们最初只发现其在白细胞中合成，并在白细胞间发挥作用而命名。随研究的不断进展，人们逐渐发现，不仅激活的淋巴细胞、单核巨噬细胞可以合成和分泌IL-6，而且骨髓细胞和部分肿瘤细胞等也可以产生IL-6。作为一种机体在免疫应答中产生的重要介质，IL-6具有多种生物学活性。IL-6是一种多效性细胞因子，可以调节多种细胞功能，包括细胞增殖、细胞分化、免疫防御机制及血细胞生成等。IL-8主要生物学活性是吸引和激活中性粒细胞，曾被命名为中性粒细胞激活肽（NAF）、粒细胞趋化肽（GCP）、中性粒细胞激活因子（NAF）等。中性粒细胞与IL-8接触后发生形态变化，定向游走到反应部位并释放一系列活性产物；这些作用可导致机体局部的炎症反应，达到杀菌和细胞损伤的目的[4]。
本研究显示，疗后的IL-6、IL-8浓度明显低于治疗前及对照组，P<0．05，差异具有统计学意义，说明IL-6和IL-8作为一种炎症因子，参与了MPP的炎症反应，这与国内外的相关研究一致。此外，MPP 组治疗后的血清IL-6和IL-8 浓度与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。说明通过一系列的免疫防御清除MP感染后，机体的血清IL-6、IL-8浓度可以进行调节，逐渐恢复到接近正常水平。
综上所述，血清IL-6、IL-8表达在MPP的发生和发展中发挥重要作用，参与了疾病的发生，可能成为诊断对肺炎支原体肺炎的生物学标记物。
参考文献：
[1]刘文彬，赵文利，汤雪琴等.肺炎支原体肺炎IL-2、sIL-2R、IL-6、IL-8检测[J].四川医学，2012，33（9）：1671-1672.
[2]刘文彬，涂冬梅，袁丽等.肺炎支原体肺炎IL-2 sIL-2R IL-6 IL-8动态变化及临床意义[J].西南国防医药，2006，16（1）：32-33.
[3]李国保，李沛.动态监测重症肺炎患者血液和支气管肺泡灌洗液中 IL-6、IL-8、IL-10 的含量及其意义[J].中国实用医药，2009，4（16）：6-8.
[4]贾钦尧，陈绍平，李新胜等.NOD样受体在慢性阻塞性肺疾病中的研究进展[J].国际呼吸杂志，2014，34（23）：1812-1816.
论文作者:赵宗秀
论文发表刊物:《健康世界》2015年21期
论文发表时间:2016/3/3
标签：肺炎论文; 支原体论文; 血清论文; 患儿论文; 浓度论文; 白介素论文; 稀释液论文; 《健康世界》2015年21期论文;