（贵阳中医学院第二附属医院 贵州 贵阳 550001）
【摘要】 目的：采用不同提取方法分析鲜绿茶-蝴蝶的挥发性成分。方法：采用固相微萃取法、水蒸气蒸馏法提取鲜绿茶香气成分，用GC/MS联用仪进行测定，结合Nist2008和Wiley275谱库鉴定各成分，峰面积归一化法测定各成分相对含量。结果：利用两种提取方法共从鲜绿茶中鉴别出90个化合物，其中固相微萃取法得到了52个化合物，而水蒸气蒸馏法得到了38个化合物，但共有的化合物仅为8个。结论：两种提取方法得到的香气成分有明显差异，这为茶叶香气成分的研究提供了科学依据。
【关键词】鲜绿茶；香气成分；固相微萃取法；水蒸气蒸馏法；气质联用
【中图分类号】R284.1 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2017）09-0312-02
绿茶中有挥发性成分260余种，且新的芳香物质还在不断发现与鉴定中。由于茶叶香气含量低微、不稳定，需采用特殊的分离提取技术。因此，选择茶叶香气提取方法十分重要，直接关系到对茶叶香气成分分析结果的好坏[1-3]。
目前在香气物质提取方法中应用较为广泛的有同时蒸馏萃取法(SDE)、项空吸附法HAS)、减压蒸馏法(VDE)、超临界CO2萃取法(SFE)、固相微萃取(SPME)，但各种提取方法各有其优缺点[3]。对香气成分传统提取方法是水蒸气蒸馏法。固相微萃取法（SPME）是80年代末发展起来的样品预处理方法,广泛应用于环境、食品、香料等分析[4]。本研究将SPME和SDE两技术一起用于鲜绿茶-蝴蝶的香气成分研究，结合气相色谱质谱联用对其成分进行分析测定，得到鲜绿茶-蝴蝶较全面的相关香气信息，同时为两种提取技术的进一步应用提供了参考。
1.仪器和材料
1.1 仪器
HP6890/5975C GC/MS联用仪(美国安捷伦公司)。手动固相微萃取装置及萃取纤维头为：2cm～50/30um DVB/CAR/PDMS StableFlex(美国Supelco公司)，水蒸气蒸馏提取装置一套。
1.2 材料
鲜绿茶（品名：蝴蝶，由贵阳乌当高寨茶场提供）
2.实验方法与结果
2.1 香气成分提取
2.1.1水汽蒸馏法 取新鲜绿茶-蝴蝶嫩叶鲜品约50g，加双蒸纯水200ml，用水蒸气蒸馏法提取2.0小时，待冷却后分离正己烷部分，得少量具有茶清香气息的浅黄色油状物，收油率为0.15%。
2.1.2固相微萃取法 取样品约5g，切碎，置于20mL固相微萃取仪采样瓶中，插入装有2cm～50/30um DVB/CAR/PDMS StableFlex纤维头的手动进样器，在85℃左右顶空萃取30min取出，快速移出萃取头并立即插入气相色谱仪进样口(温度250℃)中，热解析3min进样。
2.2 气相色谱-质谱分析
色谱柱为ZB-5MSI 5% Phenyl-95%DiMethylpolysiloxane (30ｍ×0.25mm×0.25μm)弹性石英毛细管柱，柱温45℃（保留2min），以4℃.min-1升温至220℃，保持2min；汽化室温度250℃；不分流进样；溶剂延迟时间：1.5min离子源为EI源；离子源温度230℃；四极杆温度150℃；倍增器电压1206；接口温度280℃；质量范围20～450amu。
2.3 定性定量分析
按上述实验条件进行实验,分别得到两种提取方式的新鲜绿茶-蝴蝶的香气成分总离子流色谱图,见图1和图2。对总离子流图中的各峰经质谱计算机数据系统检索及核对Nist2008和Wiley275标准质谱图，结果见表1和表2。
3.讨论
3.1 随着SPME技术和GC、GC-MS 等高精密仪器的应用和逐渐普及，香气物质提取、组分鉴定的研究有了长足的发展。同时虽然已提出比较完整的香气形成机理，但仍需深入补充完善。
3.2 由于缺少芳香物质纯品标样等原因，对茶叶香气成分含量定量大都是相对含量，定量依据都是建立在峰面积或相对峰面积比值。本实验使用归一化法对鲜绿茶-蝴蝶进行了定量分析，该方法的优点是不必准确知道进样量，更显得方便、准确。
3.3 本实验利用两种提取方法从鲜绿茶-蝴蝶中共鉴别出90个化合物，从固相微萃取法提取物中检测并鉴定了58个化合物，水蒸气蒸馏法提取物种检测并鉴定了32个化合物，其中相同的化合物有8个，分别是相对含量较大的1-己醇、顺-3-己烯-1-醇、顺式芳樟醇氧化物、苯甲醛和苯乙醛。说明由于香气成分富集原理不同，不同提取方法对同一种植物提取所得的成分有显著差异。
3.4 SPME是在较低温度下，利用PDMS非极性萃取头直接顶空、吸附、富集样品。因此，捕集到的物质主要是低沸点的醇类、醛酮类和弱极性的烃类。而SDE则是在100℃、2小时连续加热提取，萃取到的物质主要是除了低沸点的醇类、萜烯类外，还有高沸点的酸类、酯类等，这两种提取方法各具优势，两者互补，可以得到更全面、更完整的信息。
【参考文献】
[1]鲍云霞.中国质检报[J].2007，(6).
[2]李春美.绿茶茶汤香气成分提取方法的比较研究[J]．食品科技，2009，34(10).
[3]叶国注．板栗香型绿茶的化学识别与香型转化研究[D].北京:中国农业科学院, 2009.
[4]李艳清.茶叶香气成分测定方法研究进展[J].茶叶科学技术，2006(1).
基金项目:贵州省优秀科技教育人才省长资金项目黔省专合字（2011）12号
论文作者:梁会,张雪,曹艳
论文发表刊物:《医药前沿》2017年3月第9期
论文发表时间:2017/4/5
标签：香气论文; 成分论文; 绿茶论文; 方法论文; 化合物论文; 水蒸气论文; 蝴蝶论文; 《医药前沿》2017年3月第9期论文;