韩凌[1]2002年在《四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞功能的影响》文中提出四君子汤是中医学“益气健脾”治则和治疗“脾虚证”的经典方和代表方。先前的研究表明：四君子汤对消化系统和免疫系统的功能具有调节作用，“脾虚证”主要表现为消化系统功能的减退和紊乱、免疫功能改变等，四君子汤可部分逆转这些变化。肠道粘膜免疫系统是消化系统和免疫系统的重要组成部分，脾虚的病机和临床表现与肠道粘膜免疫受损的某些病证，如溃疡性结肠炎、炎症性肠病等的表现有相似之处，两者关系密切。多糖是一类具有重要生物活性的物质，具有免疫活性，对肠道粘膜免疫系统功能也有影响。四君子汤中党参、白术、茯苓和甘草均含有丰富的多糖，而且粘膜上皮细胞表面的很多细胞膜分子为糖或糖基化合物，多掂有可能通过与肠道上皮细胞的这些分子相互作用而发挥效应。据此，作者提出的科学假设为：四君子汤总多糖在四君子汤复方药物活性的发挥中起重要作用，它有可能通过对小肠上皮细胞功能的影响而发挥对肠道粘膜吸收和免疫功能的调整作用，目前尚未见有这方面的研究报道。 围绕上述研究目的，本文以大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞为研究对象开展了以下几方面的研究工作，即：四君子汤总多糖及各单味药多糖对IEC-6细胞增殖、细胞迁移、细胞粘附以及对其基因表达谱的影响，主要结果如下： 1．四君子汤总多糖及各单味药多搪对IEC-6细胞增殖的影响 采用MTT法以及细胞计数法表明，四君子汤复方总多糖去蛋白成分PPS以及未去蛋白成分 PS对大鼠小肠卜灾细胞株 1［C－6细胞的生长均具有明显的促进作用，其中去蛋白成分PPS对I［C－6纠l胞数量的增加烂势较未去蛋白成分m为奸，持续观察四君于汤总多糖与门。C－6纠1胞孵有不同时问叶其生长的影响，结果表明PPS不同剂量组于不同的培养时问对KC－6细胞的生长均有促进作用，但以PnS200pg加 与细胞孵行1天和以n‘」m（小g。ml与细胞孵育2天作用足着，提示＊‘x对IEC－6细胞生长的促进作用可能具有一定的时效关系c当采旧消炎痛造成IEC－6细胞生长抑制的模型时，四君于二勿总多糖可使其恢复至小常水平。观察了四君于汤中各单味药多糖及总多糖 X＋I［C－6细胞的增佰的影响，结果表明各多糖的作用存在差异，沃警多糖具有明显的促进细胞上长的作用，h草多搪与党参多糖的作用不显着，而白术多糖则具有明巳的抑制细胞生h的作川c当采用每两味多糖组合时，即以党参加白术，党参加议筝，党参加甘草，白术加伏各，白术加甘草，庆菩加甘草为两两组合，观察组合后的多糖与总多糖的作用差异，结果衣明，所有两两组合的多糖作用强度远个如四君人为总多糖，提示四君子汤总多糖的作用可能是各种单味药多糖综合作用的结果，也提示中药复方用药可能具有一定的合理性。2．四君子汤总多糖及各种单味药多糖对压－6细胞迁移的影响 采用一单面刀片在 6孔细胞培养板中央刮除约 27In。X 10mm面积的细胞，造成细胞损伤后细胞修复和细胞迁移模型。观察四君下汤总多糖对 IEC十细胞迁移的作用。实验结果表明四君于二勿。匕多糖士蛋白成分1个S及未去蛋白成分卜S对IEC－6细胞迁移均具有明显的促进作闺，无沦是在细胞刮除后圳l、，或片Zlhl。时，与干常时照组相比差异均女同着意义；进一少皿架不向剂量I个S 付 uC－6细胞迁移的影响，结果表明四X于汤总多搪以100pgil川－100p9’1ill为促进纠＊ 辽移的最佳剂量；观察四君于汤总多糖在细1地刮除叭持续给药4大（们当于硕防川药）、以及在细胞刮除汕及刮除R体续用药（怕当十颅防爿。治疗用药）对1【－6细胞修臭迁移的影响，都具有明显的促进受损细胞迁移的作用。提示四君于汤何可能通过某些讥制影响小肠上皮细胞的迁移活动，从而激活上皮细胞的功能。 四君了汤中各单味药多糖｛I EC－6细胞的迁移作用存在差异。细胞刮除当时给药可见党参多糖、付草多糖村1n－6细胞的迁移只有促进作用，白术多糖对细胞迁移无明显影啊，侠学多糖则松见出明显的抑制细胞迁移的作用；细胞刮除汕持续给药I天可见党参多糖与付草多糖仍保持促进细胞迁移的作用，而白术多糖与获菩多糖则表现出轻微的抑制细胞迁移的作用，但二肯的起效时问不同，白术多糖主要为细胞刮除后24小时出现抑制作用，而沃多多糖则在细胞刮除后8 ’h 互且时出现抑制作用。与各单味药多糖用比，四君于汤总多糖无论在细胞刮除即时给药，或者于细胞刮除的持续给药，对大鼠1r－6的细胞迁移作用都具有明显的优势，实验结果表明四君于汤总多糖的作用明显忧于各单味药多糖。：Z．四君于汤总多糖对N工－6细胞粘附功能的影呐 门工－6细胞接种于6孔袄L，1＆人换培养液 次，－于细胞栓种后第5人进汀消化计数，再次离心后，细胞以对照组培养液，含DF＊）的培养液，以及含DF＼10＋四君子汤总多糖的培养液重悬，调整细胞密度到 SX 10‘／’d。这些细胞悬液在培养箱中放置一定时问后接种到6孔培养板卜，在规定的时问采用倒置显微镜上装有的数码相机进行拍摄，观粱阶＼们及四君于汤总
涂小华[2]2016年在《四君子汤多糖对IEC-6细胞迁移多胺信号通路钙离子调控影响的研究》文中研究指明研究背景胃肠黏膜损伤是多种胃肠道疾病的病理基础之一,而胃肠粘膜有自身修复能力,该修复过程包括细胞迁移、细胞增殖、细胞凋亡、粘膜重建等多个环节。早期粘膜损伤快速修复是上皮细胞迁移并覆盖损伤区域的过程,该过程受多种因素调节,如多胺、叁叶草蛋白、生长因子、黏蛋白、前列腺素等。在小肠上皮细胞(IEC-6)的研究表明,多胺信号通路是上皮细胞迁移的重要调控因素；在小肠上皮细胞迁移过程,多胺、钾通道蛋白、细胞膜电位等钙离子(Ca2+)调控的上游指标可增加Ca2+内流驱动力,以提高胞内游离钙离子浓度([Ca2+]cyt)而促进细胞迁移；胞内钙库调节指标如磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)、(1,4,5)-叁磷酸肌醇(IP3),钙通道蛋白如瞬时受体电位通道蛋白-1(TRPC1)等调控了[Caz+]cyt;Ca2+又作用于下游靶点如Rho GTPase、细胞骨架蛋白myosinⅡ等而促进细胞迁移；Ca2+调控是上皮细胞迁移过程多胺信号通路的关键因素。脾虚患者可见胃肠粘膜损伤的病理改变,益气健脾是脾虚证的主要治则,益气健脾代表方剂四君子汤有防治胃肠粘膜损伤的作用。本课题组前期研究表明,益气健脾中药黄芪、白术、党参、甘草的提取物(如糖提取物、黄酮提取物等)可促进IEC-6细胞迁移,作用机制与其影响多胺信号通路有关,多糖组分是益气健脾中药促进细胞迁移的药效成分之一。研究目的观察四君子汤多糖对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移多胺信号通路Ca2+调控的影响,探讨益气健脾代表方剂四君子汤促进胃肠粘膜损伤修复的作用机制,为其治疗胃肠粘膜损伤病变的疗效机制研究提供科学依据。研究方法(1)四君子汤多糖提取分离纯化：四君子汤经水提醇沉、sevag法去蛋白、DEAE-52纤维素柱层析,分别得到四君子汤总多糖、粗多糖、纯化多糖；苯酚-硫酸法检测3种多糖样品的多糖含量；HPLC法对四君子汤纯化多糖进行纯度分析。(2)受试药筛选及剂量确定：在IEC-6细胞迁移模型下观察四君子汤总多糖、粗多糖、纯化多糖对细胞迁移的影响,筛选出细胞迁移药效较好的多糖样品为本研究受试药。细胞实验设正常对照组,阳性对照药精脒组(5μmol·L-1),四君子汤多糖40、80、160mg·L-1组(4-AP负荷实验设四君子汤多糖20、40、80 mg·L-1组)；DFMO或4-AP负荷实验设正常对照组,DFMO或4-AP模型组,精脒组和受试药组同时加入DFMO或4-AP。(3)细胞迁移实验：细胞划痕损伤法造细胞迁移模型,相差倒置显微镜观察细胞迁移情况。(4)柱前衍生HPLC法测定细胞内多胺(精脒和精胺)含量。(5)RT-qPCR法检测Kv1.1、PLC-γ1、TRPC1 mRNA表达。(6)Western Blot法检测Kv1.1、PLC-γ1、TRPC1、RhoA、Rac1、Cdc42蛋白表达。(7)流式细胞仪检测细胞膜电位、[Ca2+]cyt。(8)酶联免疫法检测IP3含量。(9)Pulldown assay法检测GTP-RhoA、GTP-Rac1、GTP-Cdc42蛋白表达。(10)免疫荧光法检测myosinⅡ蛋白表达。研究结果(1)四君子汤多糖提取分离纯化及药效追踪结果：①四君子汤总多糖、粗多糖、纯化多糖的得率分别为5.42%、4.19%、2.44%；②四君子汤总多糖、粗多糖、纯化多糖的多糖含量分别为67.9%、72.4%、81.6%。③药效追踪结果提示四君子汤3种多糖样品均能促进细胞迁移；因四君子汤纯化多糖药效最佳,故确定其为本研究后续实验受试药,实验剂量设为20 mg· L-1～160 mg· L-1,有效剂量40 mg·L-1～160 mg·L-1。(2)四君子汤多糖对细胞迁移的影响：能促进细胞迁移,逆转DFMO(多胺合成抑制剂)负荷所致的细胞迁移抑制；提示四君子汤多糖促进细胞迁移的作用与影响多胺有关。(3)四君子汤多糖对细胞迁移多胺信号通路Ca2+调控上游指标的影响：①能提高细胞内多胺(精脒、精胺)含量,可逆转DFMO所致的细胞内多胺(精脒、精胺)含量降低。②能提高钾通道蛋白Kv1.1 mRNA和蛋白表达,可逆转DFMO负荷所致Kvl.1mRNA和蛋白表达抑制；③可逆转4-AP(钾通道蛋白抑制剂)负荷所致的细胞迁移、Kv1.1 mRNA和蛋白表达抑制；④能提高细胞膜电位以增加细胞膜电位超极化,可逆转DFMO所致的细胞膜电位去极化。提示四君子汤多糖可通过提高细胞多胺含量、激活钾通道、增加细胞膜电位超极化,从而提高Ca2+内流驱动力。(4)四君子汤多糖对细胞迁移多胺信号通路Ca2+调控的影响：①能增加细胞内[Ca2+]cyt,可逆转DFMO所致的[Ca2+]cyt降低；②能提高钙通道蛋白TPRC1 mRNA和蛋白表达,能逆转DFMO所致的TPRC1 mRNA和蛋白表达抑制；③能提高胞内钙库动员指标PLC-γ1 mRNA和蛋白表达以及IP3含量,可逆转DFMO所致的PLC-γ1 mRNA和蛋白表达抑制以及IP。含量降低；④若使用无Ca2+培养液以去除细胞外Ca2+,则不但空白对照组出现显着的细胞迁移抑制,且四君子汤多糖促进细胞迁移的作用也明显弱于使用含Ca2+培养液时。提示四君子汤多糖可通过促进Ca2+内流和胞内钙库动员两途径以增加[Ca2+]cyt,又以前者作用更明显。(5)四君子汤多糖对细胞迁移多胺信号通路Ca2+调控下游靶点的影响：①不但能提高Rho GTPase(RhoA、Rac1、Cdc42)总蛋白表达,逆转DFMO负荷所致的RhoA. Rac1、Cdc42总蛋白表达抑制；还能提高Rho GTPase激活形式的GTP-RhoA、GTP-Rac1、 GTP-Cdc42蛋白表达；②能提高细胞骨架myosinⅡ蛋白表达,逆转DFMO所致的myosinⅡ蛋白表达抑制。提示四君子汤多糖可通过作用于Ca2+下游指标如Rho GTPase和myosinⅡ以影响细胞骨架重排而促进细胞迁移。研究结论四君子汤多糖可通过作用于多胺信号通路而促进IEC-6细胞迁移,钙离子调控是其关键指标之一；多糖组分是四君子汤促进小肠上皮细胞迁移的主要药效成分之一；研究结果为探讨四君子汤胃肠粘膜保护机制提供了参考。
韩凌, 王培训, 韩冰[3]2005年在《四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的影响》文中进行了进一步梳理目的:研究四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的影响。方法:以IEC-6细胞为研究对象,采 用MTT比色法,观察四君子汤总多糖时正常及消炎痛作用下该细胞增殖的影响。结果:四君子汤总多糖不同剂量于不同 的培养时间对IEC-6细胞的生长均有促进作用,当采用消炎痛造成IEC-6细胞生长抑制模型时,四君子汤总多糖可使其 恢复至正常水平。结论:四君子汤总多糖具有促进IEC-6细胞增殖的作用,它可能通过对小肠上皮细胞增殖的影响而发 挥对肠道黏膜吸收和免疫功能的调整作用。
韩凌, 王培训, 刘良, 危建安, 孙静[4]2006年在《四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6基因表达谱影响的研究》文中研究表明目的:本研究主要观察四君子汤总多糖(TPSJ)对大鼠小肠上皮细胞株基因表达谱的影响,以期进一步了解四君子汤总多糖的作用机制。方法:采用基因芯片技术观察给予四君子汤总多糖前后大鼠小肠上皮细胞株IEC-6基因表达谱的变化情况。结果:在给予TPSJ后,大鼠 IEC-6细胞株共有123条基因表达出现明显差异,其中55条基因表达上调,68条基因表达下调, 分别涉及包括细胞发育、细胞生长增殖、粘附以及信号转导和免疫应答等方面的基因。结论:TPSJ 可通过多种途径影响小肠上皮细胞功能,从而有可能通过对小肠上皮细胞的调节作用而实现对全身的免疫调节。
韩凌, 王培训, 刘良, 危建安, 孙静[5]2006年在《四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6迁移的影响》文中研究指明目的:观察四君子汤总多糖(PPS)在黏膜损伤后对小肠上皮细胞修复的影响。方法:采用大鼠小肠上皮细胞株IEC-6制成细胞迁移模型,观察四君子汤PPS在造模后0 h8、h及24 h对细胞迁移面积的影响。结果:四君子汤在细胞迁移的8 h及24 h,对IEC-6的细胞迁移均有促进作用。而其最佳剂量集中于100~400μg/ml范围内。结论:四君子汤可促进胃肠道黏膜损伤的修复,其机制与促进细胞迁移有关。
韩凌, 王培训, 韩冰[6]2005年在《四君子汤总多糖及各单味药多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞增殖的影响》文中研究指明目的研究四君子汤总多糖及各单味药多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞增殖的影响。方法以IEC-6细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,观察四君子汤总多糖及各单味药多糖对该细胞增殖的影响。结果各多糖的作用存在差异,茯苓多糖具有明显的促进细胞生长的作用,甘草多糖与党参多糖作用不显着,而白术多糖则具有明显的抑制细胞生长的作用。当采用每两味多糖组合时,结果表明所有两组多糖作用强度远不如四君子汤总多糖。结论四君子汤总多糖的作用可能是各种单味药多糖综合作用的结果,也提示中药复方用药具有一定的合理性。
年立全[7]2013年在《益气健脾中药提取物对大鼠应激性溃疡及多胺影响的研究》文中进行了进一步梳理研究背景胃肠道不仅是人体消化系统的一部分,也是人体的一道保护屏障,临床研究发现,许多疾病在发病过程中都与胃肠黏膜屏障上皮完整性的损伤有关。胃肠黏膜损伤后上皮细胞有自身修复的能力,一是快速修复,一般在损伤后数秒或数分钟开始,主要通过细胞的快速迁移以覆盖损伤部位,重建黏膜的完整性；肠上皮细胞迁移与多胺调控信号通路密切相关；快速修复是胃肠黏膜损伤恢复早期的主要动力,是防止更深层黏膜损伤的初始反应,也是后续细胞增殖等修复过程的刺激源。中医“脾主运化”理论,“脾为气血生化之源”,“脾旺四季不受邪”等与胃肠黏膜功能相关。益气健脾方药对脾虚证胃肠黏膜损伤有修复作用,因此探讨益气健脾方药胃肠黏膜损伤修复作用机制有重要意义。研究目的观察四君子汤水提液以及黄芪、白术、党参、甘草糖提取物对水浸-束缚应激性溃疡大鼠胃肠黏膜损伤的影响,检测胃黏膜和小肠黏膜中多胺(精脒)含量变化,探讨益气健脾方药胃肠黏膜损伤修复的作用机制。研究方法1、四君子汤药液以水提法得到；黄芪、白术、党参、甘草糖提取物由水提醇沉溶液冷冻干燥得到,紫外分光光度计以苯酚-硫酸法测定糖含量(以葡萄糖计),高效液相色谱仪紫外(UV)检测器和示差折光(RI)检测器分析糖提取物图谱。2、应激性溃疡实验：大鼠水浸-束缚造模前30min,分别灌胃四君子汤水提液,黄芪、白术、党参、甘草糖提取物及阳性对照药,19±1℃水温下水浸-束缚6h后处死动物,计算胃黏膜溃疡指数；柱前衍生高效液相色谱法测定胃黏膜和小肠黏膜精脒含量。研究结果1、黄芪、白术、党参、甘草分别水提醇沉并冷冻干燥后,得到糖提取物干粉,得率分别为：6.65%、2.34%、2.44%、6.52%；糖含量(以葡萄糖计)分别为：73.75%、39.86%、47.92%、69.93%；并在高效液相色谱仪得到各糖提取物的紫外、示差分析图谱。四君子汤水提液冷冻干燥得到四君子汤干粉,得率为25.52%。2、各受试药对大鼠应激性溃疡胃黏膜损伤的影响：四君子汤水提物(12g、6g/kg)、黄芪糖提取物(2g、1g/kg)、白术糖提取物(2g、1g/kg)、党参糖提取物(1.2g、0.6g/kg)、甘草糖提取物(1.2g、0.6g/kg),均能降低应激性溃疡胃黏膜损伤指数,与蒸馏水对照组比较P<0.01。3、各受试药对大鼠应激性溃疡胃黏膜多胺(精脒)含量的影响：四君子汤水提物(12g、6g/kg)、黄芪糖提取物(2g、1g/kg)、白术糖提取物(1g/kg)、党参糖提取物(1.2g、0.6g/kg)、甘草糖提取物(1.2g、0.6g/kg),能提高胃黏膜精脒含量,与蒸馏水对照组比较P<0.05或P<0.01。4、各受试药对大鼠应激性溃疡小肠黏膜多胺(精脒)含量的影响：四君子汤水提物(12g、6g/kg)、黄芪糖提取物(2g、1g/kg)、白术糖提取物(2g、lg/kg)、党参糖提取物(1.2g、0.6g/kg)、甘草糖提取物(1.2g、0.6g/kg),能提高小肠黏膜精脒含量,与蒸馏水对照组比较P<0.05或P<0.01。研究结论四君子汤水提物以及黄芪、白术、党参、甘草糖提取物有防治应激性溃疡胃黏膜损伤的作用,其机制可能与其提高胃肠黏膜多胺(精脒)含量有关。
韩凌, 王培训, 危建安, 孙静, 周丹[8]2006年在《四君子汤总多糖及单味药多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞迁移作用的比较研究》文中研究指明目的:研究四君子汤总多糖及各单味药多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞研究迁移的影响。方法:以IEC-6细胞为研究对象,采用体外细胞迁移模型,观察四君子汤总糖及各单味多糖对该细胞迁移的影响。结果:各多糖作用存在差异,茯苓多糖具有明显抑制细胞迁移的作用,白术多糖作用不显着,甘草多糖和党参多糖具有明显促进细胞迁移的作用。当各单味药多糖与总多糖相比时,总多糖的效用优于各单味药多糖。结论:四君子汤总多糖的作用可能是各单味药多糖综合作用的结果,也提示中药复方用药具有一定的合理性。
高蓓蓓, 彭颖, 李晓波[9]2018年在《四君子汤复方多糖肠道免疫调节作用及其机制研究进展》文中研究指明四君子汤复方多糖是四君子汤中含量最多的成分,具有肠道免疫调节作用。研究证实其在小肠派式结、肠系膜淋巴结、小肠上皮细胞及肠上皮内淋巴细胞等部位均能产生免疫应答,但作用机制不明。目前主要认为四君子汤复方多糖可以通过调节肠道菌群和多胺信号通路等发挥肠道免疫作用。总结近年四君子汤复方多糖对肠道免疫调节作用及其机制的相关研究进展,为深入探究四君子汤复方多糖的免疫作用机制及其临床的合理应用提供参考。
韩凌, 王培训, 危建安, 孙静, 周丹[10]2006年在《四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的作用(英文)》文中研究说明背景:一些实验证明多糖在感染、炎症、细胞间黏附和信号传导、免疫识别、细胞增殖分化及维持细胞正常结构和功能生理、病理等方面均起重要作用。但植物多糖对胃肠道黏膜的保护作用有待进一步研究。目的:观察不同浓度的四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的影响。设计:观察对比实验。单位:广东省中医院中心实验室。材料:①细胞株:正常大鼠小肠上皮细胞株IEC-6(ATCCCatalogNo.RL-1592)由美国ATCC(AmericanTypeCultureCollection)购得,主要来源于小肠隐窝细胞。②试剂和药品:DMEM培养基,牛胰岛素,庆大霉素,胎牛血清,DPBS均为GIBCO公司产品;细胞增殖试剂盒(MTT)为Roche公司产品;消炎痛为Sigma公司产品。四君子汤总多糖按药典处方比例取党参,白术,茯苓和甘草适量,加水浸泡后,煮沸提取4h,重复1次,合并提取液,减压浓缩,高速离心除去不溶物,提取液置玻璃纸中逆向流水透析2h,再于提取液中加乙醇至浓度约80%,保存过夜后分取沉淀,合并所有沉淀,采用Sevag法除去粗多糖中的蛋白,冻干后得到的总多糖。方法:①将IEC-6细胞株于干冰中取出,迅速放入37℃水浴中解冻后,加入已装有DMEM培养液的T-150培养瓶后放入CO2培养箱中,于37℃,饱和湿度,体积分数为0.05的CO2环境下培养。细胞隔天换液1次,每5～7天进行传代,传代比例为1∶7。第15～20代细胞用于实验。②IEC-6细胞以1×104/孔的浓度接种于96孔细胞培养板上,接种后6h,各培养孔内依次加入浓度为50,100,200mg/L四君子汤总多糖,即为四君子汤总多糖3个剂量组。每天定时取出1板,按试剂盒说明书以MTT法进行细胞增殖检测。以未加任何干预措施的IEC-细胞作为正常对照组,在相应时间点以MTT法进行细胞增殖检测。③将IEC-6细胞按1×104/孔的浓度接种于96孔细胞培养板中,接种后次日更换以无血清培养液DMEM,24小时后,各培养板中分别加入消炎痛以及四君子汤总多糖,其中,消炎痛使用浓度为40mmol/L,即为消炎痛组。四君子汤总多糖使用3个剂量分别为50,100,200mg/L,即为四君子汤总多糖50,100,200mg/L组。药物作用20h后,按试剂盒使用说明书进行MTT法细胞增殖检测。以未加任何干预措施的IEC-细胞作为正常对照组,在各相应时间点以MTT法进行细胞增殖检测。主要观察指标:MTT法测定四君子汤总多糖不同作用时间对IEC-6细胞生长的影响结果;MTT法测定四君子汤总多糖对消炎痛所致的IEC-6细胞生长抑制的影响结果。结果:四君子汤总多糖不同剂量于不同的培养时间对IEC-6细胞的生长均有促进作用;IEC-6细胞在给予消炎痛40mmol/L作用24h后,细胞增殖的吸光度明显低于正常对照组(0.17±0.02,0.31±0.03;P<0.01)。当四君子汤总多糖使用浓度为100mg/L时,IEC-6细胞的吸光度明显高于消炎痛组(0.25±0.04,0.17±0.02;P<0.01),虽然未达到正常IEC-6细胞吸光度的水平,但与正常组无明显差异(P>0.05)。结论:四君子汤总糖具有促进IEC-6细胞增殖的作用,它可能通过对小肠上皮细胞增殖的影响而发挥对肠道黏膜吸收和免疫功能的调整作用。
参考文献：
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[5]. 四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6迁移的影响[J]. 韩凌, 王培训, 刘良, 危建安, 孙静. 山东中医杂志. 2006
[6]. 四君子汤总多糖及各单味药多糖对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞增殖的影响[J]. 韩凌, 王培训, 韩冰. 中国药物与临床. 2005
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[9]. 四君子汤复方多糖肠道免疫调节作用及其机制研究进展[J]. 高蓓蓓, 彭颖, 李晓波. 中草药. 2018
[10]. 四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的作用(英文)[J]. 韩凌, 王培训, 危建安, 孙静, 周丹. 中国临床康复. 2006
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