黑龙江省红十字总医院 黑龙江 哈尔滨 150040
摘要：目的：比较化学发光免疫分析技术（CLIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）在乙肝病毒血清学检验中的应用价值。方法：选取2017年10月-2018年12月期间我院收治的60例疑似乙型肝炎患者为研究对象，采用CLIA法、ELISA法对乙肝病毒血清学指标进行检测，以实时荧光定量PCR检验结果作为参照，分析CLIA法、ELISA法对乙肝的诊断结果。结果：ELISA法和CLIA法对乙肝的诊断灵敏度、特异度、准确性比较均无统计学差异（P均>0.05）。CLIA法、ELISA法对乙肝的诊断结果与实时荧光定量PCR之间具有良好一致性，Kappa均>0.7。CLIA法对HBsAg、HBeAg、HBeAb的阳性检出率高于ELISA法（P<0.05），差异具有统计学意义，而在 HBsAb、HBcAb阳性检出率比较无统计学差异（P>0.05）。结论：CLIA法、ELISA法对乙型肝炎的诊断效果均较好，而在乙肝病毒血清学标志物检验中，CLIA法的检验准确性高于ELISA法。
关键词：化学发光免疫分析技术；酶联免疫吸附试验；乙肝病毒血清学检验。
The value of chemiluminescence immunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay in the serological test of hepatitis b virus
Abstract: objective: to compare the value of chemiluminescence immunoassay (CLIA) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in the serological test of hepatitis b virus.Methods: 60 suspected hepatitis b patients admitted to our hospital from October 2017 to December 2018 were selected as research objects. The serum indexes of hepatitis b virus were detected by CLIA method and ELISA method. The real-time fluorescence quantitative PCR test results were used as reference to analyze the diagnosis results of hepatitis b by CLIA method and ELISA method.Results: there was no statistical difference in the sensitivity, specificity and accuracy of ELISA and CLIA in the diagnosis of hepatitis b (both P were >0.05).The diagnostic results of hepatitis b by CLIA and ELISA showed a good consistency with the real-time fluorescence quantitative PCR, Kappa was >, 0.7.The positive detection rate of HBsAg, HBeAg and HBeAb by CLIA method was higher than that by ELISA method (P<0.05), and the difference was statistically significant, while there was no statistical difference in the positive detection rate of HBsAb and HBcAb (P>0.05).Conclusion: CLIA and ELISA have better diagnostic effect on hepatitis b, and CLIA is more accurate than ELISA in the detection of serum markers of hepatitis b virus.
Key words: chemiluminescence immunoassay;Enzyme-linked immunosorbent assay;Serological test for hepatitis b virus.
前言：乙型病毒性肝炎（简称乙肝）系由乙肝病毒（HBV）引起，以乏力、食欲减退、恶心、呕吐、厌油、肝大及肝功能异常为主要临床表现。部分病例有发热和黄疸；少数病例病程迁延转为慢性，或发展为肝硬化甚至肝癌；重者病情进展迅猛可发展为重型肝炎[1]。乙型肝炎属全球流行性病毒感染性疾病，尤其在国内部分地区发病率较高。乙型肝炎会随着病症发展进而增加患者肝硬化、肝细胞癌等恶性疾病发病率，同时目前临床中对于该病的治疗尚无特效药物或疗法，导致乙型肝炎对患者、家庭、社会等产生沉重负担。对此如何在乙型肝炎病发初期明确诊断成为当前临床中较为关注的问题，当前临床中主要通过免疫学方面结合乙型肝炎血清标志物进行检测诊断。本文通过分析CLIA、ELISA两种方式在乙肝病毒血清的检验结果分析其方式诊断乙型肝炎的应用价值，现将报告如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
选取2018年1月-2019年1月期间我院收治的60例疑似乙型肝炎患者为研究对象，所有患者均符合《病毒性肝炎防治方案》诊断标准。其中，男32例，女28例；年龄16-60岁，平均年龄（45.8±2.4）岁。
1.2方法
所有患者均接受采血，采用CLIA、ELISA这两种检验方法对乙肝病毒血清学指标进行检测。于患者清晨空腹状态下，采集其肘部静脉血液5mL作为检验样本，在4℃环境下对其进行离心处理，每分钟转速为3000r，持续离心10min后，取上层清液待检[2]。先进行ELISA检验，将ELISA试剂与微孔反应条在室温下放置30min，将待测血清样本加入至微孔反应条中，采用封片对其进行封锁处理，放置于37℃水浴箱中持续60min后取出，将微孔反应条中液体去除，反复洗涤5次，再在反应条中加入试剂，封锁，放置于37℃水浴箱中持续30min后取出，加入终止液。如所测得的血清值≥临界值（2×标准差+阴性样品平均A值），即可判定检测结果为阳性。再进行CLIA检验，将待测血清样本加入至已包被HBV核心抗原的聚苯乙烯试管中，采用100μL辣根过氧化酶进行标记，在37℃环境下持续放置2h，再采用PBS缓冲液反复冲洗3次，每次持续冲洗3min，再加入100μL氢氧化钠（0.1mol/L）、100μL鲁米诺（30mol/L），在室温下静置10min，再加入100μL浓度为3%的过氧化氢，采用发光仪对其发光强度进行测定。再取血清样本进行实时荧光定量PCR检验，采用实时荧光分析仪进行测定，试剂为配套试剂，按照试剂盒说明书进行操作。
2.结果
ELISA法和CLIA法对乙肝的诊断灵敏度、特异度、准确性比较均无统计学差异（P均>0.05）。CLIA法、ELISA法对乙肝的诊断结果与实时荧光定量PCR之间具有良好一致性，Kappa均>0.7。CLIA法对HBsAg、HBeAg、HBeAb的阳性检出率高于ELISA法（P<0.05），差异具有统计学意义，而在 HBsAb、HBcAb阳性检出率比较无统计学差异（P>0.05），具体见下表1所示。
3.讨论
目前针对乙肝患者，常用的检测方法主要为酶联免疫吸附试验，其属于传统诊断方法，特点在于价格低廉、简便快速，因此在检测HBsAg方面获得了广泛应用。但其缺陷在于只能进行定性分析，且当待测标准中具有较高浓度的物质时，其出现假阴性的几率相对较大。同时由于不同生产厂家提供的抗体、抗原试剂差异较大，因而发生现假阴性的几率更大[3]。而化学发光免疫分析技术是一种采用生物素—亲和素技术，由电化学在电极表面引发的特异性化学发光反应。此种技术采用受电磁铁控制的顺磁性微粒作为载体，其能促使整个检测过程中更加标准化、自动化，同时能进行精确的定量、定性分析，并且能有效减少人工操作造成的各种误差，还能有效减少批内、批间的误差。对于复合抗体与游离抗体的分离，电磁铁的电磁快速消失性也能起到积极的促进作用，即促进两者分离，这样既提高了化学发光免疫分析技术检测的特异性，同时降低了假阴性检测结果。
综上所述，CLIA法、ELISA法对乙型肝炎的诊断效果均较好，而在乙肝病毒血清学标志物检验中，CLIA法的检验准确性高于ELISA法。
参考文献：
[1]辛晓阳,徐立群,潘峰. 化学发光免疫分析技术和酶联免疫吸附试验在乙肝病毒血清学检验中的价值分析[J]. 中国现代医生,2018,56(10):127-130.
[2]吴晓红,宋劲军. 化学发光免疫分析技术(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)在乙肝病毒血清学检验中的应用价值[J]. 兵团医学,2018(02):23-24.
[3]黄怿箐. 化学发光免疫分析技术和酶联免疫吸附试验在乙肝病毒血清学检验中的应用分析[J]. 基层医学论坛,2017,21(23):3102-3103.
论文作者:于威
论文发表刊物:《健康世界》2019年第08期
论文发表时间:2019/9/5
标签：血清学论文; 乙型肝炎论文; 免疫论文; 乙肝病毒论文; 血清论文; 统计学论文; 化学论文; 《健康世界》2019年第08期论文;