周春华 白冰 徐建 高丽娟 常红
（吉林修正药业新药开发有限公司，吉林，长春，通药制药集团股份有限公司，吉林，通化，）
（吉林省中药标准化关键工程技术重点实验室）
（吉林省科技发展计划重点科技成果转化项目 编号：20130303091YY）
【摘要】： 目的：完善咽炎片的质量标准。方法：采用薄层色谱法分别对咽炎片中的玄参、款冬花、木蝴蝶进行鉴别研究。结果：供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的
位置上显相同颜色的斑点，斑点清晰，分离度好。 结论：方法简单，准确，专属性强，重现性好，可用于咽炎片的质量控制。
【关键词】： 薄层色谱法；咽炎片；玄参；款冬花；木蝴蝶
咽炎片主要由玄参、百部、牡丹皮、款冬花、木蝴蝶等十二味中药组成，具有养阴润肺， 清热解毒，清利咽喉，镇咳止痒之功效，用于慢性咽炎引起的咽干，咽痒，刺激性咳嗽等症。
咽炎片处方中药味较多，成分复杂，参照现有方法进行玄参、款冬花、木蝴蝶的薄层鉴别，由于供试品纯化方法简单，杂质较多，薄层层析分离效果不佳，方法重现性差。本文通过方法摸索，条件优化，改进了以上三味药材薄层鉴别方法，具体研究总结如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器
YOKO-ZS 紫外分析摄影仪； YOKO-BD 薄层电动点样仪， 武汉药科新技术开发公司。
1.2 试药
试剂：正丁醇、乙醇、乙醚、乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸、香草醛、硫酸、三氯化铝、甲醇、丁酮、三氯化铁、氨水等均为分析纯。
对照品及对照药材：玄参对照药材（批号：12008-201208 ）；款冬花对照药材（批号：121449-201002）芦丁对照品（批号：100080-201307）；黄芩苷对照品（批号：110715-201117）；哈巴俄苷（批号：111730-201307）；均从中国食品药品检定研究院购入。
样品：通药制药集团股份有限公司（ 批号：150601、150602、150603）
2 薄层色谱鉴别
2.1玄参薄层色谱鉴别
取本品15片，研细，加水饱和正丁醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次50ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1.3cm，柱高14cm），以30%乙醇50ml洗脱，弃去30%乙醇洗脱液，再用50%乙醇60ml洗脱，收集50%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取玄参阴性对照样品，同法制成阴性样品溶液。再取玄参对照药材1.0g，加水40ml，煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至干，自“加水饱和正丁醇50ml”起，同法制成对照药材溶液。再取哈巴俄苷对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述四种溶液各10?l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2)为展开剂，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液至斑点显红色。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰，此方法专属性强。结果见图1。
2.2款冬花薄层色谱鉴别
取款冬花对照药材1.0g，照2.1鉴别项下的供试品溶液制备方法制备对照药材溶液。另取款冬花阴性样品，同法制成阴性样品溶液。再取芦丁对照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取玄参项下的供试品溶液、阴性对照样品溶液、对照药材溶液及对照品溶液各5?l，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以正丁醇-冰醋酸-水（4:0.5:5）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰，此方法专属性强。结果见图2。
2.3木蝴蝶薄层色谱鉴别
取本品15片，研细，加甲醇50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1.3cm，柱高14cm），加浓氨试液3ml，用水200ml洗脱，弃去水洗液，再用75%乙醇50ml洗脱，收集75%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取木蝴蝶阴性样品，同法制成阴性对照样品溶液，再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各5～10?l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5:3:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰，此方法专属性强。结果见图3。
3 讨论
在玄参薄层鉴别研究过程中，采用正丁醇超声提取，水洗除杂后通过D101大孔树脂柱吸附的方法进行分离、纯化，再分别以三氯甲烷-甲醇-水(12:4:1)的下层溶液和乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2)为展开剂进行试验，结果以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2)为展开剂所测样品分离效果好，Rf值适中，斑点清晰，故选择该展开剂作为玄参鉴别的展开剂。
在款冬花薄层鉴别研究中，分别采用甲醇超声提取，通过中性氧化铝柱纯化和正丁醇超声提取，用水洗脱后通过D101大孔树脂柱纯化两种方法试验，结果第一种方法斑点不清晰，分离效果差。第二种方法分离效果好，专属性强，故采用第二种方法作为款冬花的薄层鉴别方法。另外在研究中发现，当样品的浓度较低时，在喷以5%三氯化铝显色后样品未出现斑点，当在105℃加热1分钟后，斑点显色清晰，故当样品含量较低时，可进行105℃加热显色。
在木蝴蝶薄层鉴别研究中，采用以乙醚除杂后甲醇超声提取和采用甲醇超声提取，通过D101大孔树脂柱纯化两种方法试验，结果方法一样品斑点不清晰，样品分离效果差。方法二样品斑点清晰，分离效果好，专属性强。故选择方法二作为木蝴蝶薄层鉴别方法。
[1]国家药典委员会. 中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010：60.
[2]曾赟昀, 彭中芳.紫雪颗粒中甘草、玄参的薄层鉴别[J].中药与天然药物, 2008,18(2).
论文作者:周春华 白冰 徐建 高丽娟 常红
论文发表刊物:《医师在线》2015年12月第24期供稿
论文发表时间:2016/4/22
标签：薄层论文; 溶液论文; 玄参论文; 款冬花论文; 色谱论文; 样品论文; 斑点论文; 《医师在线》2015年12月第24期供稿论文;