华北理工大学公共卫生学院 063009
摘要：目的：探究T细胞斑点实验（T-spot.TB）在诊断肺结核的价值。方法：选取2015年9月～2017年9月在我院收入拟诊肺结核的165例，分成结核病组（95人）和非结核病组（70人），同时选出70例健康的医务工作者做对照组。计量T细胞斑点数，比较T-spot.TB的阳性比率以及对于诊断肺结核灵敏度和特异性的影响。结果：结核病组IL-10的表达高于非结核病组和正常组。结核病组T-spot.TB的阳性数值多于非结核病组和正常组（P＜0.05），非结核病组和正常组的T-spot.TB的阳性数值没有统计学差别；IL-10表达对于结核病的判别特异性较高（84.1%）；T-spot.TB对于结核病的判别敏感性较高（83.3%），采用两者联合检测敏感性最高（90.7%和91.2%）。结论：应用T-spot.TB技术可以明显提升结核病诊断的准确性，对于之后进行结核病的医治具有指导价值，值得推广应用。
关键词：肺结核；T细胞斑点实验；应用价值
肺结核在全球范围内病发几率和复发几率较高，而且被感染人群的数目一直有所增加，其中我们国家是此类病症高发的国家之一。随新的医疗形式的发展，人们越发关注结核病症的危害，不论是人力还是财力的危害，因而，找到医治及防治的最佳方法成为当前医疗卫生行业需要解决的一大难题。当前，在临床上诊断结核病的标准依然是用痰培养结核分枝杆菌为阳性的方法，可是由于结核杆菌长势较慢，培养消耗时间长进而对于在临床上肺结核病人的初期诊断和医治[1-2]。之前临床上经常使用测定方法有痰涂片验菌、PCR测定核算DNA、影像病理学检测，但是灵敏度、检测几率不高，不能达到临床上的要求。因而找出方遍简洁的诊疗方式会有十分必要的意义。近几年来，T细胞斑点实验（T-spot.TB）是诊断结核病的一类新的方法，具体为测定结核菌初期产生的特异性抗原（ESAT-6）和 IFN-γ。IFN-γ是由Th1、生成的典型的生物分子，在肺结核的诱发及病理进程中起到关键性的作用[3-4]。IL-10是由Th2产生的生物因子，与受体结合之后诱发促炎症因子，生化因子，抑菌肽和组织重建蛋白的产生，是连接自身免疫和适应性免疫的介质。本文旨在探究T细胞斑点实验在诊断肺结核的影响，对于之后进行结核病的医治提供指导依据。
1.对象和方法
1.1.1病例组的选择及分组
本文选择了2015年9月～2017年9月收入的拟诊肺结核的165例，分成结核病组（95人）和非结核病组（70人），同时选出70例健康的医务工作者做对照组。每组把年龄、性别各自匹配做对照分析。每位患者在待测之前都有同意接受调查，并且提供完善的基本信息资料。
1.2.2入选标准
结核病的诊断
全部的患者都是初次医治（没有接受过抗结核的化学疗法或只有短期内有采用化学疗法）的继发型结核病，不包括先天性TB以及通过血液感染或别的肺外结核病。有以下其中一项即可确定为结核病：1）做痰液涂片检测抗酸性菌阳性或分离培养阳性；2）X胸片展现出符合TB的病症特点。
1.3样本收集
所有待测者收集6mL全凝血用于T-spot.TB和IL-10的测定，其测定使用T-spot.TB和IL-10的测定试剂盒，依照说明书要求进行操作。先用淋巴裂解液将全血分离出单个核细胞和血浆，调节好细胞浓度留作待测。
T-spot.TB判定指标：①当阴性组微孔的点数是0~5，测定孔抗原A或B斑点值去掉阴性组≥6，为阳性；②当阴性组微孔的点数≥6，测定孔抗原A或B斑点值≥2倍阴性组，为阳性。
IL-10的测定：实验前准备配制标准品、缓冲液、待测抗体及荧光标定物的一系列所用试剂（未配品包含在试剂盒内）；2）先设定好2个标准曲线，按试剂盒操作说明步骤及顺序要求加入各待测样品孔中，并且要有空白对照；按要求加入待测抗体及荧光标定物孵育；3）完好上述后加入测定缓冲液后立刻放到流式细胞仪上做测定。
1.4统计学处理
应用SPSS 16.0 软件对实验中所有数据进行处理分析，实验中计量资料用±s表示，用单因素方差分析法对多组样本均数进行比较，P＜0.05 为有统计学差异。
2 结果
2.1 所有受测者T-spot.TB和IL-10水平的测定
所有受测者T-spot.TB和IL-10水平的测定结果显示，如表1，结核病组IL-10的表达多于非结核病组和正常组。结核病组T-spot.TB的阳性数值多于非结核病组和正常组（P＜0.05），非结核病组和正常组的T-spot.TB的阳性数值没有统计学差别。
2.2 T-spot.TB和IFN-γ水平对于肺结核诊断的价值
结核病的特异性和敏感性的测定结果显示，如表2，IL-10表达对于结核病的判别特异性较高（84.1%）；T-spot.TB对于结核病的判别敏感性较高（83.3%），采用两者联合检测敏感性最高（90.7%和91.2%）。
表1 受测者T-spot.TB水平的测定
3.讨论
当前社会不断进步，人们经济条件以及生活质量随之提升，和生活品质有关的病症的病发几率也是随之有所提升。有报道显示，全世界有上亿的糖尿病（DM）患者，预估到2015年会增加至3亿。并且，结核病在发达国家已经有很高的病发几率[5]。这几年流行病学调查显示，国内流动性人口与之前相较没有显著减低，如若不能及时应用有效的防御方案，人数会持续增加，造成更加严重的后果。因而，能够对于疑似结核病做出快速准确的诊断是我们首先要解决的问题。
IL-10是由Th2产生的，参与肺结核免疫病症进程的炎性因子，对于机体肺结核感染敏感度很高。有研究显示，在活性肺结核的血浆中IL-10的水平是明显上调的，IL-10会促进肺结核的进程，还发现其在感染结核分枝杆菌的病人胸膜间皮细胞和细胞间会有相关的免疫调控[6]。并且在我们的研究也发现，结核病组血浆的IL-10表达高于非结核病组和对照组，IL-10表达的检测对于结核病的判别特异性比较高。T-spot.TB一类新型的是诊断结核病的方法，其原理是当人体受结核病菌感染时，会生成T细胞（即记忆细胞），若之后机体再一次受到结核菌侵入，T细胞会迅速生成效应T细胞，分泌IFN-γ和别的因子诱发免疫反应。因而T-spot.TB对于对于结核病的判别是有极强的敏感性的，这与我们的实验结果相符，T-spot.TB对于对于结核病的判别敏感性较高。
综上所述，结合使用T-spot.TB和IFN-γ水平的测定会明显提升肺结核诊治的特异性和敏感性，对于结核病在临床上得到很好的确诊有很大的应用价值。
参考文献：
[1]方秋雁，刘建红，叶晓云，等. T-SPOT TB联合IL-10、IL-27对结核性胸膜炎的诊断价值[J]. 医学研究杂志，2015，44（5）：134-137.
[2]吕松琴，赵华，宝福凯，等. TNF-α和IFN-γ与T-SPOT.TB相结合应用于鉴别结核现症感染与隐性感染[J]. 昆明医科大学学报，2017（4）：93-97.
[3]冯晓朦，王晶莹，时景伟，等. 血清ADA水平和T-spot.TB联合检测在肺结核诊断中的应用[J]. 吉林大学学报（医学版），2016，42（2）：306-310.
[4]Ponnana M，Sivangala R，Joshi L，et al. IL-6 and IL-18 cytokine gene variants of pulmonary tuberculosis patients with co-morbid diabetes mellitus and their household contacts in Hyderabad[J]. Gene，2017，627：298-306.
[5]杨建蓉，杨红. T-SPOT.TB和TST在结核诊断中的临床意义[J]. 医学综述，2015（12）：2279-2281.
[6]陆小艳，杨艺，杨丹. T-SPOT.TB联合血浆细胞因子检测在活动性结核病诊断中的应用[J]. 实用临床医药杂志，2016，20（21）：41-44.
通讯作者：张天哲 副教授 研究生导师 华北理工大学公共卫生学院。
论文作者:袁春晖,张天哲
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2017年第25期
论文发表时间:2018/2/1
标签：结核病论文; 肺结核论文; 阳性论文; 细胞论文; 特异性论文; 敏感性论文; 较高论文; 《中国误诊学杂志》2017年第25期论文;