江阴市疾病预防控制中心，江苏 江阴 214434
摘要： 目的 了解江阴市2016年池塘水及水产品沙门菌的污染状况。方法 采用培养基生长特征培养、生化反应、荧光PCR检测、血清学凝集试验。结果 从2份池塘水中检出山夫登堡沙门菌，从1份生螺蛳中检出山夫登堡沙门菌。结论 沙门菌广泛存在于自然界，可能在水、水产品及人之间相互传播，需引起重视，加强监测。
关键词： 山夫登堡沙门菌；血清凝集；相互传播
Subject: Analysis of Salmonella Senftenberg in the pond water and raw spiral shell
Authors: LI Ling, GAO Hai-ying, ZHANG Hong-bin(Jiangyin Municipal Center for Disease Control and Prevention, Jiangyin, Jiangsu 214434, China)
Abstract: Objective To understand the pollution of the pond water and aquatic products of Jiangyin city in 2016. Methods Growth characteristics in different cultures, biochemical reactions, fluorescent PCR detection, serological tests. Results From the two pond water, check out the salmonella senftenberg, from a sample of commercial raw spiral shell, check out the salmonella senftenberg. Conclusion Salmonella is widely found in nature and may spread among water, aquatic products and people. It needs to be taken seriously and monitored.
Keywords: Salmonella Senftenberg; Serum agglutination; Mutual spread
沙门菌是通过粪-口途径传播的常见肠道致病菌和食源性致病菌[1-2]，通常引起感染性腹泻和食物中毒[3-4]。该菌广泛存在于环境中，由于人群对其普遍易感，所以对环境中和食品中沙门菌的检测显得尤为重要[5-6]。我中心2016年对外环境池塘水的检测中，从2份池塘水中检出山夫登堡沙门菌，在食源性检测中，从菜场的1份生螺蛳中检出山夫登堡沙门菌，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 样本来源 2016年日常检测工作中采集的池塘水及水产品。
1.2 实验器材 罗氏480荧光定量PCR仪购自瑞士罗氏诊断公司；沙门菌增菌液（BPW、SC、TTB）购自广东环凯微生物有限公司；沙门菌显色平板购自郑州博赛生物技术股份有限公司；XLD琼脂购自英国OXOID公司；克氏双糖、生化反应管均购自广东环凯微生物科技有限公司；swarm琼脂购自北就陆桥技术有限责任公司；沙门氏菌和志贺氏菌核酸检测试剂盒（荧光PCR法）购自江苏硕世生物科技有限公司；宁波天润沙门氏菌属诊断血清购自宁波天润生物药业有限公司。各类试剂均在有效期内使用。
1.3 实验方法
1.3.1 池塘水 将采集的2L池塘水抽滤，抽滤过的滤纸与滤后水样一起培养于双料SC增菌液中，36℃培养24小时后，对SC培养液进行PCR检测，同时把培养液接种于沙门菌显色平板和XLD琼脂平板，36℃培养24小时，挑取可疑菌于克氏双糖管，将斜面红色、底层黄色、硫化氢阳性的可疑沙门菌进行生化试验。确定沙门菌后，接种于swarm琼脂平板，用血清进行凝集确定型别。
1.3.2 水产品（螺蛳） 称取25g样品于BPW增菌液中经36℃培养24小时后，取1ml培养液分别接种于SC（36℃24小时）和TTB（42℃18小时）增菌液中培养，对SC培养液进行PCR检测，把经培养后的SC和TTB增菌液接种于沙门菌显色平板和XLD琼脂平板，36℃培养24小时。挑取可疑菌于克氏双糖管，将斜面红色、底层黄色、硫化氢阳性的可疑沙门菌进行生化试验。确定沙门菌后，接种于swarm琼脂平板，用血清进行凝集确定型别。
1.4 实验依据 按照《食品微生物学检验 沙门氏菌检验(GB4789.4-2010)》进行增菌、分离、生化试验及血清学鉴定。
2 结果
2.1 沙门菌显色平板结果 可疑菌落在沙门菌显色平板上为紫色、直径2.5mm左右，表面光滑圆形突起的菌落。在XLD平板上为中心黑色、光滑透明、湿润、边缘整齐、圆形、直径2mm左右的菌落。
2.2 荧光PCR结果 扩增曲线为典型的“S”型曲线，Ct值均小于30，判断沙门菌为阳性。
2.3 生化试验结果 克氏双糖管底层产酸（黄色），上层产碱（红色），不产气，产硫化氢；靛基质(-)；尿素(-)；氢化钾生长(-)；赖氨酸脱羧酶(+)。上述生化反应属于典型反应，判定为沙门菌属。
2.4 血清凝集结果 可疑菌的血清型均为O1,3,19：Hg,s,t：-，如下表1
表1 3份可疑菌血清凝集结果
3 讨论
3.1 由于对于池塘水前处理没有相关的标准，我实验室参考了医院污水检测的相关标准，采取了抽滤的方法，且经过长期的工作经验发现，按照医院污水的要求样品量为200ml时对于池塘水来说，很难检测到致病菌，当样品量为1-2L时可以提高致病菌的检测率，同时也给同行在遇到类似检测时提供一定参考。
3.2 池塘水一方面对于农村地区来说是作为蔬菜瓜果的灌溉用水的，若水中含有沙门菌等肠道致病菌的话，通过灌溉可以将这些致病菌带到蔬菜瓜果上，再加上人们食用时没有洗净或者生食一些瓜果，则会对其健康造成威胁。
3.3 根据本地区人们的饮食习惯，大多数人比较喜爱食用螺蛳、河蚌等水产品，我中心在对水产品的检测中从1份生螺蛳中检出了山夫登堡沙门菌，而螺蛳生活于池塘等水体中，且在对池塘水检测中也检出2株山夫登堡沙门菌，可以推测池塘水污染了沙门菌后，螺蛳在水中生长一段时间后也感染了该种沙门菌，由此也可以进一步推测鱼类、河蚌、河虾等水产品都也存在一定的感染沙门菌的风险，若人体食用的话，也可能会造成沙门菌感染，那么也说明了沙门菌在水、水产品及人之间是可能造成相互传播的[7-8]。
4 参考文献
[1] 沈梅云, 张晴, 廉靖贤. 无锡市锡山区首次检出1株伦敦沙门菌的报告[J]. 中国现代医生, 2014, 52(2): 124-125, 128.
[2] 黄瑛, 张新, 曲梅, 等. 脉冲场凝胶电泳技术用于两起山夫登堡沙门菌疫情溯源[J]. 中国卫生检验杂志, 2013, 23(6): 1575-1576.
[3] 王爱英. 山夫登堡沙门菌引起的婴幼儿腹泻分析[J]. 现代中西医结合杂志, 2010, 19(16): 2043.
论文作者:李玲，高海英，张宏宾
论文发表刊物:《中国医学人文》2017年第8期
论文发表时间:2017/10/25
标签：沙门论文; 池塘论文; 螺蛳论文; 检出论文; 平板论文; 琼脂论文; 水产品论文; 《中国医学人文》2017年第8期论文;