【关键词】气相色谱法；清火片；薄荷脑
[中图分类号]R286.0 [文献标识码]A [文章编号]1439-3768-（2019）-01-YS
清火片是由大黄、石膏、薄荷脑制成的片剂，收载于国家食品药品监督管理总局国药药品标准中。该药品中所含薄荷脑为一活性成分，可以对皮肤黏膜产生清凉感以减轻不适及疼痛。但该药品的质量标准中对薄荷脑仅有薄层鉴别，尚无含量测定项目。为提高本品质量控制标准，本试验用气相色谱法对该药品中薄荷脑的定量分析方法进行研究。
1 仪器与试药
Agilent7890B气相色谱仪，FID检测器（Agilent公司）；DB-WAX气相毛细管柱（Agilent，30cm×0.25mm×0.25mm）、电子天平（Sartorius,CP225D），电子分析天平（Sartorius,BSA224S）。
薄荷脑对照品；萘、无水乙醇；清火片（基片重0.52g/片）；高纯氮气。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 DB-WAX毛细管柱，柱温：初始温度100℃，保持2min，再以10℃/分钟速率升温至180℃，保持20分钟；FID检测器，进样口温度220℃，检测器温度250℃。分流比为10:1。进样1µL。理论板数按薄荷脑峰计算不低于20000。
2.2 内标溶液的配制 取萘适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含1.75mg的溶液，作内标溶液。
2.3 对照品溶液的配制 取薄荷脑对照品12.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入内标溶液5ml，再加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得。
2.4 供试品溶液的制备 取装量项下样粉末，取3.6g，精密称定，置25ml量瓶中，加入适量无水乙醇超声20分钟，精密加入内标溶液5ml，再加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过即得。
2.5 阴性样品溶液的制备 取缺薄荷脑阴性样品3.6g，精密称定，置25ml量瓶中，加适量的无水乙醇超声20分钟，精密加入内标溶液5ml，再加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过即得。
2.6 专属性试验 分别吸取内标溶液、对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各1µl，依本法测定，供试品与对照品在同一保留时间有相应的色谱峰对应，阴性样品溶液无干扰。
2.7 线性关系考察 称取薄荷脑对照品75mg置50ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得薄荷脑对照品储备液。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆分别取薄荷脑对照品储备液0.2ml，1.0ml，2.0ml,3.0ml,10ml置25ml，25ml，25，20ml，25ml制备线性关系对照品溶液1,2,3,4,5，各精密加入内标溶液5ml，用无水乙醇定容至刻度，摇匀，进样1µL，按上述色谱条件测定。以浓度（mg/ml)为横坐标，对照品物峰面积为纵坐标，得线性方程Y=845.37X+25.006（r2=0.9964）。结果表明薄荷脑浓度在0.0121—0.6045mg/ml范围内线性良好。
2.8 精密度试验 取同1份供试品溶液，在上述色谱条件下重复进样5次，以薄荷脑对照品峰面积与内标峰面积的比值计算。RSD为0.85%（n=5)，精密度良好。
2.9 稳定性试验 取同1份供试品溶液分别于0h、2h、6h、12h进行测定，按薄荷脑峰面积与内标峰面积之比计算，RSD为0.19%（n=4），表明本品的测定溶液在12h内稳定。
2.10 重复性实验 取同批样品6份，制备成供试品溶液，在上述色谱条件下测定含量，结果6份样品中薄荷脑平均含量为0.3513mg/片，RSD为0.92%。
2.11 加样回收率试验 取已知薄荷脑含量的样品100片，研细，混匀。称取6份，每份约1.8g，精密称定，置25ml量瓶中，分别精密加入薄荷脑对照品溶液储备液2.0ml，内标溶液5ml，按供试品溶液制备方法制备，在上述色谱条件下测定，并计算回收率，薄荷脑回收率为99.6%，RSD为1.72%。
2.12 样品测定 取3批清火片样品，照上述方法测定，按内标法以峰面积计算样品中薄荷脑的含量，结果分别为0.3572mg/片、0.3492mg/片、0.3691mg/片，平均含量为0.36mg/片。
3 讨论
3.1 提取溶媒的选择 考察无水乙醇、正己烷、乙酸乙酯等溶剂对薄荷脑的溶解性，结果都有较好的溶解性且分离度和峰型都较好，选取无水乙醇为溶剂，低毒，安全。
3.2 内标物的选择 测定薄荷脑用的内标物有萘、环己酮、水杨酸甲酯等。考察萘、环己酮、水杨酸甲酯作为内标物质和溶剂的溶解性及分离度，溶解性和分离度及峰型都较好，选择萘作为内标物质是因为它较其他两种物质为低毒性试剂。
3.3 色谱柱的选择 分别比较了Agilent DB-WAX毛细管柱、中汇达 PEG-20M毛细管柱、Agilent HP-5毛细管柱检测，检测结果以Agilent DB-WAX毛细管柱最为理想，分离度最好。
3.4 建立薄荷脑含量测定方法的意义 薄荷脑为清火片中有效成分，因其易挥发性的理化性质，在生产、储存与运输过程中均易引起其含量下降，从而影响制剂的疗效，故对清火片中薄荷脑制定含量测定指标是必要的，在能保证药品质量的同时，建议在生产过程中应开发清火片的薄膜包衣技术。
参考文献
1、中国药典2015年版一部，国家药典委员会，中国医药科技出版社；
2、《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂》第二册；
3、国家食品药品监督管理总局国药药品标准WS3-B-0414-90-4；
4、刘钰华，梁健钦，广州梧州市人民医院，气相色谱法测定清火片中薄荷脑的含量。
论文作者:邱冬梅 马静 李莹莹 沈亚娣 王小月 蔡仙 李娟
论文发表刊物:《药物与人》2019年1月
论文发表时间:2019/5/7
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