刘丽萍
黑龙江省大庆龙南医院 黑龙江大庆 163453
【摘 要】目的：研究血液中miRNA用于结直肠癌早期诊断的临床意义。方法：选取2017年3月~2018年3月我院收治的结直肠癌患者50例作为观察组，选取同期来我院进行健康检查的50例健康人群作为对照组，采集两组纳入对象的3~5ml血液样本，通过紫外线分光光度对提取的RNA纯度进行提取测定。结果：观察组结直肠癌患者血清中miR-21、mi-31、miR-106a水平明显高于对照组健康体检者，组间比较差异显著，P<0.05；观察组患者的miR-135a、miR-135b、miR-145、miR-143水平明显低于对照组，组间比较差异显著，P<0.05；而两组血清miR-96比较无统计学意义，P>0.05。结论：miR-31与结直肠癌患者的疾病进展与分期存在明显相关性，对于结直肠癌的早期诊断具有重要价值。
【关键词】结直肠癌；血液中miRNA；早期诊断；研究
Preliminary study of miRNA in blood for early diagnosis of colorectal cancer
Liu Liping
（Daqing Longnan Hospital，Heilongjiang，Daqing，Heilongjiang 163453）
[Abstract]Objective：To study the clinical significance of miRNA in blood for early diagnosis of colorectal cancer.Methods：50 cases of colorectal cancer patients in our hospital in March 2017 ~2018 March were selected as the observation group，and 50 healthy people were selected as the control group for the health examination in our hospital for the same period.The samples of the two groups of 3~5ml blood were collected and the purity of the extracted RNA was extracted by ultraviolet spectrophotometry.Results：the serum levels of miR-21，mi-31 and miR-106a in the patients with colorectal cancer were significantly higher than those in the control group，and the difference was significant between the groups，P<0.05.The levels of miR-135a，miR-135b，miR-145 and miR-143 in the observation group were significantly lower than those in the control group，and the difference was significantly different between the groups and P<0.05，while the two groups of serum miR-96 were compared.There was no statistical significance，P>0.05.Conclusion：there is a significant correlation between miR-31 and progression and staging of colorectal cancer，which is of great value for early diagnosis of colorectal cancer.
[Key words] colorectal cancer，blood miRNA，early diagnosis，and research.
随着我国人民生活水平提高、饮食结构改变、人口老龄化等因素的影响，结直肠癌患者的发病率与死亡率呈逐年增高趋势[1]。结直肠癌患者早期诊断及时治疗对于结直肠癌患者的生存与预后均具有促进作用，早期结肠癌患者经及时有效治疗后生存率约为90%，但随着疾病发展转移，晚期结直肠癌患者的生存率仅为15%左右[2]。为了有效提高结直肠癌患者的早期诊断率，我院选取2017年3月~2018年3月收治的结直肠癌患者与健康体检者各50例作为本次研究对象，对血液中miRNA在早期诊断的可行性进行研究，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2017年3月~2018年3月我院收治的结直肠癌患者50例作为观察组，经术后病理诊断确诊为结直肠癌，男性31例，女性19例，年龄41~77岁，平均年龄为（51.29±4.29）岁，TNM分期：Ⅰ期9例、Ⅱ期21例、Ⅲ期13例、Ⅳ期7例；选取同期来我院进行健康检查的50例健康人群作为对照组，男性28例，女性22例，年龄43~78岁，平均年龄为（53.89±4.91）岁，组间数据资料比较无统计学意义，P>0.05。
1.2 方法
采集两组纳入对象的3~5ml血液样本放置于采血管内，室温条件下放置2~3h，经离心处理，离心速度为500r/min，离心时间为3min。离心后取上清液进行却蛋白处理，将上清液中加入75%乙醇1ml，经5min离心，转速为1000r/min，去上清液真空干燥，将RNA成分充分沉淀，将DEPC500μl加入水中溶解，通过紫外线分光光度对提取的RNA纯度进行提取测定，A260/A280比值约在1.6~1.8之间。
1.3 定时荧光定量PCR检测
对总RNA浓度进行科学调整，利用miScript Rever Transcription转录试剂盒进行反转录为cDNA，转录反应条件控制在37℃/1h与95℃/5min。获取cDNA后应用miScript SYBR Green PCR试剂盒开展定时荧光定量PCR检测，依据试剂盒配套说明书加入特异性引物。将定量PRC仪参数调整到7300后检测实施荧光定量PCR，反应条件，首先进行15min预热，温度控制在15min，然后进行94℃/15s，55℃/30s，70℃/34s共进行40个循环。
1.4 统计学分析
本组数据均采用SPSS19.0软件进行组间数据比较，计数资料以（n，%）进行描述且行卡方检验，计量资料以（x±s）描述且行t检验，若组间数据P<0.05则具备统计学意义。
2结果
观察组结直肠癌患者血清中miR-21、mi-31、miR-106a水平明显高于对照组健康体检者，组间比较差异显著，P<0.05；观察组患者的miR-135a、miR-135b、miR-145、miR-143水平明显低于对照组，组间比较差异显著，P<0.05；而两组血清miR-96比较无统计学意义，P>0.05，见表1所示。
3.讨论
经临床大量实验证实，PCR检测中早期肿瘤患者疾病发生与转移的不同阶段，患者的miRNA表达谱均会发生较大变化[3]。根据本次研究提示，相比于对照组健康体检者而言，观察组结直肠癌患者miR-21、miR-31、miR-106a表达水平明显增强，而在miR-143，miR135a、miR135b、miR-145表达水平均明显降低。结果提示，miR-31与结直肠癌患者的疾病进展与分期存在明显相关性，对于结直肠癌的早期诊断具有重要价值。miRNA作为正常细胞稳态有效维持的重要参与因素，miRNA变异表达与相应靶基因异常出现抑癌基因与癌基因有关[4]。因此血液中miRNA可作为结直肠早期诊断的重要指标[5]。
参考文献：
[1]郑伟.LncRNA-miRNA-mRNA相互作用初步研究[D].中国人民解放军军事医学科学院，2017.
[2]韦皓棠.粪便miRNA对结直肠癌的诊断价值[D].广西医科大学，2017.
[3]刘刚.MiRNA-21的表达与结直肠癌患者术后预后关系的meta分析[D].山西医科大学，2017.
[4]徐瑞斯.miR-31在结肠癌中的功能及作用机制的研究[D].吉林大学，2013.
[5]程敏.干扰素调节的miRNA表达谱及其抗HCV机制研究[D].北京协和医学院，2013.
论文作者:刘丽萍
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2018年2月第3期
论文发表时间:2018/7/10
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