类风湿因子联合抗SSA、抗SSB抗体在原发性干燥症诊断中的应用论文_帅朝霞

(安徽省芜湖市皖南医学院第二附属医院检验科;安徽芜湖 241000)

摘要: 目的:探讨类风湿因子联合抗SSA抗体、抗SSB抗体联合检测在原发性干燥症诊 

中的意义。方法:选取本院2012-2016年门诊及住院的原发性干燥症(PSS)患者85 例140例健康成人对照组采用免疫印迹法检测抗SSA、抗SSB抗体类风湿因子采用速率散射比浊发定量检测。

结果: 抗SSA抗体、抗SSB抗体、类风湿因子在原发性干燥症患者中的阳性率分别为:

68%,37%,47%,均显著高于健康体检者。SSA、SSB、类风湿因子三者联合检测可显著提高原发性干燥症患者的检出率,检测阳性率高达:85%。结论: 类风湿因子(RF)联合SSA、SSB对原发性干燥症的早期诊断具有重要作用。

关键词:原发性干燥综合症;干燥综合征A; 干燥综合征B抗体; 类风湿因子;

联合检测

原发性干燥症一种跟遗传相关的有一定家族史的自身免疫性疾病,典型的临床表现为腺体分泌不足的导致的口、眼干燥,并可累及到多个消化系统如肾、肺、神经、等,进而引起全身的器官受累。常见表现有全身酸痛、肌肉无力、胸闷、癫痫、干咳、软瘫、以及原因不明的肝炎、肝硬化、慢性腹泻等[1]。但其发病机制尚不明确,现在仍无公认的的血清学诊断标准。原发性干燥综合症患者在血清中可检测出多种自身抗体。根据以往的研究发现:45.7%的患者可有抗核抗体滴度的升高,70%左右的患者有抗SSA阳性,40%左右患者有抗SSB阳性,50%左右患者可有类风湿因子的升高[2]。本研究主要探讨三者联合检测对提高原发性干燥症的检出率的意义,提高早期诊断水平.

1. 材料和方法:

1.1一般材料:标本来源:静脉血采自2012-2016年本院的门诊及住院已确诊的原发性干燥症患者85例,其中男8例,女77例;年龄18-80岁,中位年龄64.3岁。以上病例均符合2003年国家关于原发性干燥症的诊断标准[3]。同时选取同期本院健康体检对照组140例血清进行对比。

1.2. 检测方法:抗SSA抗体,抗SSB抗体检测:使用德国Human试剂盒,采用线性免疫印迹法。具体步骤如下:采集患者晨起静脉血5ml,室温条件下加10μl血清于1ml样品稀释液中,摇床上摇摆30min,洗涤:每次5分钟,洗3次。然后加入酶标记二抗室温摇床上摇摆30min后重复上次洗涤步骤,加显色剂室温摇床摇摆10min后倒去槽内最后加终止液试验结束。结果与条带上的阳性及弱阳性质控线进行比较进行判断。类风湿因子采用速率散射比浊法在日立7600生化分析仪上定量测定,使用试剂盒为上海科华公司生产。严格按照仪器操作流程和试剂盒说明书进行定标,保证试验结果的可靠性。

统计学方法

采用SPSS17.0统计软件进行分析,定性结果百分率以百分数表示,组间比较采用卡方检验。P<0.05为差异有统计学意义。

结论:本实验证实单独检测SSA、SSB抗体的检出率分别是68%、37%。两项联合检测时阳性率可有很大提高能达到74%。联合类风湿因子、SSA、SSB三项一起检测阳性率可达85%,对提高原发性干燥综合征的早期诊断具有重大意义。具体实验数据见下表

3. 讨论:

原发性干燥症是一种影响内外分泌腺的自身免疫性疾病。主要侵犯泪腺和唾液腺,以眼和口腔的干燥为主要症状。患者唾液腺中有小淋巴细胞浸润灶和较大的浸润灶,前者主要由B细胞与浆细胞组成,而后者主要位于中央的T细胞组成,其中以CD4+细胞浸润为主,同时有少量的CD8+细胞,B细胞和浆细胞分布在周边区,根据现有研究结果显示,其组织损伤机理可能是依赖细胞介导的淋巴细胞毒反应,但是也有人认为本病的发生与位于HLA-D微店的免疫反应基因有关,近年来有人通过临床研究得出,所有干燥症患者的纤体的上皮细胞都有HLA-DR抗原的表达,表达的程度与浸润淋巴细胞量成正比[4]。此病发于绝经期以后或30-40岁的女性,发病率约0.3-0.4%,在老年人群中高达0.77%。但由于本病的临床表现多样化,易被忽视或误诊。一部分病人,尤其是年轻女性,在疾病早期无明显症状,同时一部分老年女性,并没认识到口、眼干也是一种病。此病的早期诊断一直是临床上的难题之一。国内外多数患者都是通过唇腮活检或者腮腺造影等创伤性检查确诊,依从性较差[5]。

原发性干燥症患者血液中有多种自身抗体如ANA、SSA、SSB等。1979 年Alspaugh 等人在对原发性干燥症患者血清的研究过程中发现,人淋巴细胞提取物在培养过程中出现了两种新的自身核抗原就是SSA 和SSB 抗原。SSA 抗原含有两种蛋白即Ro52 蛋白和Ro60 蛋白,它在人体中以核糖核蛋白复合物的形式存在,它的自身抗体是已知的抗RNP抗体中最常见的也是分布最广的自身抗体。SSB 是由一个单独的分子量为47 - kDa 的蛋白组成。自身免疫性疾病患者血清中,由于这两种抗体经常出现在自身免疫性疾病患者血清中,已被医学界所广泛认同,是国内外公认的原发性干燥症确诊的标记性抗体[6]。但是随着医学的飞速发展,抗SSA、抗SSB的检测在敏感性和特异性方面都很难满足临床发展需要。因此需要有更好的试验方案来完善。

类风湿因子的产生跟某些感染有关(如细菌、病毒等),感染后引起体内产生以变性IgG(一种抗体)为抗原的一种抗体,因此也被称为抗抗体。常见的类风湿因子以多种形式存在如I gM型、IgG型IgA型和IgE型。人体内的类风湿因子普遍存在,并发挥着很多的生理作用。类风湿因子阳性患者常有皮下结节及血管炎等关节外的临床表现等。I在以上几型中gM型的RF阳性率较高可达到为60%-78%。近年研究发现类风湿因子在其他多种自身免疫性疾病中都能大量检测到。在原发性干燥症患者血液中类风湿因子的阳性率可达47%。本研究主要探讨类风湿因子联合检测能提高原发性干燥症诊断中的敏感性。可避免因为单项检查而造成的;漏检,耽误疾病的治疗。

参考文献

[1] 韦三华. 刘昕阳等 123例干燥综合征患者自身抗体及免疫球蛋白和补体检测分析,国际检验医学杂志。2010.7(31)

[2] 陈永静,黄慈波. 干燥综合征的诊断治疗进展 临床药物治疗杂志. 2010.8(1)

[3] 中华医学会风湿病学分会。干燥综合征诊治指南(草案)[j]。中华风湿病学杂志。2003.7(7):446

[4] 刘娟 .干燥综合征相关蛋白 . 皮肤与性病 . 2014.8 (36)

[5] 张孝丰 汪一萍 罗建平 抗SSA 抗体、抗SSB 抗体,抗-胞衬蛋白联合检测在干燥综合征中的诊断价值.现代实用医学.2011.12

[6] Ching KH,Burbelo PD,Gonzalez - Begne M,et al. Salivary anti -

Ro60 and anti - Ro52 antibody profiles to diagnose Sjgren's Syndrome

J]. J Dent Res,2011,90( 4) : 445 - 449.

论文作者:帅朝霞

论文发表刊物:《医师在线》2016年8月第16期

论文发表时间:2016/10/26

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