海伦市雷炎社区卫生服务中心 152399
摘要：目的：研究分析乙型肝炎病毒大蛋白（Hepatitis B virus large protein，HBV-LP）含量与慢性乙型肝炎（Chronic hepatitis B，乙肝）治疗效果的相关性，为乙肝患者抗病毒治疗效果的预测提供参考依据。方法：检测192例乙肝患者和同期120名健康体检者（NC组）乙肝五项及HBV-LP含量，并检测乙肝组治疗前后HBV DNA、HBV-LP含量变化，分析HBV-LP含量与HBV DNA水平的相关性。结果：乙肝组HBeAg阳性率、HBV-LP阳性率均高于NC组，其HBV-LP阳性率亦高于HBeAg阳性率，差异有统计学意义（P<0.05）。HBeAg阳性患者与HBeAg阴性患者HBV-LP阳性率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。与治疗前比较，治疗后3个月患者HBV DNA、HBV-LP阳性率及定量逐渐降低，治疗6个月后HBeAg阳性率及定量逐渐降低，差异有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关性分析结果HBV-LP含量与HBV-DNA拷贝数呈正相关（r=0.773，P<0.05）。以HBV DNA为金标准，随着治疗时间的增加，HBV-LP评价乙肝治疗效果的灵敏度逐渐降低、特异性逐渐上升。结论：定期检测乙肝患者血清HBV-LP含量对评价其治疗效果具有积极意义。
关键词：乙型肝炎病毒大蛋白；慢性乙型肝炎；抗病毒治疗；效果；相关性
[Abstract] Objective：to analyze the hepatitis B virus large protein（Hepatitis B virus large of protein，HBV-LP）and the content of chronic hepatitis B（Chronic hepatitis，B，b）correlation between treatment effect，to provide reference for predicting effect of antiviral therapy in patients with hepatitis B. Methods：192 cases of hepatitis B patients and 120 healthy subjects over the same period（group NC）hepatitis B five and the content of HBV-LP，DNA，HBV-LP and HBV change detection of hepatitis B content before and after treatment，the correlation analysis of HBV-LP content and HBV level of DNA. Results：the positive rate of HBeAg and HBV-LP positive rate of hepatitis B group were higher than those of NC group，and the positive rate of HBV-LP was higher than that of HBeAg positive rate，the difference was statistically significant（P<0.05）. There was no significant difference in the positive rate of HBV-LP between HBeAg positive patients and HBeAg negative patients（P>0.05）. Compared with before treatment，the positive rate of HBV，HBV-LP and DNA decreased gradually in 3 months after treatment，and the positive rate and the quantity of HBeAg decreased gradually after 6 months treatment，the difference was statistically significant（P<0.05）. Pearson correlation analysis showed that HBV-LP content was positively correlated with HBV-DNA copy number（r=0.773，P<0.05）. With the HBV DNA as the gold standard，with the increase of treatment time，the sensitivity of HBV-LP to evaluate the therapeutic effect of hepatitis B gradually decreased，and the specificity increased gradually. Conclusion：regular detection of serum HBV-LP content in patients with hepatitis B has positive significance to evaluate the therapeutic effect.
Keywords：hepatitis B virus large protein；chronic hepatitis B；antiviral therapy；effect；correlation
抗病毒药物治疗慢性乙型肝炎乙肝是一个长期的过程，治疗期间乙型肝炎病毒（HBV）的变异可能对抗病毒药物的治疗效果造成影响，故定期判断患者治疗效果尤为重要[1]。过往临床判断乙肝抗病毒治疗效果主要通过HBeAg阴转率与HBV DNA水平检测，但我国HBeAg阴性患者数量较大且HBV DNA定量检测成本较高 [2]。最新研究发现，乙型肝炎病毒大蛋白（Hepatitis B virus large protein，HBV-LP）在HBV复制与持续感染过程中扮演了重要角色，作为一种易于检测的血清学指标，HBV-LP检测有望为乙肝患者治疗效果的早期预测提供参考[3]。为进一步了解其价值，本研究选取192例乙肝患者及120名健康体检者，就HBV-LP与乙肝治疗效果的相关性进行了分析。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2013年7月—2015年7月收治的192例确诊乙肝[4]患者，入组前无抗病毒药物使用史，排除合并其他类型肝炎或肝损害者。乙肝组患者均接受抗病毒治疗：恩替卡韦分散片（商品名博路定，中美上海施贵宝制药有限公司，国药准字H20052237）空腹口服，每日1次，每次0.5 mg，疗效不佳者增至1.0 mg/d[4]。患者治疗均持续1年。另选NC组120例，保持两组受试者性别、年龄等一般临床资料具有可比性。本临床研究经我院医学伦理委员会批准，受试者均知情同意并签署知情同意书。
1.2 研究方法
1.2.1 血清指标检测 抽取两组受试者入组次日晨起空腹静脉血10 mL，留取血清并对其乙肝五项（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）及HBV-LP含量（ELLISA法）进行检测。HBV-LP检测结果判定[5]：阳性：样本吸光度值（A值）≥临界值，阴性：样本A值<临界值。其中临界值=阴性对照孔平均A值（不足0.05按0.05计算）×2.1。
1.2.2 相关性分析 采用SPSS18.0进行分析，分别于乙肝组治疗3个月、6个月、9个月、12个月时再次检测其HBV DNA（实时荧光定量PCR法）、HBV-LP含量变化，分析HBV-LP含量与HBV DNA水平的相关性。相关性分析采用Pearson法，以P<0.05為差异有统计学意义。HBV DNA检测结果判定[6]：阳性：HBV DNA拷贝数≥5×102 IU/mL；阴性：HBV DNA拷贝数<5×102 IU/mL。
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2 结果
乙肝组HBeAg阳性率44.79%、HBV-LP阳性率97.92%，均高于NC组，其HBV-LP阳性率亦高于HBeAg阳性率，差异有统计学意义（P<0.05）。
乙肝组HBeAg阳性患者HBV-LP阳性率100%，与HBeAg阴性患者HBV-LP阳性率96.23%比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
与治疗前比较，治疗3个月后患者HBV DNA、HBV-LP阳性率及定量逐渐降低，治疗6个月后患者HBeAg阳性率及定量逐渐降低，差异有统计学意义（P<0.05）。
Pearson相关性分析显示，HBV-LP含量与HBV-DNA拷贝数呈正相关（r=0.773，P<0.05）。以HBV DNA为金标准，随着治疗时间的增加，HBV-LP评价乙肝治疗效果的灵敏度逐渐降低、特异性逐渐上升。
3 讨论
目前我国乙型肝炎的流行现状以HBeAg阴性活动期肝炎增多、HBV变异株增加为主，密切监测乙肝患者抗病毒治疗效果显得尤为重要[7]。由于HBV发生前C与C区变异，目前HBeAg阴性患者HBV复制状态的反映仅可借助HBV DNA定量检测，但多数基层医院并不具备DNA检测条件，无法满足基层庞大乙肝人群的疗效监测要求[8]。
HBV-LP是Dane颗粒（HBV完整病毒颗粒）和管状颗粒（不具有病毒DNA的亚病毒颗粒）包膜的主要成分，感染早期，HBV-LP可结合细胞受体，加强病毒的细胞内摄入能力；感染晚期，HBV-LP可促进HBV组装与分泌，保证HBV复制的活跃性[9]。因此，检测乙肝患者血清HBV-LP含量有望为体内HPV复制能力及活跃度的判定提供一定参考。
本研究中患者HBV-LP阳性率高于自身HBeAg阳性率，说明部分患者血清内无法检测到HBeAg，这是由于HBeAg由前C基因和C基因共同转译，若患者体内HBV基因前C区发生突变，其HBV DNA复制不受影响但失去HBeAg转译能力[10-12]。该结果进一步印证了HBeAg在乙肝患者治疗效果判定中的局限性。本研究HBeAg阳性患者与HBeAg阴性患者HBV-LP阳性率比较，差异无统计学意义，说明HBV-LP不受HBeAg转译状态影响，故可较好地弥补传统HBV病毒学标志物在判断病毒复制状态环节的不足。
在治疗前后HBV DNA、HBV-LP阳性率、定量变化的观察中，可以发现，随着患者治疗时间的增加，其HBV DNA、HBV-LP阳性率、定量均逐渐降低，且HBV-LP阳性率的下降滞后于HBV DNA，其原因为：在一段时间的抗病毒治疗后，患者HBV DNA可出现阴转并伴有Dane颗粒的减少，但此时管状病毒颗粒仍持续存在，故可造成HBV-LP阳性率仍处于较高水平[13-15]。若仅根据患者HBV DNA水平即指导停药，可能因病毒复制能力再次激活造成病情反复，影响治疗效果[16]。此外，Caligiuri等[17]指出，由于HBV DNA检测敏感度有限，当HBV DNA检测结果为阴性时，患者肝脏内仍旧存在一定量具有复制能力的HBV DNA，可能造成抗病毒治疗终点判断及疗效评估的准确性受到影响。因此，在HBV DNA定量检测的基础上，运用HBV-LP检测可进一步了解病毒复制、疾病进展情况，为患者疗效及预后的评估提供更为可靠的参考，从而降低其病情反复甚至进展至肝硬化、肝癌风险[18]。本研究随着治疗时间的增加，HBV-LP评价乙肝治疗效果的特异性逐渐上升，亦说明了上述结论。
綜上所述，HBV-LP含量与乙肝患者体内HBV DNA水平呈正相关，且HBV-LP对病毒复制、疾病进展的监测敏感范围优于HBV DNA定量检测，根据患者血清HBV-LP含量判断其抗病毒治疗效果有望为治疗终点的选择提供更为可靠的证据。
参考文献：
[1]Oehler N，Volz T，Bhadra O D，et al. Binding of hepatitis B virus to its cellular receptor alters the expression profile of genes of bile acid metabolism[J]. Hepatology，2014，60（5）：1483-1493.
[2]Pollicino T，Cacciola I，Saffioti F，et al. Hepatitis B virus PreS/S gene variants：pathobiology and clinical implications[J]. J Hepatol，2014，61（2）：408-417.
[3]高娟娟. 乙型肝炎病毒大蛋白含量与抗乙型肝炎病毒疗效的相关性研究[D]. 青岛：青岛大学，2013.
[4]Klumpp K，Lam A M，Lukacs C，et al. High-resolution crystal structure of a hepatitis B virus replication inhibitor bound to the viral core protein[J]. Proc Natl Acad Sci，2015，112（49）：15196-15201.
[5]Martin P，Dubois C，Jacquier E，et al. TG1050，an immunotherapeutic to treat chronic hepatitis B，induces robust T cells and exerts an antiviral effect in HBV-persistent mice[J]. Gut，2015，64（12）：1961-1971.
[6]李梅，肖华龙，刘洁，等. 乙型肝炎病毒大蛋白时间分辨荧光免疫分析法的建立及应用[J]. 中华核医学与分子影像杂志，2014，34（5）：362-365.
[7]庄辉. 乙型肝炎流行病学研究进展[C]// 慢性乙型肝炎抗病毒治疗难点和热点学术会议. 2009：133-135.
[8]陈金堃. 不同体检人群中乙肝病毒大蛋白的检测意义的探索[D].杭州：浙江大学，2014.
[9]Revill P A，Locarnini S A. New perspectives on the hepatitis B virus life cycle in the human liver[J]. J Clin Invest，2016，126（3）：833.
[10]Liu Y，Li J，Chen J，et al. Hepatitis B virus polymerase disrupts K63-linked ubiquitination of STING to block innate cytosolic DNA-sensing pathways[J]. J Virol，2015，89（4）：2287-2300.
[11]Liang T J，Block T M，McMahon B J，et al. Present and future therapies of hepatitis B：from discovery to cure[J]. Hepatology，2015，62（6）：1893-1908.
[12]Guerrieri F，Belloni L，Pediconi N，et al. Pathobiology of Hepatitis B Virus-Induced Carcinogenesis[M]//Hepatitis B Virus in Human Diseases. Springer International Publishing，2016：95-121.
[13]樊燕，王永忠，郑国军，等. 乙型肝炎病毒E抗原、大蛋白与乙肝病毒DNA的关系[J]. 山东医药，2015，55（1）：41-42.
[14]Zhao J，Zhang Z，Luan Y，et al. Pathological functions of interleukin‐22 in chronic liver inflammation and fibrosis with hepatitis B virus infection by promoting T helper 17 cell recruitment[J]. Hepatology，2014，59（4）：1331-1342.
[15]邵詠，吕惠娟，邢志广. 乙肝HBeAg、前S1-抗原与HBV-DNA相关性研究[J]. 现代预防医学，2015，42（11）：2069-2071.
[16]Désiré N，Ngo Y，Franetich J F，et al. Definition of an HBsAg to DNA international unit conversion factor by enrichment of circulating hepatitis B virus forms[J]. J Viral Hepat，2015，22（9）：718-726.
[17]Caligiuri P，Cerruti R，Icardi G，et al. Overview of hepatitis B virus mutations and their implications in the management of infection[J]. World J Gastroenterol，2016，22（1）：145.
[18]Bertoletti A，Rivino L. Hepatitis B：future curative strategies[J]. Curr Opin Infect Dis，2014，27（6）：528-534.
论文作者:赫俊彩
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2017年第20期
论文发表时间:2017/12/15
标签：乙型肝炎论文; 患者论文; 乙肝论文; 阳性率论文; 抗病毒论文; 治疗效果论文; 相关性论文; 《中国误诊学杂志》2017年第20期论文;