（温州医科大学附属第二医院普外科 浙江温州 325000）
【摘要】目的：探讨花姜酮对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肝损伤的保护作用。方法：将40只SD健康大鼠随机分为4组：假手术组（A组）；重症急性胰腺炎组（B组）；花姜酮（ZER）治疗组（C组），花姜酮对照组（D组）。在制模完成后分别在4h和8h杀死大鼠，测定腹水量，收集大鼠血清，检测血清TNF- α、IL-6、ALT和AMY的水平，并在各组间进行比较。结果：与A组相比，B组的大鼠腹水量、AMY、TNF- α、IL-6、ALT水平差异明显，有统计学意义（P<0.05）。而D组上述的指标较A组差异不明显，无统计学意义（P>0.05）。C组与B组相比上述指标均明显降低（P<0.05），但仍高于A组和D组（P<0.05）。结论：花姜酮对重症急性胰腺炎大鼠肝脏的损害具有一定的保护作用。
【关键词】花姜酮；重症急性胰腺炎；肿瘤坏死因子α；白细胞介素6；血清淀粉酶；丙氨酸氨基转移酶；肝损伤
【中图分类号】 R657 【文献标识码】 A
Protective Effect of Zerumbone on Severe Acute Pancreatitis-Associated Liver Injury in Rats
Zhoulei, Linhaiduo, Zhengzhiqiang. 1 Department of General Surgery, The Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College. Zhejiang Wenzhou 325000
Abstract：Objective: To investigate the Protective effect of zerumbone on severe acute pancreatitis-associated Liver injury in rats. Method: forty Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into four groups: Shome operation group, Severe acute pancreatitis group, Zerumbone treatment group, Zerumbone control group and killed the rats in batch at 4h and 8h after finished operation. Then we measured the ascites, serum ALT, AMY, TNF-α and IL-6 levels. Results Compared with group A, the serum TNF-α, IL-6, ALT and AMY levels in group B were increased obviously. Compared with group B, the serum TNF-α, IL-6 and AMY levels decreasing in rats were induced by the usage of Zerumbone (P<0.05). Conclusion Zerumbone has a protective effect on severe acute pancreatitis-associated liver injury.
Key words: Zerumbone, severe acute pancreatitis, tumor necrosis factor-alpha, interleukin-6, AMY, ALT, Liver injury
急性胰腺炎(Acute Pancreatitis, AP)是一种常见的临床疾病，以胰腺出血、坏死等一系列炎症损害为主要表现，病情严重，死亡率较高[1]。尤其是重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)往往可导致机体出现骤死[2]。SAP常伴有胰腺外脏器的损害，其中尤以并发肝脏损害最为常见，病人的死亡率明显升高。已有研究报道花姜酮（ZER）对急性胰腺炎的胰腺损伤是有一定的保护作用[3]，但对其他脏器的保护作用研究不多。本研究主要通过观察ZER应用对急性胰腺炎大鼠血清酶学指标的变化，从而探讨ZER对肝损伤的保护作用，为进一步探讨ZER防治SPA大鼠肝损伤提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物分组
选取雄性的健康SD大鼠40只（温州医科大学动物实验中心提供），SPF级，体重在250-300g之间，随机原则分为4组，每组为10只。分别为：假手术组；重症急性胰腺炎组；花姜酮治疗组；花姜酮药物对照组，分别用A-D编码。
1.2 急性胰腺炎大鼠模型制备
大鼠在准备建模前12h需要禁食但可以不禁水，大鼠腹部皮下注射0.5%戊巴比妥钠进行麻醉，剂量按35 mg/kg。依照改良过的Aho方法[4]，进行胰管内逆行注射5%牛磺酸钠（剂量1 ml/kg，注射速度0.1 ml/min），制备大鼠急性胰腺炎模型，花姜酮治疗组需要在建模前30分钟由股静脉穿刺给予10mg/kg[5]的花姜酮溶液。正常对照组和花姜酮药物对照组操作同模型组但不注入牛磺酸钠，改为注射生理盐水，花姜酮药物对照组于模型制备前30分钟也需要股静脉穿刺给予10mg/kg的花姜酮溶液。
1.3 观察指标及测定方法
1.3.1 腹水量测定
准备洁净干棉球，先用电子分析天平称取重量。将大鼠腹腔打开，用干棉球吸附腹水，然后重新称取湿棉球重量，计算腹水的重量：腹水量＝湿棉球重量－干棉球的重量。
1.3.2大鼠血清指标测定
各组大鼠在制模后4h 和8h 分别处死5只，取静脉血5 ml，经离心后将血清保存于-70℃，血清AMY、ALT、TNF- α及IL-6含量用ELISA 方法进行测定。
1.4 统计学处理
计量资料用均数± 标准差(± s)表示，使用SPSS 20.0进行统计分析。两组之间均数的比较采用t检验，p<0.05表示差异有显著性。
2 结果
2.1 腹水量测定
假手术组（A组）及花姜酮药物对照组（D组）大鼠腹腔均只有少许无色透明腹水，且两者之间差异无统计学意义（P>0.05）；重症急性胰腺炎组（B组）大鼠腹腔内有较多腹水，且随着时间延长，腹水量逐渐增多，颜色逐渐变成红褐色，显著高于A组（P<0.05）；花姜酮预处理组（C组）大鼠内虽也有较多腹水，但与B组比较已经明显减少（P<0.05）。见图1
注：#、*、**：分别与B组比较
2.2 各组大鼠血清酶学指标比较
B组的大鼠血清TNF –α、IL-6、ALT及AMY较A组明显升高（p<0.05）。与B组相比，C组在造模前使用了花姜酮处理，其血清TNF- α、IL-6、ALT以及AMY的水平均出现了比较明显的下降，差异显著，具有统计学意义（p<0.05）。D组与A组差异无统计学意义（P>0.05）。（见表1，2，3，4）
表1 各组间不同时间点血清T N F -α浓度变化的比较
注：#、*、**：分别与B组比较
表3 各组间不同时间点血清AMY浓度变化的比较
注：#、*、**：分别与B组比较
3 讨论：
急性胰腺炎是一种因为机体体内大量炎症细胞受到活化，导致了大量炎症介质产生并且进入到血液中，从而引起了体内连锁及放大的炎症效应[6]。大量的细胞因子参与了体内的这种炎症效应，这些细胞因子在AP发病过程中相互促进，亦相互拮抗，形成复杂的细胞因子网络，导致急性胰腺炎患者血清中T N F –α、IL-8等细胞因子增多[7]。
肝损伤是重症急性胰腺炎(SAP)胰外脏器损伤的重要表现，而且肝脏是人体内十分重要的器官，一旦受损就可能使病情恶化，最终可能诱发全身多器官功能障碍甚至死亡[8]。肝脏损伤时由于肝细胞的大量破坏，会导致ALT渗入血液，导致血清ALT含量升高，而且肝脏的对毒性物质、生物活性物质的解毒和清除功能受损，致病因子可以突破肝屏障进入体循环，引起全身组织、器官损伤发生和加重[9]。因此，对SAP并发的肝脏损伤的保护研究是目前的热点。
ZER是从东南亚姜科植物红球姜中提取得到一种天然物质[10]。已有研究表明花姜酮可以通过环氧合酶、白介素等的抗炎作用，从而起到治疗动物溃疡性结肠炎等疾病[11]。有学者证实静脉注射ZER可以通过抑制核转录因子－κB的表达，进而抑制炎症因子的活化激活，达到减轻炎症反应的目的[12]。同时也有报道ZER可以使AP模型大鼠的胰腺酶及IL-6、TNF-α等细胞因子的降低并可减轻胰腺水肿等的作用[3]。
本研究首先构建了SAP大鼠模型，并对各组的血清学指标进行监测，结果显示随着时间延长，SAP组大鼠反映胰腺功能的血清学指标TNF-α、IL-6、及AMY逐渐升高，说明胰腺原位损害进行中。同时血清ALT值也随着造模时间延长逐渐增加，腹腔内出现较多量腹水，说明SAP时肝脏功能损害逐渐加重。与SAP组相比较，ZER治疗组因在术前静脉给予ZER，该组大鼠腹水量减少明显，胰腺酶学和肝脏酶学指标也均出现了明显的下降，说明药物对胰腺炎及肝损伤均有保护作用。同时ZER对照组的各项血清学指标检测在与假手术组做对照后，发现差别无统计学意义，这表明ZER对大鼠没有明显的副作用。
总之，ZER能抑制炎症反应，有效降低大鼠血清TNF-α、IL-6及AMP的水平，对胰腺炎有一定的疗效。同时ZER又可以降低血清ALT的量，对肝脏起到一定的保护作用。但药物是如何对肝脏起到保护作用还需要后续实验的进一步确定。
参考文献：
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论文作者:周磊,林海舵,郑志强
论文发表刊物:《中医杂志》2016年12月
论文发表时间:2017/6/1
标签：胰腺炎论文; 大鼠论文; 血清论文; 腹水论文; 损伤论文; 胰腺论文; 肝脏论文; 《中医杂志》2016年12月论文;