贵州省中医医院 贵州中医药大学第一附属医院 贵州贵阳 550001
【摘 要】目的：评价在淋巴结结核病理诊断中采取免疫组织化学与PCR技术的临床价值，旨在为临床诊疗提供参考意见。方法：选择我院2017年3月-2019年3月期间收治的手术切除淋巴结结核患者（观察组=40例），与非淋巴结结核患者（对照组=30例）。分别采用免疫组织化学与PCR技术对两组患者石蜡包埋组织标本进行检测，以病理诊断作为金标准，比较两种检验技术的价值。结果：三种检测方式特异度均为100%，免疫组织化学染色与PCR检测符合率分别为72.86%、80.00%明显高于抗酸染色的57.14%，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：免疫组化与PCR检测的敏感度高，且具有操作简单以及检测速度快等特点，因而可在淋巴结结核病理诊断中得到广泛应用。
【关键词】PCR技术；免疫组织化学；淋巴结结核病；病理诊断
在肺外结核中，淋巴结结核作为其中较为常见的结核病，该病的确诊以病理学诊断为主，其主要的病理学组织特征为肉芽肿性炎症，但因其他非感染性与感染性并也会造成上述病理变化情况，因而需联合其他检测手段予以明确[1]。免疫组织化学是临床上对疾病诊断与分型、治疗方案制定的重要方式与手段，该种检测方式主要是对蛋白进行检测，敏感性高，且便于观察。而随着基因检测技术的发展，PCR技术可对结核分枝杆菌特异基因序列进程检测，从而在临床诊断中为结核病诊断提供有效依据[2]。基于此，本文选择我院2017年3月-2019年3月期间收治的40例手术切除淋巴结结核与30例非淋巴结结核患者。分别采用免疫组织化学与PCR技术进行检测，以病理诊断作为金标准，比较其检验价值。现对研究内容报告如下：
1 资料与方法
1.1一般资料
试验对象选自2017年3月-2019年3月，手术切除淋巴结结核患者（观察组=40例），与非淋巴结结核患者（对照组=30例）。结核病纳入标准[3]：（1）符合《中国结核病病理学诊断专家共识》中Ⅰ类或Ⅱ类诊断标准；（2）均经病原菌、病理学或者术后化学治疗证实为淋巴结结核，以病理结果为金标准；（3）伦理委员会批准同意。排除标准：（1）无法配合参与治疗患者；（2）合并严重精神障碍患者；（3）合并恶性肿瘤患者。观察组：男、女性患者比例26：14例；患者年龄16-78岁，中位数（52.46±6.79）岁；包括36例颈部淋巴结结核，8例纵隔淋巴结结核与6例腋窝淋巴结结核。对照组：男、女性患者比例18：12例；患者年龄18-75岁，中位数（53.28±6.88）岁；1例腋窝淋巴结，1例腹股沟淋巴结，1例纵隔淋巴结，3例颈部淋巴结，3例淋巴结反应性增生，6例坏死性淋巴结炎，7例淋巴结结节病与8例淋巴瘤。
1.2方法
将采集到的标本经4%中性甲醛进行固定，并进行常规石蜡包埋、切片以及HS染色，经显微镜对组织学形态进行仔细观察。采取传统抗酸染色，并进行如下两种方式检验：①免疫组织化学染色。采用一步法对标本进行染色。抗体A985B—pAbl作为一抗，将稀释比例控制为1：2000。染色前需对切片进行高压抗原热修复，且染色的具体步骤需严格按照试剂盒的说明书进行，DAB显色后再予以苏木素的对比染色。在每批染色的过程中需采用已知的A985B阳性片作为其阳性对照，阴性对照则采用PB。阳性特点如下：呈现为小斑片、点簇状或者小雪片状的着色分布状况；着色部位最深颜色在中心，四周颜色逐渐变浅；常在坏死组织及周边部位表达[4]。②PCR检测。石蜡切片厚4um，根据患者组织的实际大小切5-10片左右，将其放入至1.5ml离心管中，并根据说明书进行操作。PCR反应条件为：370C 2min、940C 2min进行40个循环，并予以600C荧光检测。FAM标记为荧光探针，均设置阴性与阳性对照。判定结果：阳性为Ct≤38，阴性则为无扩增曲线或Ct=40，当38<Ct<40时则需对数据进行重新测定，若重新测定的Ct仍处于上述范围，且扩增曲线呈现为S型时则可判定为阳性，反之则为阴性。
1.3观察指标
比较不同检测方式在两组患者病理标本中的检测结果及符合率。
1.4统计学数据分析
基于SPSS21.0软件建立模型对患者研究数据，计数型指标以n、%表示，计量型指标以（x±s）表示，以（x2）和（t）检验。P<0.05——表示2组患者指标差异明显。
2 结果
三种检测方式在对照组非结核患者中均为阴性，因而特异度均为100%，免疫组织化学染色与PCR检测符合率分别为72.86%、80.00%明显高于抗酸染色的57.14%，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。
3 讨论
对肺外结核诊断主要手段为病理学诊断，现阶段临床主要以抗酸染色以及形态学检查为主，但传统抗酸染色法操作复杂且敏感度低[5]。本次研究中，免疫组织化学染色与PCR检测符合率分别为72.86%、80.00%明显高于抗酸染色的57.14%，差异具有统计学意义（P<0.05）。这两种方法的敏感度较高，原因在于免疫组织化学染色检测的为蛋白质，因其表达不仅仅局限于Mtb细胞内，所以可提高诊断的敏感性。而在扩增反应结束后PCR检测能够对数据立即进行自动分析，因而在检验中的重复性及客观性较高。
综上所述，与传统的抗酸染色相比免疫组化与PCR检测的敏感度高，且具有操作简单以及检测速度快等特点，因而可在淋巴结结核病理诊断中得到广泛应用。
参考文献：
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论文作者:张雯菁
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2019年第7期
论文发表时间:2019/9/17
标签：淋巴结论文; 结核论文; 患者论文; 免疫论文; 组织论文; 病理论文; 化学论文; 《中国医学人文》(学术版)2019年第7期论文;