王秀云[1]1998年在《重症肌无力病人外周血单个核细胞糖皮质激素受体及其mRNA的研究》文中研究表明重症肌无力(MG)是重点累及神经—肌肉接头处突触后膜上乙酰胆碱受体的、主要由乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)介导的、细胞免疫依赖性、补体参与的自身免疫性疾病。糖皮质激素(GC)是有力的免疫抑制剂，已在临床上广泛应用于MG及其它自身免疫性疾病的治疗。已知GC的作用是通过与糖皮质激素受体(GR)高亲和力的结合所介导。临床上不同个体对GC治疗的反应不同，显效所需时间各异，用药后有些病人还会出现一过性加重。系统地研究MG病人GR及其mRNA表达，可能会有助于上述一系列问题的解释。GR在重症肌无力患者的研究有少量报道，对GRmRNA的研究尚未见报道。 本研究旨在通过对重症肌无力患者PBMC GR及其mRNA的深入、系统的研究，阐明MG患者GR的变化规律及其变化机制，探讨糖皮质激素治疗MG病人疗效不同的机制，以寻找指导临床治疗选择的依据。 材料和方法：取49例MG病人及20名健康对照的外周血单个核细胞(PBMC)，运用多点法及单点法放射配体结合试验和Scatchard分
殷剑, 许贤豪, 张星虎, 文诗广, 刘江红[2]2008年在《新发病重症肌无力患者外周血单个核细胞糖皮质激素受体水平与糖皮质激素疗效的研究》文中进行了进一步梳理目的探讨外周血单个核细胞(PBMC)糖皮质激素受体(GR)水平对预测糖皮质激素(GC)治疗(但未经其他免疫治疗)新发病重症肌无力(新发病MG)患者疗效的价值。方法收集100例新发病MG患者,用3H-地塞米松放射配体法测定PBMC中的GR数量,用ELISA法检测血清乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)水平。肌无力严重程度和临床疗效判定采用临床绝对和相对记分法。结果(1)100例新发病MG患者,免疫治疗前PBMC GR数量[(3633±1711.2)位点/细胞]明显低于健康对照组[(5563±1232.6)位点/细胞],其血清AChR-Ab水平[(3.79±0.74)nmol/L]明显高于健康对照组(<2.996 nmol/L)(均P<0.01)。(2)20例新发病MG患者仅经GC治疗,治疗至少1个月后其PBMC GR水平和血清AChR-Ab水平均下调,分别为(1928.97±1025.47)位点/细胞和(3.05±0.78)nmol/L。(3)治疗前GR数量与临床相对评分呈正相关(r=0.41,P<0.05),GR数量下调与AChR-Ab下调呈正相关(r=0.478,P<0.05)。结论(1)新发病MG患者PBMC GR数量低于正常。(2)可用MG患者治疗前PBMC GR数量预测GC疗效,且治疗前PBMC GR数量高者疗效好。
殷剑, 许贤豪, 张华, 国红, 王虹峥[3]2004年在《新发病重症肌无力患者外周血核细胞糖皮质激素受体与糖皮质激素疗效的研究》文中研究说明目的本研究旨在观察新发病尚未经免疫治疗MG患者(新发病的MG患者)的外周血单个核细胞(PBMC)糖皮质激素受体(GR)、血清可溶性白介素-2受体(sIL-2R)及乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)水平;经GC治疗后这些参数的变化情况;GC治疗的可能机制;神经、内分泌、免疫网络内各系统间的互动。方法MG组:收集回顾1999～2001年卫生部北京医院神经内科门诊新发病MG患者共计100例,
矫毓娟, 许贤豪, 张华, 殷剑, 王红[4]2007年在《重症肌无力患者外周血单个核细胞糖皮质激素受体α同型与激素疗效的关系》文中认为目的观察重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞(PBMC)糖皮质激素受体α同型(hGRα)含量或核转位率与激素疗效的关系。方法收集MG患者51例、其他神经免疫性疾病(ONID)患者16例及健康对照者11名,分别提取外周血单个核细胞(PBMC)细胞核和细胞质蛋白质,采用生物素-亲和素-酶联免疫吸附试验(ABS-ELISA)定量测定经体外地塞米松(DEX)作用前、后PBMC细胞质和细胞核内hGRα含量,并计算hGRα核转位率。应用临床相对记分法评价激素疗效。结果未经DEX处理时MG和ONID组PBMC细胞质hGRα含量均低于健康对照组(P<0.05),经DEX处理后MG组其hGRα含量明显低于健康对照组(P<0.01)。MG患者的性别、年龄、伴发胸腺疾病情况和hGRα含量以及hGRα核转位率间均无明显相关(P>0.05)。Osserman分型Ⅳ型MG患者hGRα核转位率低于其他分型者(P<0.05)。病程≥2年的MG患者hGRα核转位率明显低于病程≤6个月和病程6个月~2年的MG患者(均P<0.01)。MG患者PBMC的细胞核内hGRα含量和hGRα核转位率与激素治疗2周(n=51,r=0.913,r=0.907,P<0.05)和4周(n=47,r=0.929,r=0.911,P<0.05)的临床相对评分间均呈正相关。结论经DEX作用后PBMC细胞核内hGRα含量和激素诱导的hGRα核转位率与MG患者对激素的敏感性间呈正相关,两者可作为预测激素疗效的实验室指标。
谢琰臣, 矫毓娟, 许贤豪, 王红, 殷剑[5]2007年在《重症肌无力患者外周血单个核细胞中糖皮质激素受体不同亚型表达和意义》文中进行了进一步梳理目的探讨重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞(PBMC)中两种糖皮质激素受体(GR)亚型表达水平及其与糖皮质激素疗效的关系。方法在糖皮质激素治疗之前留取 MG 患者PBMC 并涂片,根据糖皮质激素治疗 MG 的不同疗效分组,通过免疫细胞化学方法观察各组 GRα和GRβ阳性细胞比例并评分,分析 GRα和 GRβ表达量与糖皮质激素疗效的关系。结果对照组、糖皮质激素治疗敏感组和依赖组 PBMC 中 GRα阳性细胞计分差异无统计学意义,3组计分明显高于糖皮质激素治疗抵抗组(P<0.01);对照组、糖皮质激素治疗敏感组和糖皮质激素治疗抵抗组 PBMC 中GRβ计分差异无统计学意义,3组计分明显低于糖皮质激素治疗依赖组(P<0.01)。结论 MG 患者PBMC 中 GRα表达降低和 GRβ表达增高均与糖皮质激素疗效降低有关。
刘继峰[6]2003年在《多发性肌炎/皮肌炎患者外周血单个核细胞中糖皮质激素受体及HSP90 mRNA表达与糖皮质激素疗效相关性的研究》文中指出目的 多发性肌炎和皮肌炎(polymyositis／dermatomyositis，PM／DM)均属于特发性炎症性肌病，该病主要以近端肌无力及骨骼肌非化脓性炎症为特征，如肌炎同时伴有多种形态的皮疹者，称为皮肌炎。PM／DM的病因及发病机制尚未完全明确，目前研究显示PM是以细胞免疫为主、DM则是以体液免疫为主的自身免疫性疾病。糖皮质激素(glucocorticoid，GC)是下丘脑-垂体-肾上腺轴的关键分子，除具有重要的生理作用外，还具有很强的免疫抑制作用，临床上被广泛用于自身免疫性疾病的治疗。GC是目前治疗PM／DM的首选药物之一，但不同患者对GC的疗效不同，约1／5～1／3的PM／DM患者对GC治疗不敏感，甚至对GC治疗抵抗。GC抵抗病例的出现对临床治疗提出了严峻挑战，但对其确切机制尚不十分清楚。目前国内外尚未见有关PM／DM患者对GC治疗不敏感，甚至抵抗机制的系统研究。 GC的重要生理功能和药理作用是由细胞浆中的糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor GR)介导的。GC-GR紊乱与多种自身免疫性疾病相关。许多研究显示GR数量的多少同GC的临床疗效密切相关，GR数量多者对GC治疗敏感，而GR数量少者则对GC治疗不敏感，甚至抵抗。在无GC作用时，GR是与两分子热休克蛋白90(heat shock protein 90，HSP90)结合形成复合体存在于细胞浆中，GR的DNA结合区被HSP90遮盖，故不能与DNA结合。HSP90与GR的结合使GR处于比较稳定的非活化状态，并能保证受体(GR)与配体(GC)呈高亲和力和特异性结合。当GR和GC结合后GR发生构相改变而与HSP90解离，并且发生二聚化，该过程称为GR的活化。活化的＊ 二聚体与＊ 的复合物转位进人细胞核内而介导＊的抗炎和免疫抑制等作用。因而HSpoo在GR的形成和功能发挥等方面起重要作用，其变化可影响GR的活性。HSpoo表达升高可在基因水平负性调节GR的活性，当HSpoo／GR之比处于合适状态时为正性调节，而HSpoo／GR之比过高或过低均为负性调节，并且 HSpoo在组织中的分布决定GC作用的敏感性和特异性。在炎症和自身免疫等病理情况下HSppo表达升高。 GR基因在转录过程中的拼接改变产生高度同源的两个不同表位a和p。GRa即经典的GR，可与GC结合后活化，从而介导切的重要生理和药理作用；GRP则为GR的变异体形式，不能与GC结合，也不具有转录激活作用。细胞转染研究显示GRp是GR。的内源性抑制因子，并且在一些GC抵抗型患者外周血单个核细胞（PBMCs ）中GRp mRNA表达水平升高，提示GRp表达水平升高可能导致GC抵抗。进一步研究发现GRS可以以剂量依赖性的方式抑制 GRa的转录活性，但只有 GRP超过 GRa 5－10倍摩尔浓度时才可观察到对GRa的抑制作用；然而有研究发现即使GR6超过GRd 倍摩尔浓度，对GRa也无抑制作用。因而GRp是否能够通过抑制GR。的功能而影响GC疗效尚有待于进一步研究。 但上述研究有的只是用放射免疫配体方法从整体上检测GR数量的变化，而未区分GR的两个不同表位a和p，也未对GR的重要分子伴侣HSP90进行研究。有的虽对GRa和GRP进行了研究，但结果不一致，甚至相反。目前国内外尚未见有关PM／DM患者PBMCS中GR、HSpoo、GR。及GRp mRNA表达的研究报道。 近年来研究表明：神经内分泌系统对免疫系统具有重要的调节作用。神经系统通过其广泛的外周神经突触及神经细胞分泌的神经递质和众多的内分泌激素，甚至还有细胞因子共同调控免疫系统的功能；而免疫系统则通过免疫细胞产生的多种细胞因子和激素祥物质反馈作用于神经内分泌系统。这种双向的复杂作用使两个系统内或系统间得以相互交通和调节，共同维持机体的稳态。当这种稳态被各种外来或内在的因素打破时，某些病理过程和疾病就可能出现。多种自身免疫性疾病存在神经内分泌的异常。神经肽Y（neuroPePtide Y，NPY）在一内啡肽（beta－endorphin，p－EP）和降钙基因相关肽（calcitonin gene－related peptide，CGny）作为重要的神经肽， ·2·与一些自身免疫性疾病的关系已有报道，但NPY和p－EP与PM／DM的关系国内外尚未见报道。 我们采用逆转录一聚合酶链反应（RT－PCR）方法对28例PM／DM患者PBMCs中GR、HSpoo、GRa和GRp InRNA的表达水平进行检测，以探讨其表达水平同PM／DM患者对GC疗效的相关性。同时采用放射免疫分析法检测上述患者血清皮质醇和血浆中NPY在一EP及CGRP的含量，以探讨其在PMIDM患者中的变化及意义。 材料与方法 一、研究对象 二．病例选择：28例PM／DM患者选自我院皮肤科门诊和住院患者，均符合 1975年 Bohan和 Peter的 PM／DM诊断标准。其中 PM 11例，DM 17例；男12例，女16例；年龄21－68岁；初发者20例，复发者8例；发病时间5天一2年。根据临床、实验室检查及辅助检查均处于疾病活动期，并除外严重肝脏疾病和肿瘤。近二月内未使用过GC治疗。20例正常对照选自健康献血员，性别和年龄与患者相比无显著性差异。 2．GC疗效的判定：PM／DM患者按泼尼松 1叫．sing·kg－‘·
庄战强, 许文华, 吴元波, 张翠萍, 李庆[7]2015年在《糖皮质激素对重症肌无力患者外周血调节性T细胞中Foxp3及其胞内CTLA-4表达的影响》文中研究指明目的研究糖皮质激素治疗重症肌无力(MG)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)中Foxp3和胞内CTLA-4的表达水平的变化。方法收集MG患者34例,分为非治疗组8例和糖皮质激素治疗组26例。另将20例健康者设为对照组。采用流式细胞仪检测分析患者和健康者外周血CD4+CD25+Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4的变化。结果 1 MG非治疗组患者外周血CD4+CD25+Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4水平较对照组显著下降(P<0.05);2糖皮质激素治疗能显著提升CD4+CD25+Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4表达比例(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05);3 CD4+CD25+Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4表达呈正相关性(r=0.870,P<0.001)。结论 MG患者外周血CD4+CD25+Treg Foxp3和胞内CTLA-4呈低表达,糖皮质激素治疗能显著提升Foxp3和胞内CTLA-4表达水平,但尚未达正常者免疫状态。
谢琰臣[8]2005年在《重症肌无力患者外周血单个核细胞糖皮质激素受体不同亚型表达与激素疗效的关系》文中进行了进一步梳理研究背景： 重症肌无力(myasthenia gravis，MG)是自身免疫性疾病，糖皮质激素(glucocorticoid，GC)是治疗MG的重要药物，GC主要通过与其胞浆受体(glucocorticoid receptor，GR)结合并转位到胞核中发挥作用。近几年研究发现自身免疫病患者中GR的两种亚型(GR α和GR β)表达有异常，并且可能与GC疗效有关，但目前不同学者、在不同疾病中得到的结论不一致，甚至相互矛盾，在MG研究中尚未见关于GR β方面的研究报道。 目的： 本研究旨在了解GC治疗MG的疗效及副作用，观察外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMC)中GR α和GR β的表达情况，探讨GR α和GR β表达量、以及治疗后GR α核转位率与GC疗效的关系。 方法： 首先应用临床评分随访观察64名大剂量GC冲击后短程治疗、83名大剂量GC冲击后长程治疗和70名非GC冲击治疗患者的病情变化及副作用，并根据GC疗效将MG患者分为GC治疗敏感组、GC治疗依赖组和GC治疗抵抗组；接着通过免疫细胞化学方法观察三组MG患者和健康对照组PBMC中GR α和GR β阳性细胞比例并评分，分析GR α和GR β表达量与GC疗效的关系；最后先分别提取PBMC细胞浆和细胞核中总蛋白并定量，然后应用免疫印迹法(Western Blot，WB)检测GR α和GR β的存在方式、表达水平及GC治疗后GR α的核转位率，探讨GR α核转位率与GR β表达以及GC疗效的关系。
张璘洁[9]2016年在《视神经脊髓炎谱系疾病患者外周血B细胞研究》文中进行了进一步梳理目的视神经脊髓炎谱系疾病(Neuromyelitis Optica Sprectrum Disorders,NMOSD)是一种由抗体介导的中枢神经系统自身免疫性星形胶质细胞病,是造成我国青壮年神经系统功能残障的重要疾病之一。本研究拟通过检测急性期NMOSD患者及接受大剂量甲基泼尼龙(High dose methylprednisolone,HDMP)冲击治疗后外周血B细胞及其亚型:调节性B细胞(Regulatory B cells,Bregs)、分泌白介素10的B细胞(B cells secreting interleukin-10,B10s)、记忆B细胞(Memory B cells,Bmems)、浆细胞等细胞水平,分析急性期NMOSD患者与HCs相比外周血B细胞及其亚型的变化,探讨HDMP冲击治疗对急性期NMOSD患者外周血B细胞及其亚型的影响。分析NMOSD患者应用优化小剂量的利妥昔单抗(Rituximab,RTX)治疗的效果及启动RTX治疗的合理时机,分析外周血B细胞变化与病情的相关性,并检测NMOSD患者接受RTX治疗后外周血中抗利妥昔单抗抗体(Antirituximab antibody,ARA)水平,探讨ARA产生对NMOSD患者RTX治疗效果的影响。方法纳入急性期NMOSD患者13例,与10例年龄性别匹配的HCs。提取NMOSD患者HDMP治疗前后及HCs外周血单个核细胞(Peripheral blood monouclear cells,PBMC),应用流式细胞仪检测分析外周血中B细胞及亚型的比例及数量。纳入接受优化小剂量RTX治疗的患者16例,收集患者人口学、临床资料、B细胞监测情况,对启动RTX早晚、不同时期、不同残疾状态的患者的治疗效果进行比较和分析。应用酶联免疫吸附测定法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒对16例应用RTX治疗预防复发的患者血标本进行ARA测定,并对ARA阳性及阴性的患者进行治疗效果的比较和分析。对其中6例患者进行随访,动态监测B细胞并分析。结果1.急性期NMOSD患者外周血CD19+B细胞数量及频率较HCs并无明显差异(p>0.05),CD19+CD24hi CD38hi Bregs数量及频率降低(p<0.05),CD19+IL-10+B10s细胞数量及频率降低(p<0.05),CD19+CD27+Bmems数量及频率无明显差异(p>0.05),CD19+CD138+浆细胞数量及频率升高(p<0.05)。2.急性期NMOSD患者外周血CD19+CD24hi CD38hi Bregs数量及频率在接受HDMP冲击治疗后较HDMP治疗前相比降低(p<0.05),CD19+IL-10+B10s数量及频率无明显变化(p>0.05),CD19+CD27+Bmems数量及频率升高(p<0.05)。CD19+CD138+浆细胞数量及频率降低(p<0.05)。3.重复小剂量的RTX治疗可以显著降低NMOSD患者的复发次数、年复发率(Annual relapse rate,ARR)及残疾程度(p<0.05)。距离首次发病1年内或1年后接受RTX治疗的患者各临床指标间并无明显差异(p>0.05)。缓解期接受RTX治疗的患者比急性期接受治疗的患者发作次数、ARR及扩展开残疾状态量表(Expanded disability status scale,EDSS)均显著好转(p<0.05)。无论在启动RTX治疗时EDSS评分高低,接受RTX治疗后患者发作次数、ARR及残疾程度均显著好转(p<0.05)。4.接受小剂量的RTX治疗的6例NMOSD患者治疗前后CD19+CD24hiCD38hiBregs数量及频率并无显著差异(p>0.05),RTX治疗反应好的3例患者中Bregs回升较治疗反应差的患者快(p<0.05)。CD19+CD27+Bmems数量及频率在RTX治疗后降低(p<0.05),而在Bmems删除及回升方面,治疗效果好者与效果差者两组间并无显著差异(p>0.05)。5.16例接受RTX治疗的患者中3例出现ARA,并且ARA阴性患者于治疗前后的复发次数比ARA阳性患者显著降低(p<0.05),但残疾程度在两组中均无显著变化(p>0.05)。ARA的出现使得患者输注RTX的周期缩短、频率增加,其中1例ARA阳性患者出现了严重的并发症。结论:1.尽管急性期NMOSD患者外周血CD19+B细胞与HCs比较并无显著差异,但是具有调节功能的CD19+CD24hiCD38hiBregs细胞及CD19+IL-10+B10s细胞数量减少,可能调节功能受损。在NMOSD患者急性发病中CD19+CD138+浆细胞数量升高并分泌自身抗体,发挥致病作用。2.尽管HDMP抑制了CD19+CD24hi CD38hi Breg细胞数量及频率,但对能分泌IL-10的B细胞数量与频率没有影响,仍可通过分泌IL-10发挥免疫调节功能。HDMP可能不能够抑制Bmems的增殖,不能控制疾病的复发。HDMP能够减少CD19+CD138+浆细胞产生致病性抗体,从而控制病情进一步进展。小剂量糖皮质激素(Glucocorticoid,GC)不能明显抑制与体液免疫直接相关的Bmems及浆细胞数量及频率,单用小剂量GC可能不能完全控制NMOSD疾病复发。3.优化小剂量的RTX在NMOSD患者中预防复发有效,能够减少复发次数、ARR并改善残疾程度。NMOSD患者无论是否能在首次发病1年内启动RTX治疗,在启动治疗后患者均可获益。NMOSD患者在缓解期启动治疗临床反应更好。Bregs回升速度快慢可能反映RTX治疗反应好坏,Bmems回升速度可能与RTX治疗疗效无关。4.在应用小剂量RTX间歇补充治疗预防NMOSD复发的患者血浆中存在ARA。接受RTX治疗的NMOSD患者,血浆中是否可检测到ARA与NMOSD临床特点不相关。ARA的出现可能不影响RTX删除外周血B细胞的药物功能,但可能加速RTX降解或封闭其有效蛋白,相对减弱其药效。监测外周血CD19+细胞频率,调整RTX补充治疗间隔,仍可维持RTX控制NMOSD复发的临床疗效。ARA的出现可能诱导并发症的发生。
张星虎, 许贤豪, 王红, 王秀云, 黄煜敏[10]2000年在《重症肌无力患者糖皮质激素受体的观察》文中研究指明目的 旨在观察重症肌无力 (MG)患者外周血单个核细胞 (PBMC)糖皮质激素受体 (GR)的变化及其变化机制。方法 193例MG患者、10例其他神经免疫性疾病患者、6 6例脑血管病患者及35例正常对照 ;采用3H 氟美松放射配体法测定PBMCGR数目及亲和力 ,狭缝印迹法测定PBMCGRmRNA含量。结果 MG患者PBMC的GR数及其mRNA均显著降低 (P <0 .0 1) ,而且GRmRNA的含量与GR数目密切相关 (r=0 .89)。但GR亲和力无明显异常。MG患者及正常人的PBMC分别在正常及患者血浆中短期培养后GR数无明显改变。结论 MG患者的GR数是低的 ,其降低可能是由于其mRNA转录水平有障碍
参考文献：
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[3]. 新发病重症肌无力患者外周血核细胞糖皮质激素受体与糖皮质激素疗效的研究[C]. 殷剑, 许贤豪, 张华, 国红, 王虹峥. 中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编. 2004
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