韩涛[1]2003年在《重肌灵抗重症肌无力的主要药理作用及作用机制的研究》文中研究说明重肌灵是河北以岭医药研究院临床长期用于治疗重症肌无力（Myasthenia gravis，MG）的有效中药复方，主要由黄芪、人参、鹿茸等组成，临床治疗上千例MG患者，取得比较好的疗效，具有温理奇阳，扶元振颓作用。重症肌无力（MG）是重点累及神经一肌肉接头处突触后膜上乙酰胆碱受体，主要由乙酰胆碱受体抗体介导的，T细胞依赖性、补体参与的自身免疫性疾病。实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental Autoimmune myasthenia gravis，EAMG)被认为是研究MG的重要动物模型，目前公认的EAMG模型是用电鳐（Torpedo）或电鳗的电器官提取，纯化的N2-乙酰胆碱受体(Acetylcholine receptor,AchR)作为抗原免疫动物而成。本论文以Lewis大鼠建立EAMG模型，从与MG发病机理密切相关的N2AchR抗原特异性细胞免疫和体液免疫入手，将研究重点集中在MG发病机制中最重要的环节Th亚型细胞及Th亚型细胞分泌产生细胞因子IL-4、IFN-r；胸腺又是T细胞发育成熟的部位，而引起MG、EAMG的直接因素是体内产生抗N2AchR抗体。所以将胸腺—Th亚群—IL4、IFN-r—抗N2AchR抗体为轴心，运用3H-TdR掺入、ELISA、原位杂交检测及细胞凋亡检测技术，从整体、组织、细胞、分子水平深入研究重肌灵抗重症肌无力的作用机理。主要研究内容如下：1．大鼠EAMG模型建立 从电鳐电器官中提取N2AchR粗提物，N2AchR粗提物和完全福氏佐剂等量混合，模型组大鼠尾根部，足垫部，背部皮下多点注射上述含N2AchR抗原液0.5ml/只，分别于实验的第1日、第14日、第30日共免疫3次。于未次免疫的19-21日，从临床症状、体重、肌力、运动能力及肌电、肌肉中N2AchR损失率及血中抗N2AchR抗体滴度来评价模型是否成功。结果表明，模型组大鼠上述指标与正常组、佐剂组相比，均有显著差异P<0.01，说明模型建立成功。用本方法建立的模型经济、成功率高，方法易于普及，在临床症状，病理表现等方面与人类MG相似，可用来免疫大量动物，进行MG发病机理及药效学研究。2．重肌灵对EAMG大鼠主要药效学研究 用N2AchR粗提物加完全福氏佐剂方法免疫Lewis大鼠，制备EAMG大鼠模型。观察重肌灵预防给药对EAMG大鼠的影响。重肌灵大中剂量（6.56g/kg、3.28g/kg）可明显改善EAMG大鼠临床症状（P<0.01和P<0.05），对EAMG组大鼠体重有提高作用；对大鼠攀网研究显示重肌灵大中剂量组能显著提高EAMG大鼠肌力（P<0.05），表明重肌灵有提高EAMG大鼠肌力作用；采用旷场试验分析发现，重肌灵大中剂量组可显著提高EAMG大鼠跨格次数和理毛次数（P<0.01和P<0.05），表明重肌灵显著改善EAMG大鼠的运动能力；采用ELISA法发现重肌灵三个剂量组均可降低EAMG大鼠血清中抗N2AchR抗体含量（P<0.01和P<0.05），三组呈量效关系；重肌灵大中剂量还可缓解EAMG大鼠连续低频电刺激（5Hz，10Hz）后出现的大鼠腓肠肌收缩的衰减（P<0.01和P<0.05）；重肌灵三个剂量组对EAMG大鼠后肢肌肉突触后膜上N2AchR数目有显著升高作用，（P<0.01和P<0.05），其受体数目分别为正常组的78%，60%，48.7%（模型组为31%）。以上结果证明重肌灵对EAMG模型大鼠有明显防治效果。现代医学治疗该病以糖皮质激素为主，但副作用多；中医中药治疗该病虽时有报道，但尚未开发为中药新药。本实验为将重肌灵开发为临床治疗重症肌无力的中药新药提供了有力的依据，必将带来一定的社会效益和经济效益。3．重肌灵和地塞米松对EAMG大鼠及正常小鼠免疫功能的影响3.1对EAMG大鼠免疫功能的影响 重肌灵大中小剂量能显著增强ConA诱导的<WP=5>EAMG大鼠淋巴结T细胞增殖（P<0.01和P<0.05）；而地塞米松则明显抑制其增殖（P<0.01）；重肌灵大中小剂量能显著抑制纯化的N2AchR特异性抗原诱导EAMG大鼠淋巴结T细胞增殖（P<0.01）及DTH反应（P<0.01）；地塞米松则呈现明显的抑制作用。3.2重肌灵对正常小鼠免疫功能的影响 重肌灵大中剂量能显著增强ConA和LPS诱导的正常小鼠脾T和B淋巴细胞增殖（P<0.01或P<0.05）；重肌灵大中剂量对正常小鼠抗体形成细胞功能具有明显促进作用，对血凝抗体滴度也有明显的提高作用（P<0.01）。以上结果证明重肌灵能明显抑制N2AchR特异性抗原诱导的EAMG大鼠细胞免疫和体液免疫反应，但对ConA诱导的细胞免疫反而有增强作用；对正常小鼠ConA、LPS诱导的细胞免疫、体液免疫及对SRBC诱导的体液免疫有增强作用，证明重肌灵抗EAMG的作用是不同于西药免疫抑制剂地塞米松作用。4．重肌灵对EAMG大鼠免疫调节机制的研究 采用ELISA法检测与MG、EAMG发生发展密切相关的Th1型因子IFN-r，Th2型因子IL-4变化，发现重肌灵大中剂量可显著下调EAMG大鼠血中升高的IL-4，IFN-r水平；采用原位杂交法观察重肌灵对EAMG大鼠胸腺IL-4，IFN-rmRNA表达的影响发现，重肌灵大中剂量组能显著降低EAMG大鼠胸腺IL4，IFN-rmRNA表达，结合对血中IL-4，IFN-r水平影响，可推测重肌灵抗EAMG机制可能是通过降低机体IL-4，IFN-rmRNA表达，减少IL-4，IFN-r分泌，纠正Th1、Th2免疫功能紊乱，从而降低抗N2AchR抗体产生。5．重肌灵对EAMG大鼠胸腺细胞凋亡的影响 MG、EAMG存在N2AchR特异性T细胞凋亡的减少，采用TUNEL法，从基因水平观察重肌灵对EAMG大鼠胸腺细胞凋
王静[2]2004年在《重肌灵片抗重症肌无力作用机理研究》文中进行了进一步梳理重症肌无力(Myasthenia Gravis, MG)是人类的一种由针对神经肌肉接头突触后膜上乙酰胆碱受体(Acetylcholine Receptor,N2-AChR)的自身抗体介导的器官特异自身免疫疾病,临床主要特征是随意肌进行性虚弱无。实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental Autoimmune Myasthenia Gravis,EAMG)是用从电鳐电器官提取的乙酰胆碱受体加完全弗氏佐剂(Complete Freund's Adjuvant,CFA)免疫敏感动物后制成的人类重症肌无力模型。MG 体内 N2-AchRab 的产生主要依赖于 Th 细胞及其分泌的细胞因子的调控,Th1细胞因子 IFN-γ、IL-2 以及 Th2细胞因子 IL-4、IL-10 与 MG 和 EAMG 发生发展相关。Th3细胞因子 TGF-β则对这种疾病有抑制作用。 重肌灵片为河北以岭医药研究院临床长期用于治疗重症肌无力的中药复方,其主要组成为黄芪、人参、鹿茸、制马钱子等,具有温理奇阳,扶元振颓作用,临床治疗千余例肌无力患者,效果明显。药效学研究提示重肌灵片具有免疫调节作用。为探讨重肌灵片免疫调节作用的机理,我们用纯化的 N2-AchR 作为抗原免疫 Lewis 大鼠,展开了以细胞因子尤其是 IFN-γ为中心相关研究。 本课题分四部分进行: 1. 重肌灵片治疗给药对 EAMG 大鼠的主要药理作用 我们用从电鳐电器官提取的含 N2-AchR 粗提液加完全弗氏佐剂免疫 150-180gLewis 大鼠制成 EAMG, 动物于首次免疫后的第 25 天开始给药,对 EAMG 大鼠的临床症状、肌力、运动能力、肌电图、血清中抗 N2-AchRab、突触后膜 N2-AchR 的数目以及细胞免疫功能等指标进行观察。结果发现重肌灵片可以改善 EAMG 模型大鼠的临床症状,提高 EAMG 模型大鼠体重、肌力和运动能力,抑制 EAMG 模型大鼠血清中抗 N2-AchRab,降低 EAMG 模型大鼠连续低频电刺激后出现的肌肉收缩幅度的衰减,提高 EAMG 模型大鼠突触后膜 N2-AchR 数目。抑制 EAMG 模型大鼠体内 N2-AchR诱导的特异性细胞免疫反应,对 ConA 诱导的细胞免疫反应有增强作用(P<0.01或 P<0.05)。重肌灵药理作用不同于西药的免疫抑制剂,具有选择性免疫调节作用,即下调针对 N2-AchR 特异性病理免疫性反应,对正常免疫功能不抑制反而有增强作用。 2. 重肌灵对正常小鼠和免疫抑制小鼠免疫功能的影响 我们选用 18-22g C57BL/6j 雌性小鼠,灌胃给药 10 日后发现,重肌灵大、中剂量组对正常小鼠脾脏、胸腺重量无明显影响。重肌灵大剂量能明显增强 ConA 和LPS 诱导的小鼠脾 T、B 淋巴细胞增殖和 IL-2 的分泌; 选用 18-22g C57BL/6j雌性小鼠环磷酰胺隔日腹腔注射,给药剂量为 80mg/Kg,共三次,制备免疫抑制模型结果发现重肌灵能显著提高免疫抑制小鼠胸腺及脾脏<WP=5>2 重肌灵片抗重症肌无力作用机理研究指数,增强 ConA、LPS 诱导的 T、B 细胞增殖,提高 IL-2 的分泌量,且有明显的量效关系。说明重肌灵具有免疫增强剂特性。 3. N2-AchR 的纯化和建立纯化 N2-AchR 诱导的 EAMG 模型 我们将含 N2-AchR 的 TritonX-100 粗提液用α-眼镜蛇毒偶联的琼脂糖亲和层析柱进一步纯化,纯化的 N2-AchR 经过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳呈 4 个条带,其分子量分别为 40,000、43,000、53,000、62,000。这可能是受体的四个亚基。采用考马斯亮兰 G250法测定纯化 N2-AchR的蛋白量为 116.6mg/5.2公斤电鳐湿器官。 我们参考国外文献,以 150 ug 国产电鳐纯化的 N2-AchR,每隔 10 天免疫 Lewis大鼠,共三次,成功诱导 EAMG 模型。纯化 N2-AchR 诱导的 EAMG 模型发病早、病情重、模型发生率高(>70%)。 4. 重肌灵片对纯化 N2-AchR 诱导的 EAMG 大鼠免疫调节机制的研究 采用双抗体夹心 ABC-ELISA 和 RT-PCR 法对纯化 N2-AChR 诱导的 EAMG 大鼠体内 IFN-γ、IL-4、 TGF-β的含量和 mRNA 转录水平进行检测。研究发现重肌灵片通过上调 EAMG 大鼠体内内源性抑制因子 TGF-βmRNA 的转录来增加 TGF-β蛋白合成,大量分泌的 TGF-β作用于 IFN-γ、IL-4 从而抑制后两种因子的异常增高。结果导致抗 N2-AchRab 滴度下降,达到抗肌无力作用。 采用硝酸还原酶法和化学比色法检测纯化 N2-AChR 诱导的 EAMG 大鼠体内 NO和 NOS 的含量。结果发现重肌灵片能抑制病理性 NOS 和 NO 产生,减轻其对肌肉神经组织的损伤。 将纯化N2-AChR诱导的EAMG大鼠 窝、腹股沟淋巴结细胞体外培养,用N2-AchR刺激 24 小时后,上流式细胞仪检测不同亚群特异性 T 细胞的凋亡率。研究发现重肌灵片能显著提高特异性 CD4+T 细胞的凋亡,恢复 EAMG 体内淋巴细胞的自稳状态,达到抗肌无力的目的。重肌灵片这种促进自身反应性 T 细胞凋亡的作用,不能被IFN-γ逆转。 综合以上研究结果表明,EAMG 体内存在 IFN-γ、IL-4 表达异常增多现象,二者作用于 B 细胞刺激其合成大量抗 AchRIgG1 和 IgG2,这种自身抗体作用于 NMJ处的乙酰胆碱受体,致使神经肌肉传导障碍从而诱发肌无力症状的产生。重肌灵具有免疫调节作用:通过上调 EAMG 体内内源性抑制因子 TGF-βmRNA 转录来增加TGF-β蛋白合成,大量分泌的 TGF-β下调异常增多致病因子---IFN-γ、IL-4,结果 EAMG 大鼠体
徐若男[3]2006年在《重症肌无力发病机理的研究进展》文中进行了进一步梳理重症肌无力是一类由Th细胞依赖、抗体介导的自身免疫病。发病过程中肌体出现了体液免疫功能的紊乱。遗传因素、致病性自身抗体、细胞因子、补体及胸腺肌样细胞等都与该疾病有重要关系。
赵斌[4]2007年在《胸腺五肽对实验性重症肌无力小鼠模型免疫功能的影响》文中研究指明目的:用人工合成乙酰胆碱α亚基125-147肽段免疫小鼠建立重症肌无力动物模型(EAMG),并研究胸腺五肽(TP-5)对EAMG免疫系统的影响。方法:40只C57BL/6小鼠随机分为4组,即正常对照组、佐剂对照组、EAMG对照组,EAMG接受胸腺五肽治疗组,每组各10只。其中EAMG对照组和TP-5治疗组要首先通过免疫实验动物来建立EAMG模型,采用合成多肽片断与完全弗氏佐剂制成的乳剂对小鼠进行免疫,并通过Lennon分级评定、肌肉抓握力测定以及血清中乙酰胆碱受体的抗体(AchR-Ab)滴度等指标对EAMG的构建进行评价。通过计算免疫器官指数、ELISA法测定乙酰胆碱受体抗体以及测定细胞因子IFN-γ等免疫系统指标,评价胸腺五肽对EAMG小鼠免疫系统的影响。结果:统计学分析显示EAMG组的悬挂时间要显著短于正常对照组和佐剂对照组(P<0.001),其血清中AchR-Ab的含量也显著高于其他两组(P<0.001)。用Lennon分级法评估的模型成功率达到75%。在胸腺五肽的治疗方面,TP-5治疗显著改善重症肌无力组的各种指标,治疗组与EAMG组相比均有显著差异,CD4+/CD8+比值(83.15±11.52 vs. 111.20±21.60,P<0.05),AchR-Ab吸光度值(0.3484±0.1211vs.0.7149±0.1637,P<0.001),IFN-γ吸光度值(0.1535±0.0085vs.0.1838±0.0131,P<0.001),胸腺指数(0.00182±0.00034vs.0.00220±0.000296,P<0.05)和脾脏指数(0.00348±0.00046vs.0.00397±0.00038,P<0.05)。结论:用合成乙酰胆碱α亚基125-147肽段提供了一种简易、经济的建立EAMG模型方法。从器官水平,体液水平,T细胞亚群和细胞因子水平逐级实验均表明TP-5对EAMG模型积极的治疗作用。
赖祥青, 杨明山, 曹学斌[5]1994年在《重症肌无力病人乙酰胆碱受体抗体的测定及临床意义》文中认为用ＥＬＩＳＡ（固相酶联免疫吸附）法测定１７２例ＭＧ病人血清乙酰胆碱受体抗体（ＡｃｈＲａｂ），结果显著高于健康献血员组和非ＭＧ病人组。不同性别、病程及临床类型与ＡｃｈＲａｂ无相关性，但４１～５０岁组的显著高于其他年龄组。６７例类固醇激素治疗组、２２例大剂量两种球蛋白治疗组、１２例胸腺切除术组及３例ＭＧ危象病人２４次血浆交换疗法（ＰＥ）组，治疗后伴随肌无力症状的好转，ＡｃｈＲａｂ均显著低于治疗前。结果表明：ＡｃｈＲａｂ测定为ＭＧ诊断提供了可靠的实验依据，为类固醇激素、大剂量丙种球蛋白、胸腺切除术和ＰＥ等治疗ＭＧ提供理论依据和疗效评定的实验指标，进一步证实了ＭＧ免疫学发病机理。
王辉[6]2017年在《青少年眼肌型重症肌无力与HLA-B*4601-DRB1*0901基因的相关性研究》文中进行了进一步梳理目的:探讨HLA-B*4601-DRB1*0901基因与青少年眼肌型重症肌无力患者之间的关联性,探讨青少年眼肌型重症肌无力患者的发病机制,及其与HLA-B*4601-DRB1*0901基因的关系提供新的理论依据。方法:本实验采用病例-对照研究,采用聚合酶链反应-直接测序分型技术(PCR-SBT)检测青少年眼肌型重症肌无力患者和健康对照者HLA分型,病例组为104名临床及实验室确诊的中国北方地区(11-33)岁MG患者,其中男68例,女36例;按首发症状的不同,分为眼肌型39例、全身型65例;对照组为121名健康体检者,为年龄、性别相匹配的家族中无MG患者的中国北方健康献血者。全部静脉抽血,检测HLA-B*4601-DRB1*0901基因在患者与健康人群中的分布。结果:青少年眼肌型MG与正常对照组HLA等位基因频率比较,HLA-B*4601-DRB1*0901等位基因频率明显高于高于正常对照组,HLA-B*4601-DRB1*0901基因在MG组和对照组间有显著性差异(P<0.05),携带HLA-B*4601-DRB1*0901基因型可增加患MG的易感性。结论:HLA-B*4601-DRB1*0901基因与青少年眼肌型重症肌无力患病的易感性存在相关性,很可能是MG的易感基因。本研究对MG的种族和地区发病率研究,临床分类和鉴别诊断,治疗及预后均具有不可忽视的研究和应用指导价值。
高波廷, 杨明山, 刘锡民, 徐金枝, 曹学兵[7]1995年在《重症肌无力免疫病原学研究Ⅰ重症肌无力患者血清免疫学研究》文中研究指明本文用ＥＬＩＳＡ法同步、动态地观测了２８５例ＭＧ患者血清ＡｃｈＲａｂ、ＰｓＭａｂ和ＣＡＥａｂ的变化。实验结果表明ＭＧ患者体内增高的ＡｃｈＲａｂ是ＭＧ发病的主要体液因素。部分血清ＡｃｈＲａｂ阴性ＭＧ患者（１７．５％）的发病可能与血清ＰｓＭａｂ异常有关。另一部分血清ＡｃｈＲａｂ和ＰｓＭａｂ均异常的ＭＧ患者（１２．６％）则可能同时存在骨骼肌神经肌肉接头突触前和突触后的损害。血清ＣＡＥａｂ测定在辅助诊断胸腺瘤方面具有高度的灵敏度和特异性，可作为临床早期诊断胸腺瘤的过筛检查。
吴晓蓉[8]2007年在《重组人乙酰胆碱受体γ亚单位蛋白诱导HLA-DQ8转基因小鼠实验性自身免疫性眼肌型重症肌无力的初步研究》文中提出目的：利用HLA—DQ8转基因小鼠建立实验性自身免疫性眼肌型重症肌无力(oEAMG)模型，并探讨oEAMG免疫学发病机制。方法：HLA—DQ8转基因小鼠18只，随机平均分成对照组和实验组，实验组小鼠分别用乳化于完全弗氏佐剂的E.coli质粒表达重组人乙酰胆碱受体(H-AChR)γ亚单位20μg于0天免疫，乳化于不完全弗氏佐剂的重组H-AChRγ亚单位于30天和60天强化免疫，对照组用PBS代替H-AChRγ亚单位进行初次和强化免疫，眼部症状根据单眼或双眼的上睑下垂程度评估，全身肌力改变使用握力器评估，第二次免疫后第15天和45天收集小鼠血清，放射免疫分析法(RIA)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清中抗AChR抗体水平，并用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组小鼠眼外肌中AChRα、γ和ε亚单位mRNA表达变化。结果：(1)实验组小鼠单眼或双眼均出现不同程度的上睑下垂症状，眼部症状评分明显高于对照组(P＜0.001)，实验组oEAMG发病率为89％，明显高于对照组(P＜0.001)；(2)第二次免疫后第6周开始，实验组小鼠肌肉握力明显降低，差异有显著性(第6、7周P值分别等于0.009、0.0191)；(3)第二次免疫后第15、45天，RIA结果显示实验组血清中抗—AchR抗体水平均明显高于对照组(P均＜0.01)，ELISA结果显示实验组血清中抗—AchR抗体(IgM、IgG、Ig2b、Ig2c、IgG1)水平均明显高于对照组(P均＜0.01)；(4)与对照组相比，RT-PCR结果显示实验组AChRα、γ和ε亚单位mRNA表达明显增强(P值均＜0.01)。结论：重组H-AChR亚单位免疫后能诱发HLADQ8转基因小鼠发生oEAMG。抗—AChR抗体在oEAMG发病机理中起重要作用，参与oEAMG的发生与发展。重组H-AChRγ亚单位的免疫原性诱导的自身免疫应答破坏眼外肌AChR，启动AChR基因转录的上调机制，免疫后小鼠眼外肌(EMOs)AChRα、γ和ε亚单位基因转录增加。该oEAMG模型可能成为研究人类眼肌型重症肌无力(oMG)和全身型重症肌无力(gMG)发病机制和临床疗效评价的有效手段。
朱金莉[9]2012年在《“温阳补气”针法对EAMG大鼠IgG、IgM表达水平影响的研究》文中指出目的：乙酰胆碱受体（AChR）1129-145多肽片段与完全弗氏佐剂（CFA）乳化主动免疫Lewis大鼠建立实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）动物模型。通过观察“温阳补气”针法及溴吡斯的明药物治疗对EAMG大鼠血清IgG、IgM表达水平的影响，探讨“温阳补气”针法治疗MG的作用机制及发病机制，进一步丰富中医临床针灸治疗MG的理论依据，从而为临床中“痿证”的治疗提供了新的途径。方法：选用雌性Lewis大鼠70只，随机抽取10只为空白对照组。60只大鼠以1:2的比例将乙酰胆碱受体（AChR）1129-145多肽片段和完全弗氏佐剂（CFA）完全乳化，分别注射于背部、尾根部、足垫部复制EAMG模型。每天观察大鼠肌无力症状，以Lennon等的分级法判定肌无力严重程度，以AChR-ab表达水平判定大鼠是否造模成功。将成功的EAMG大鼠31只，随机选取30只分为模型组、针灸治疗组（“温阳补气”针法）及药物治疗组（溴吡斯的明），每组各10只。空白对照组、模型组对照组在同等条件下，不做任何特殊处理；针灸治疗组针刺所选穴位后平补平泻，针上加灸（艾柱高约1cm，灸3壮），每天1次，每次30min，7天为一疗程，连续治疗两个疗程，疗程间休息1天；药物治疗组进行溴吡斯的明组灌胃给药，连续治疗15天。治疗结束后，4组大鼠均尾根部静脉采血，采用ELISA法检测各组大鼠血清中IgG、IgM表达水平。结果：①60只大鼠进行EAMG模型复制，结果免疫4周后大鼠发病，出现活动减少、动作减缓、挣扎力量减弱、叫声降低、毛发变暗等症；加强免疫后大鼠肌无力症状逐渐加重，至造模结束时大鼠因MG症状过重死亡3只，ELISA法检测AChR-ab滴度，P/N比值均≥2.1，符合当今有关文献报道，成功制备31只EAMG大鼠，成功率约为51.7%。②各组治疗14天后，采用ELISA法检测各组大鼠血清中IgG、IgM表达水平，结果显示：针灸治疗组和药物治疗组EAMG大鼠血清中IgG表达水平均明显下降，针灸治疗组和药物治疗组分别与模型对照组比较，均具有极显著性差异(P<0.01)，但针灸治疗组疗效与药物治疗组相比，无显著性差异(P>0.05)；而IgM表达水平各组比较均无显著性差异(P>0.05)。结论：①乙酰胆碱受体（AChR）1129-145多肽片段和完全弗氏佐剂（CFA）完全乳化主动免疫大鼠建立EAMG动物模型成功率较高。②“温阳补气”针法降低了EAMG大鼠血清中IgG的表达水平，影响自身免疫系统的应答反应，从而改善大鼠肌无力症状，对MG有一定的治疗作用，说明IgG表达水平与MG的发病机制关系密切。③“温阳补气”针法对EAMG大鼠血清中IgM表达水平无调节作用，说明IgM表达水平可能与MG的发病机制无紧密联系。
金硕果[10]2006年在《瘫痿胶囊对实验性自身免疫性重症肌无力小鼠血清IL-4及TGF-β1的影响》文中研究表明目的 建立实验性自身免疫性重症肌无力(expermental autoimmune myasthenia gravis，EAMG)小鼠模型，通过观察瘫痿胶囊对EAMG小鼠的临床症状、血清乙酰胆碱受体抗体(acetylcholine receptor antibody，AChR-Ab)、白细胞间介素4(interleukin-4，IL-4)、转移趋化生长因子β1(transgrowth factor-β1，TGF-β1)的影响，探讨其作用机制。 方法 健康雌性C57BL/6小鼠90只，随机分为正常组(10只)、完全福氏佐剂(complete freunds adjuvant，CFA)组(10只)、EAMG组(70只)。EAMG组造模方法：每只小鼠于背部、尾基部、足垫部皮下多点注射含AChRα_1 129-145肽段15μg的抗原乳剂200μL，初次免疫后第3周再次注射上述抗原乳剂。CFA组同期同部位只皮下注射CFA20μL，正常组不做皮下注射。记录小鼠的体重变化，参考Lennon的评分标准评价临床症状等级，低频重复神经刺激(repetitive nerve stimulation，RNS)检测坐骨神经动作电位衰减率，酶联免疫法检测AChR-Ab，综合临床症状、血清AChR-Ab水平、体重、RNS衰减率等结果判断动物模型是否成功。然后将成功的EAMG小鼠随机分为5组：瘫痿胶囊高剂量组(5.6g/kg·d)、中剂量组(2.8g/kg·d)、低剂量组(1.4g/kg·d)、醋酸泼尼松组(10mg/kg·d)及模型空白组(不予灌药)，共治疗4周。记录各组小鼠的体重变化及临床症状等级评分，酶联免疫法检测AChR-Ab、IL-4、TGF-β1。 结果 造模70只小鼠中成功的EAMG小鼠有41只。EAMG小鼠体重增加减缓，出现较明显的肌无力症状，临床症状评分为(2.06±0.32)，与正常组、佐剂组有显著性差异(P＜0.01)；血清AChR-Ab水平(1.91±0.56)显著高于正常组(0.59±0.04)及佐剂组(0.65±0.04)；RNS检查衰减率(27.31±4.28)也与正常(-2.57±0.94)、佐剂组(-3.09±0.86)有显著统计学差异。治疗4周后，与模型空白组小鼠比较，不同剂量的瘫痿胶囊及一定剂量的醋酸泼尼松治疗组小鼠临床症状评分减少，血清AChR-Ab水平降低，体重增加幅度增多，血清TGF-β1水平升高，IL-4的水平降低，以瘫痿胶囊高中剂量组及强的松组小鼠作用程度明显。瘫痿胶囊高中剂量组和强的松组的比较未见统计学差异。
参考文献：
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