1 泸州医学院 四川泸州 646000；2绵阳市人民医院 四川绵阳 621000
摘要：1978年美国召开的人类免疫与肿瘤免疫诊断会上首次提出了肿瘤标志物概念，之后随着研究深入，其在临床、辅助诊断、疗效评价等方面均发挥了重要的作用。乙醛脱氢酶1（ALDH1）作为催化细胞中将乙醛氧化为乙酸的主要细胞溶脂酶，逐渐成为正常与肿瘤干细胞（CSC）主要标志物。为了进一步探讨肿瘤肝细胞标志物ALDH1的研究进展，本文进行了综述。
关键词：肿瘤肝细胞；标志物；乙醛脱氢酶1；研究进展
随着肿瘤标志物概念提出，以及对其研究逐渐深入，近几年大部分学者已经将乙醛脱氢酶1（ALDH1）作为最为主要的肿瘤干细胞标志物进行研究[1]。ALDH1属于乙醛脱氢酶家族成员之一，主要作用在于催化细胞中的乙醛氧化为乙酸，是一类细胞溶脂酶，可参与各类组织的分化及基因表达，作用十分广泛。本文就其在肿瘤干细胞标志物中的研究进展进行如下综述。
1 ALDH1概述
人体ALDH1的基因表达场所为细胞质，其中基因克隆与定位主要发生在9q21染色体，构成碱基对有53×103个，基因启动区则含有ATA盒与CCAAT盒各一个，前者位于转录起始部位上游32bp处，而后者位于74bp处[2]。经ProtParam进行分析可知，其蛋白质分子质量大约为54.86kDa，推测总原子数目达到7700多个，而半衰期可达到30小时。此外，其不稳定系数不足30，可见其蛋白质有一定稳定性，而疏水性平均值约为-0.16，可见其蛋白质亲水性很强。
2 ALDH1作为肿瘤干细胞标志物的研究情况
CSC的鉴定比较复杂，一般需经过实验证明，证明该群细胞有自我更新与多向分化潜能，而且是一类强致癌性细胞[3]。随着研究深入，ALDH1被认定为乳腺癌、肺癌、胰腺癌等CSC通用标记物，成为研究热点，尤其是在乳腺癌干细胞标志物研究中最为突出，现总结如下。
2.1 乳腺癌干细胞标志物中ALDH1应用情况
乳腺癌作为临床主要肿瘤疾病，研究十分广泛，从近几年实验报告中可知，ALDH1的高表达对乳腺癌发生、进展、转移及预后等均有极大影响。笔者参阅文献与研究后发现，首次利用ALDH1在乳腺癌实体组织中发现乳腺癌干细胞在2007年，发现者为Ginestier等，他们对577份乳腺癌组织样本实施分组，分为U.M组与I.P.C组2组，均采取免疫组化技术处理，2组共计标本481份，前者136份，后者345份，均进行ALDH1染色处理，结果显示前者有19%（24/136）表达ALDH1+，而后者则有30%（102/345）表达[4]。之后他们将表达的ALDH1+乳腺癌细胞进行肿瘤形成实验，显示仅仅采取500个便可形成肿瘤，但采取ALDH1-细胞实验，即便是50000个也无法形成肿瘤，可见ALDH1+有很强致癌能力。从该研究中不难看出，乳腺癌干细胞为ALDH1+细胞，而ALDH1自然成为干细胞标志物。近期Morimoto等学者针对203例乳腺癌患者采取免疫组化技术处理，显示乳腺癌生物学侵袭性行为的显型为ALDH1+，并且与PR-、ER-、TOP2A+等呈现正相关，而与患者的年龄、肿瘤大小及是否绝经等无相关性。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆此外，部分研究显示ALDH1+乳腺癌干细胞与分型也有一定关系，主要与HER2过表达型、basal-like型有关[5]，而这两种类型在乳腺癌基因亚型中的存活期极短，同时预后效果也最差，可见对于ALDH1+乳腺癌而言，取得的预后效果极不理想。
2.2 ALDH1+干细胞分离与鉴定
肿瘤干细胞标志物ALDH1的研究关键之一在于ALDH1+干细胞的分离与鉴定，最早的分离鉴定在1995年，当时Jones等学者设计一种名为DAAA的ALDH1荧光底物，进而采取流式细胞技术对其进行检测，通过DAAA荧光强度可将小鼠体内的HSC分离出来，并将其与成髓细胞受体结合。这种技术在当时受限于落后的科学，效果并不理想，但利用紫外线照射继发底物，促使细胞基因突变，这个想法是可取的，而且至今也在沿用。DAAA发射光谱后和其他荧光染料重叠，导致HSC很难继续产生和自身高纯度所需的肝细胞标志物。之后，Storms等学者总结前述研究的缺点后，设计新型系统检测ALDH1，将维拉帕米对多药耐药基因抑制与人脐血单核细胞中一个比较特殊的染色体即AldefluorR染色结合，从而获取富含CD34+、Lin-细胞及其他HSC的细胞亚群[7]。同理，Hess等学者利用两步走，先将Lin-细胞系分离出后，再进行ALDH1+高表达，将HDC从人体脐血中分离出。分离结果显示细胞明显要比单核细胞总数的0.1%还要少，可见符合“肝细胞所占比例少”的结论[8]。此外，采取AldefluorR染色进行ALDH1表达的检测时，还能将正常干细胞与肿瘤干细胞分离出来，这种情况下可作为白血病等干细胞分离与鉴定标记物。
2.3 ALDH1+肿瘤干细胞和肿瘤耐药性研究
近期有研究认为ALDH1+肿瘤耐药性在一定程度与ALDH1的解毒效果有关，因为ALDH1可将环磷酰胺（氧化烷化剂）中间代谢产物醛磷酰胺氧化，生成无毒作用的羧基磷酰胺，对环磷酰胺可起到不错的解毒效果，但这样就会使得肿瘤对环磷酰胺产生耐药性，故而便可通过预测细胞中ALDH1的水平来判定预后效果。Sladek等学者对细胞ALDH1表达差异、联合化疗（以环磷酰胺为主）临床反应等综合研究发现，可避开环磷酰胺的化疗作用的转移肿瘤细胞ALDH1+表达作用要明显更高，而对联合化疗没反应的转移性肿瘤细胞则显示出ALDH1+高表达。从这些研究中笔者认为ALDH1在肿瘤中的表达存在差异主要是因为ALDH1+肿瘤干细胞的存在，因为其能对各种化疗药物产生抵抗作用，同时呈现出比较差的预后效果[6]。
3 结语
肿瘤干细胞是目前研究肿瘤发生、发展及预后等重要的物质，而且随着对其标志物的研究越来越深入，取得的效果也逐渐明显。ALDH1细胞中的ALDH1+细胞亚群有自我更新与多向分化等特点，恰好符合当前对肿瘤干细胞的定义标准，而且大量的研究、试验等已经证实ALDH1属于肿瘤干细胞主要标志物，加上可采取多种检测手段处理，逐渐成为分离与鉴定干细胞主要工具，有很高的临床价值，值得进一步研究与探索。
参考文献：
[1]孙慧元，杨敏，郑茂金等.非小细胞肺癌组织中CD133和ALDH1的表达及其临床意义[J].临床与实验病理学杂志，2012，28（7）：813-815.
[2]谢永红.肿瘤干细胞与乳腺癌的研究进展[J].嘉兴学院学报，2011，23（3）：60-64.
[3]胡凯，毕明宏.ALDH1在恶性肿瘤中的研究进展[J].临床肺科杂志，2012，17（10）：1875-1876.
[4]刘丽娟，孙长岗.ALDH1与乳腺癌干细胞及其中医药研究进展[J].中国老年保健医学，2013，11（1）：58-61.
[5]梁艳，庄静，孙长岗等.乳腺癌与ALDH1相关性研究的现状[J].中华肿瘤防治杂志，2013，20（24）：1942-1944.
[6]马法库.结直肠癌肿瘤干细胞标志物的研究进展[J].肿瘤研究与临床，2014，26（8）：571-573.
[7]文波，刘红光.乳腺癌干细胞分选方法研究进展[J].肿瘤药学，2013，09（5）：335-339.
[8]李志磊，马珠琳，张新定等.乙醛脱氢酶1在胶质瘤中的研究进展[J].中华脑科疾病与康复杂志（电子版），2014，18（1）：50-52.
论文作者:杨鸣1,周庭庆2,余洋2,邓明明1（通讯作者）
论文发表刊物:《健康世界》2015年10期供稿
论文发表时间:2016/1/19
标签：干细胞论文; 肿瘤论文; 乳腺癌论文; 细胞论文; 标志物论文; 研究进展论文; 乙醛论文; 《健康世界》2015年10期供稿论文;