静脉注射受试物p-105对人结肠癌(HTC-8)的抑制作用论文_孙雅煊,王勇,李新荣,李立忠

孙雅煊 王勇 李新荣 李立忠

山西普德药业股份有限公司 山西大同 037000

摘要:目的:探讨静脉注射受试物p-105对人结肠癌(HTC-8)的抑制作用。方法:采用回顾性分析法,选取2013年4月-2015年6月我院收治的80例人结肠癌患者的临床资料,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)、细胞核分裂指数试验方法。结果:在MTT试验中不同浓度的受试物p-105对HTC-8有不同的抑制作用;在核分裂指数试验中受试物p-105的对HTC-8的抑制作用随着p-105浓度的升高而降低。结论:静脉注射受试物p-105对人结肠癌(HTC-8)有抑制作用,在人结肠癌治疗中可以利用受试物p-105进行治疗。该研究获国合专项(2012DFA30530)资助。

关键词:静脉注射;受试物p-105;人结肠癌(HTC-8);抑制作用

随着人们经济水平的提高,人们的生活习惯和饮食习惯也发生较大的改变,导致胃肠疾病发病率不断提高,随着病情的发展,病情容易恶化和严重[1-2]。人结肠癌就是一种比较敏感的肿瘤,此病发病率、死亡率均比较高,消化道激素及生长因子与消化道恶性肿瘤的发生发展有重要的关联性。有关研究发现受试物p-105是一种比较好的用于治疗人结肠癌的药物,对HTC-8有很好的抑制作用,对患者进行静脉注射受试物p-105,能够有效患者病情。促进患者康复。

1 资料与方法

1.1 材料

1.1.1 受试物

受试物p-105选自美国matreya公司,细胞毒性试验后发现其计量为:0.82、3.1425、12.5μg/ml,并选定二甲基压砜为隐形对照组,最终浓度为0.1%。

1.1.2 HTC-8培养

HTC-8细胞选自上海信裕生物技术有限公司生产,如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。如果细胞已长满(达80-90%),即可进行传代。

1.2 方法

1.2.1 MTT试验

在培养液生长期内接种24孔培养液板中,每孔有2×104个细胞,进行24h的培养后,更换含有p-105的培养液,并使其最终浓度分别为0.82、3.1425、12.5μg/ml,而且每个浓度设4个平行孔,然后设定对照组。每天培养4h,利用酶标仪测定每孔吸光度A值,以每孔4个孔A的平均值作为各组的平均A值,谈后计算细胞生长抑制率。

1.2.2 细胞核分裂指数

将HTC-8细胞接种于24孔培养板内,每孔设定2×104个细胞,每个计量设定4个平行孔,培养24h后更换浓度液,培养48h后进行甲醇固定、Giemsa染色,技术2000个细胞中所含有的分裂相和分裂指数,计算抑制率。

2 结果

2.1 不同浓度p-105对HTC-8细胞作用的MTT结果

分别观察第3-7d各个剂量组形态学变化,观察结果发现p-105对HTC-8细胞有明天的抑制作用,而且这种抑制作用会随着时间的延长、细胞数量的减少而形成计量效应关系,其第7天的抑制率分别为:18%、72%、89%,见表1。

3 讨论

受试物p-105是一种化学抑制物,对人结肠癌HTC-8细胞有很好的抑制作用,它和其他代谢产物一样可以在神经酰胺酶的作用下生成具有一定抑制HTC-8细胞的产物,而神经酰胺酶是一种比较常见的第二信使分子,研究发现这种分子能够诱导多种肿瘤细胞的凋零,比如人类白细胞HL-60、U937等肿瘤细胞[3-4]。p-105在细胞分化、增值、受体功能以及肿瘤发生等方面发挥着重要的作用。有关研究显示在人的白血病细胞中HL-60、U937细胞加入20μmol/L的p-105,反应6h内就能使细胞迅速凋亡[5]。

本次研究结果显示,受试物p-105对HTC-8细胞的分化、增值等有明显的抑制作用,而且对着p-105浓度的升高这种抑制作用越明显,而细胞核分裂指数试验表明,随着受试物p-105计量的增加,其对HTC-8细胞核抑制作用更强,产生这种情况的主要原因可能与p-105在短期内可能有效促进DNA合成。

综上所述,通过以上分析、总结,发现受试物p-105能够有效抑制HTC-8细胞的分化、增值,而且这种抑制作用主要与受试物p-105能够诱导肿瘤细胞迅速凋亡有关。所以在人结肠癌的临床治疗中可以根据患者的具体病情和临床特点给予患者静脉注射受试物p-105,从而促进肿瘤细胞凋亡,促进患者康复。

参考文献:

[1]徐伟丽.张兰威.杨鑫.单毓娟.宋微.戴绍春.γ-生育三烯酚对体外培养的人结肠癌HT-29细胞生长的抑制作用[J].中国粮油学报 2014,12(1):105-106.

[2] 刘颖,张牧,王小雪,等.染料木黄酮对人胃癌细胞生长抑制作用研究[J].营养学报,2001,23(1):62—65.

[3]宋士利.李百祥.韩云峰鞘氨醇对人结肠癌细胞的抑制作用[J].中国公共卫生 2004,23(7):145-146.

[4]Sweeney EA,Sakakura c.Shirahama T.H al Sphingosine and its methylated derivative N,N—dimethlysphingosine(DMS)induce apoptosls in a variety ot human cancer cell hne8t[J].Int J cllcer.2006,12(66):358-366.

[5]张涛,享百祥鞲磷脂及神经酰胺对人结肠癌细胞(HT-29)的影响[J].卫生毒理学杂志.2003,17(2):81—83.

论文作者:孙雅煊,王勇,李新荣,李立忠

论文发表刊物:《健康世界》2015年28期供稿

论文发表时间:2016/4/7

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