孟祥斌 李耀中
（常州工程职业技术学院制药与环境工程学院 江苏 常州 213164）
【摘要】 本文比较研究了荷叶总黄酮和总生物碱的乙醇提取工艺、酸水提取工艺和酸性乙醇提取工艺。根据三种工艺提取物的得率和提取物中总黄酮、总生物碱的含量，结合生产需要，确定以乙醇提取工艺为荷叶提取物制备工艺。然后对乙醇提取工艺的醇浓度进行优化，确定70%乙醇作提取溶剂时，提取物得率为6.87%，总生物碱和黄酮的含量分别可达4.32%和5.93%。该研究可以对荷叶提取物制备及产品开发生产提取较为行的技术支持。
【关键词】 荷叶；提取工艺；优化
【中图分类号】R92 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）32-0363-02
1.试验材料
1.1仪器设备
FW135中草药粉碎机、HZT-A200电子天平、RE-201D旋转蒸发仪、101-1A数显式电热恒温干燥箱。
1.2材料与试剂
1.2.1试验材料 荷叶原材料，采于常州市新北区荷园
1.2.2试验试剂 芦丁对照品荷叶碱对照品和（上海源叶生物科技有限公司）；C2H5OH、HCl、NaOH、NaNO2、Al(NO3)3、CHCl3、溴甲酚绿。对照品纯度≥98%，其他试剂为分析纯。
2.试验方法
2.1荷叶原材料处理
将所采荷叶洗净，烘干，粉碎，过2号药筛后作为提取原料。
2.2 荷叶总黄酮与总生物碱的提取
分别采用乙醇提取工艺、酸水提取工艺和酸性乙醇提取工艺对荷叶总黄酮和总生物碱成分进行提取。
2.2.1乙醇提取工艺制备荷叶总黄酮、总生物碱提取物 称取荷叶提取原料10g，按20倍量（m:V）加入70%的C2H5OH，80℃温提2h，抽滤得滤液，将滤液减压蒸发得浓缩液，浓缩液于65℃干燥后粉碎，得乙醇提取物。
2.2.2酸水提取工艺制备荷叶总黄酮、总生物碱提取物 称取荷叶提取原料10g，按20倍量（m:V）加入0.15%的HCl，80℃温提2h，抽滤得滤液，将滤液减压蒸发得浓缩液，浓缩液
资助项目：常州市科技计划资助（CE20132016）
于65℃干燥后粉碎，得酸水提取物[5]。
2.2.3酸性乙醇提取工艺制备荷叶总黄酮、总生物碱提取物 称取荷叶提取原料10g，按20倍量（m:V）加入0.15% HCl的70%的C2H5OH，80℃温提2h，抽滤得滤液，将滤液减压蒸发得浓缩液，浓缩液于65℃干燥后粉碎，得酸性乙醇提取物[6]。
2.3 荷叶提取物得率及总黄酮、总生物碱含量检测
2.3.1荷叶提取物得率的检测 三种提取工艺所得提取物精确称重，得提取物重量（m）。
提取物得率（%）= m/10×100%
2.3.2荷叶提取物总黄酮、总生物碱含量检测
2.3.2.1芦丁标准曲线的建立 称取芦丁标准品10mg，用30%乙醇溶解，定容至50ml，制备成浓度为0.2mg/ml的标准溶液。分别吸取上述标准溶液0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 ml于10ml比色管中，加入一定量的30%乙醇使最终体积为5ml；加入0.3ml浓度为5%亚硝酸钠溶液，混合均匀；静置5min，加入0.3ml浓度为10%硝酸铝溶液混匀；静置6min，加入4ml浓度1mol/LNaOH溶液，混合均匀；用30%乙醇标定至刻度，静置10min， 于510nm处分别测定其吸光度值。以吸光度（A）为纵坐标，标准液浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程： A=4.4027C+0.0105（R²=0.9986）。
2.3.2.2荷叶碱标准曲线的建立 称取荷叶碱对照品10mg，以适量氯仿溶解，定容至50ml，制备成浓度为0.2mg/ml 的对照品标准溶液。分别取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml对照品标准溶液于10ml比色管中，加入0.2 mol/LNaOH溶液1 ml、0.1%的溴甲酚绿溶液1ml，加氯仿定容至刻度，转移至分液漏斗并振摇均匀，静置30min，取氯仿层，415nm测定其吸光值[6]。以吸光度（A）为纵坐标，待测液浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A= 8.3457C+0.0044（R²=0.9978）。
2.3.2.3提取物总黄酮和总生物碱含量的测定 取适量三种提取方法所得的干燥提取物分别按2.3.2.1和2.3.2.2的方法显色并测定其吸光值，根据回归方程计算提取物中总黄酮和总生物碱的含量。
3.结果与分析
通过检测，荷叶活性成分乙醇提取工艺、酸水提取工艺和酸性乙醇提取工艺三种提取工艺所得提取物的提取得率和总黄酮、总生物碱含量见表1。
由表1可知：乙醇提取工艺提取物的得率最高可达6.80%，提取物总黄酮含量为6.17%，另检测到含3.81%的总生物碱；酸水提取工艺提取物的得率最高可达8.84%，提取物总生物碱含量为4.53%；而酸性乙醇提取工艺提取物得率最高可达12.94%，提取物中总生物碱和黄酮的含量分别可达4.17%和5.87%。
4.结论与讨论
根据三种提取工艺所得提取物的得率及其总黄酮和总生物碱含量的检测数据，结合工业生产实际，研究认为目前针对荷叶总黄酮和总生物碱为主要目的物的提取物制备宜采用乙醇提取工艺，该工艺既可同时获得两类主要成分实现联合提取，且两类成分的含量较高；同时，又有利于工业化生产的进行。
【参考文献】
[1] 王福刚，曹娟等．荷叶的化学成分及其药理作用研究进展[J]．时珍国医国药，2010，21（9）：2339
[2] 国家药典委员会．中国药典（2010版 一部）[M]．中国医药科技出版社，2010：258-259
资助项目：常州市科技计划资助（CE20132016）
论文作者:孟祥斌,李耀中
论文发表刊物:《医药前沿》2015年11月第32期
论文发表时间:2016/5/6
标签：提取物论文; 荷叶论文; 生物碱论文; 乙醇论文; 工艺论文; 黄酮论文; 溶液论文; 《医药前沿》2015年11月第32期论文;