李树军
山东省高密市中医院检验科 山东高密261500
摘要：目的：探析临床微生物检验和细菌耐药性监测方法。方法：搜集我院2015年1月～2015年6月之间各个科室搜集的血液，尿液和分泌物等标本作为样本，经培养获得280份致病菌株。采用肉汤稀释法分析抗菌药物的最小抑菌浓度，进而总结致病菌对各种抗生素类药物的耐药性。结果：在280株致病菌中，有153株革兰阳性球菌，127株甘兰阴性杆菌。各种致病菌对青霉素G和头孢唑林等抗生素药物均存在高低不同的抗药性。结论：随着抗生素药物的广泛应用，致病菌的耐药性也逐渐提高，且不同地区具有不同的耐药性情况。相关工作者应应该深入了解理论知识，提高检测结果的准确率，做好质量管理，避免抗生素类药物的滥用，使检验结果可以应用于临床药物使用。
关键词：微生物检验；细菌耐药性；肉汤稀释法
细菌的耐药性指对抗菌类药物的耐药性，引发耐药性的原因主要在于长期大量使用同种抗菌类药物导致细菌自身染色体发生基因变异，而这种基因可以带带相传，从而导致某种细菌对该抗菌药物产生永久耐药性，大大降低了抗菌类药物的疗效[1]。因此，在选择抗菌类药物时，应谨慎选择，需要进行微生物检验以及细菌耐药性监测。本文搜集样本并进行实验，探讨微生物检验和细菌耐药性监测的方法。现报告如下。
1 资料与方法
1.1一般资料
搜集我院2015年1月～2015年6月之间各个科室搜集的血液，尿液和分泌物等标本作为样本，按照常规方式进行培养，分离和鉴定，共获得280株致病菌。
1.2实验方法
选用法国生物梅里埃公司生产的革兰阳性球菌药敏板条P535和革兰阴性杆菌药敏板条GN13以及GN09。首先，对样本进行病原菌分离，然后采用Kirby-Bauer系统鉴定病原菌。使用肉汤稀释法监测抗菌药物的最小抑菌浓度。肉汤稀释法：选取外表相似的4或5个菌落，将其接种于5ml的水解酪蛋白肉汤中，以35℃培养4h，用生理盐水将对数生长期菌液调整为0.5麦氏比浊标准，大概含有1.5×108CFU/ml。取13支无菌试管，第1只试管加入1.6ml水解酪蛋白肉汤，其余12只试管加入1ml水解酪蛋白肉汤。在第一管内加入0.4ml抗菌药物原液，吸取1ml液体置入第二管，混合均匀后吸取1ml到第三管。连续至第十一管，吸取1ml丢弃，第十二管为不含药物的对照组试管。将接种好的稀释管塞好塞子，置35℃普通空气孵箱中孵育17h。对于耐氧西林葡萄球菌或者耐万古霉素肠球菌可以适当延长培育时间达到24h。
结在读取和报告所测试菌株的最小抑菌浓度前，应检查生长对照管的细菌生长情况是否良好，同时还应检查接种物的传代培养情况以确定其是否污染，质控菌株的最小抑菌浓度值值是否处于质控范围。以肉眼观察，药物最低浓度管无细菌生长者，即为受试菌的最小抑菌浓度。
2 结果
2.1菌种类型
在280株致病菌中，有153株革兰阳性球菌，占比54.64%。127株甘兰阴性杆菌，占比45.36%。其中包括凝固酶阴性葡萄球菌，金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌，大肠埃希菌，不动杆菌属，克雷伯菌属，枸椽酸菌属，肠杆菌属，变形杆菌属和球肠菌。
2.2致病菌对抗菌药物的耐药性
各种致病菌对常见的抗菌性药物的耐药情况具体可见表1。
3 讨论
在二十世纪，由于抗生素的大范围应用，大大降低了感染患者的死亡率。但是人们逐渐发现，致病菌也会产生更为持久的耐药性，降低了抗生素药物的疗效。为此，世界卫生组织在2000年提出了遏制细菌耐药性的发展战略，意图减少细菌耐药性对人类健康带来的影响[2]。目前，细菌耐药性检测已经普遍存在于各地区的卫生防疫等相关部门，耐药性监测的目的主要包括以下几种：第一，确定地区的耐药性情况，为医院抗感染策略提供依据[3]。第二，检测细菌耐药性的变化，以确定抗生素药物的使用时间和剂量。第三，掌握耐药性菌株在人群中的分布范围，以阻止致病菌的蔓延。第四，帮助制药机构开发新型抗菌药物。细菌耐药性的分布和传播较为复杂，可能受到生物，物理和社会等多种因素的影响，因此，不同地区均需要根据地区特点进行细菌耐药性检测，以指导地区防疫工作进行[4]。
从本研究中的结果可以看出，本地区细菌样本中的铜绿假单胞菌对于左氧氟星和阿米卡均具有耐药性，但是对于环丙沙星的耐药性较差，因此环丙沙星可以作为临床抗菌药物。此外，头孢他啶对变形杆菌属也拥有较好的疗效。
鉴于临床微生物检验和细菌耐药性监测对临床用药的指导意义，相关医学和微生物检验人员应该深入了解理论知识，提高检测结果的准确率，做好质量管理，避免抗生素类药物的滥用。
参考文献：
[1]桂炳东.切实加强临床微生物检验和细菌耐药性监测[J].江西医学检验，2006，02（24）:97-98.
[2]孙涛.抗生素的使用与细菌耐药性[J].中国临床药理学杂志，2014，02（16）:151-155.
[3] Niederman M S. Appropriate use of antimicrobial agents:challenges and strategies for improvement[J].Critical Care Medicine,2003,(02):608-616.
[4]金少鸿,马越.国内细菌耐药性监测及研究进展[J].中国新药杂志，2005，03（24）:265-268.
论文作者:李树军
论文发表刊物:《医师在线》2015年11月第23期
论文发表时间:2016/4/20
标签：耐药性论文; 细菌论文; 致病菌论文; 药物论文; 抗生素论文; 肉汤论文; 微生物论文; 《医师在线》2015年11月第23期论文;