（2贵阳中医学院第一附属医院 贵州 贵阳 550002）
【摘要】目的：探讨复方肿节风合剂对大鼠实验性急性咽炎动物模型的疗效及作用机制。方法：采用氨水连续3d对大鼠咽部喷雾法建立急性咽炎动物模型，模型成功后，随机分为模型组，复方肿节风合剂（2g原药材/ml）高、中、低剂量组，西瓜霜清咽含片（1.26g/kg）组，另设一组空白对照组。连续灌胃给药5d，观察药液对模型动物病理形态学、白细胞计数及分类计数的影响。结果：与空白对照组比较，模型组大鼠体重增长缓慢，白细胞计数及中性粒细胞绝对值显著升高，出现明显的急性咽炎的病理变化，差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）；与模型组比较，复方肿节风合剂高、中、低剂量组均能不同程度改善大鼠行为状态、体征，降低白细胞计数及中性粒细胞绝对值，改善急性咽炎的病理变化，差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。结论：复方肿节风合剂对急性咽炎有较好的治疗作用，其作用机制可能与抑制咽部病理改变和白细胞计数及分类计数有关。
【关键词】复方肿节风合剂；急性咽炎；动物模型；白细胞计数
【中图分类号】R286 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）23-0356-02
咽炎属中医喉痹范畴，现代医学分为急性和慢性两大类，认为急性咽炎是咽黏膜、黏膜下组织和淋巴组织的急性炎症，病因以病毒和细菌感染较多见，随着空气污染的不断严重，急性咽炎的发病率逐年上升。复方肿节风合剂为贵阳中医学院第二附属医院自主开发的中药成方院内制剂，由肿节风、麦冬、鱼腥草等中药组成，具有清热解毒、消肿止痛、清利咽喉等功效。用于喉痹（急、慢性咽炎）及急性扁桃腺炎引起的咽喉肿痛、咽痒、咳嗽等症状者，但其治疗机制尚不明确。本研究拟通过急性咽炎模型大鼠研究复方肿节风合剂对急性咽炎的的药理作用。
1.材料
1.1 药物
复方肿节风合剂，由贵阳中医学院第二附属医院中药制剂室提供，批号：20140716。西瓜霜清咽含片，桂林三金药业股份有限公司，批号：20140816[1]。
1.2 动物
SD大鼠，SPF级，体重180～220g，雌雄各半，由中国人民解放军第三军医大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK-（军）2012-0003。
1.3 仪器
JM10001 电子天平，余姚纪铭称重校验设备有限公司生产；喉头喷雾器，上海市嘉定区医疗设备厂生产；XFA6030 型血液细胞分析仪，南京普朗医疗器械有限公司生产。
2.方法
2.1 急性咽炎动物造模[1，2]
取SD大鼠，每天上、下午各用15%氨水喷其咽部1次，每次用喷雾器喷3揿（每揿约0.08ml），连续喷3天。造模第4天，造模大鼠咽部组织呈暗红色，无光泽，黏液性分泌增多，呈现明显急性充血肿胀状态为造模成功。
2.2 分组与给药
选取急性咽炎造模成功的大鼠，随机分为模型组，复方肿节风合剂（2g原药材/ml）高、中、低剂量组，西瓜霜清咽含片组（1.26g/kg），另设一组空白对照组，每组10只大鼠，雌雄各半。造模第4天，复方肿节风合剂高、中、低剂量组给予复方肿节风合剂灌胃，容量均为0.467ml/100g，分别为原药液（高剂量）、原药液用生理盐水稀释1倍（中剂量）、原药液用生理盐水稀释2倍（低剂量），相当于临床用量的14、7、3.5倍。西瓜霜清咽含片组给予0.27g/ml西瓜霜清咽含片混悬液0.467ml/100g灌胃，相当于临床用量的7倍，模型组和空白对照组分别予以生理盐水0.467ml/100g灌胃。每天1次，连续给药5天，
2.3 观测指标
2.3.1大鼠一般状态观察 观察记录大鼠的饮水、饮食、活动、体重、精神状态及被毛等情况。
2.3.2病理样本的制备与观察 末次给药后，每组随机选取8只大鼠禁食12小时，从大鼠腹主动脉取血处死动物，血液样本保存在真空取血管中，用于白细胞计数及分类计数检测。摘取咽部组织，在10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，切片，HE染色后在光学显微镜下观察。
病理切片积分观察：0分，正常结构，黏膜、固有膜层无水肿，无炎性细胞浸润，记为(-) ；1分，咽喉上皮增生不明显，固有膜水肿，上皮下轻度炎症细胞浸润，记为(+)；2分，咽喉上皮明显增生，上皮下有炎症细胞浸润，记为(++)；3分，咽喉上皮中度增生，并形成钉突，记为(+++)；4分，咽喉上皮严重增生，并形成钉突，上下皮有炎症细胞浸润，记为(++++)。
2.4 统计学方法
本实验采用SPSS 17.0统计软件分析数据，实验结果以（x-±s）表示，两组数据间用t检验进行比较，P<0.05为差异具有统计学意义。
3.结果
3.1 复方肿节风合剂对模型大鼠一般行为、体征的影响
从造模第2天开始，大部分造模大鼠逐渐出现搔抓口部，饮水频繁，进食减少，咽部充血呈鲜红色，肿胀等症状与体征，第3天症状更明显，有少数大鼠死亡。给药期间，模型组大鼠上述症状有所减轻，但动物依然进食少、体重减轻、活动减少、毛色暗淡；复方肿节风合剂各剂量组和西瓜霜清咽含片组大鼠随着给药时间的延长，上述症状逐渐改善，多数动物在给药期结束时行为状态与空白对照组大鼠无差异。
3.2 复方肿节风合剂对模型大鼠白细胞及其分类的影响
与空白对照组相比，模型组白细胞计数及中性粒细胞绝对值明显上升（P<0.05），说明急性咽炎造模成功；淋巴细胞绝对值和单核细胞绝对值无明显差异。与模型组比较，复方肿节风合剂高、中、低三个剂量组白细胞计数及中性粒细胞绝对值明显下降（P<0.01或P<0.05），说明复方肿节风合剂具有抗急性咽炎的药理作用，与阳性药西瓜霜清咽含片作用相当。见表2。
3.3 复方肿节风合剂对模型大鼠咽部组织病理形态学的影响
空白对照组大鼠咽部组织结构清晰，黏膜上皮光滑，固有层散在淋巴组织和腺泡，黏膜下有少量小血管，肌层纤维排列规则。模型组大鼠咽部组织分界不清，黏膜上皮角化、脱落，固有层和黏膜下水肿，小血管增多、充血，大量炎性细胞浸润，少量深入肌层组织，肌纤维排列不规则。复方肿节风合剂低剂量组大鼠咽部组织黏膜上皮渐恢复平整，黏膜上残留少量黏液，可见少量炎性细胞浸润。西瓜霜清咽含片组及复方肿节风合剂高、中剂量组大鼠咽部组织黏膜复合鳞状层为扁平上皮，上皮外角质化不明显，复合鳞状上层无增生现象，固有膜及黏液腺间偶见炎性细胞浸润，固有膜下层为肌层，肌层纤维排列规则。见图1。
4.讨论
急性咽炎是一种临床常见病、多发病，在现代医学大多数采用抗生素类和抗病毒药物治疗急性咽炎，但效果欠佳，病情易反复。运用中医药治疗该病，具有疗效好，不良反应轻等特点。复方肿节风合剂在临床上用于治疗急慢性咽炎疗效甚好，因此本研究利用动物模型研究其对急性咽炎的治疗作用，并取得良好的实验效果。
急性咽炎是以血白细胞升高为主要指标，白细胞既是炎症反应的效应细胞，也是炎症传导的效应介质，在炎症反应中起关键性作用[3，4]。实验中模型组大鼠白细胞及中性粒细胞明显增多，与空白对照组差异显著（P<0.05），说明急性咽炎模型造模成功。复方肿节风合剂以白细胞为治疗切入点，抑制白细胞反应性升高，并减少中性粒细胞黏附，从而治疗急性咽炎。急性咽炎大鼠经复方肿节风合剂灌胃后白细胞、中性粒细胞下降，说明复方肿节风合剂有明显的抗急性咽炎的药理作用。
急性咽炎的主要病理表现为咽黏膜充血，血管扩张及浆液渗出，黏膜下弥漫性白细胞及淋巴细胞浸润，咽部黏膜肿胀增厚，上皮脱落，重者黏膜溃疡并有炎性渗出物。咽部组织的炎细胞聚集、黏附，促进炎症反应，导致黏膜水肿、血管充血、炎性渗出和组织破坏。实验结果表明，经过复方肿节风合剂治疗后，病理模型动物的症状体征逐渐得以改善，其咽部组织病理切片结果显示复方肿节风合剂可对抗急性炎症早期渗出性水肿，减轻咽部黏膜组织水肿，与模型组组差异显著（P<0.01或P<0.05）。
综上所述，复方肿节风合剂治疗急性咽炎可能机制是：抑制白细胞增加过多；减少组织中炎细胞浸润；抑制毛细血管通透性，减轻黏膜破坏水肿，促进组织细胞修复；减少炎细胞，抑制炎性介质的释放，从而改善毛细血管状态，促进炎症消除。
【参考文献】
[1]李向宇，王新帅,王颖.陈皮利咽合剂对急性咽炎模型大鼠白细胞和咽黏膜影响的研究[J].新中医,2013,45（9）:145-147.
[2]段美秀，王志义.中药咽炎饮抗大鼠急性咽炎的实验研究[J].武汉大学学报（医学版）,2014,35（3）:366-369.
[3]孔冰冰.清热复方制剂用于急性咽炎治疗的药理实验研究[J].现代医院,2011,11（7）:42-44.
[4]王小晓，闫艳仓,王旭丹,等.复方牛蒡子含片的抗炎作用及其对急性咽炎模型大鼠的治疗作用[J].中国实验方剂学杂志，2010,16（11）:147-149.
基金项目：医院制剂“复方肿节风雾化剂”抗炎作用研究，编号：QZYY2013-76.
论文作者:代欣1,吕岑2,王霞1
论文发表刊物:《医药前沿》2017年8月第23期
论文发表时间:2017/9/4
标签：肿节风论文; 咽炎论文; 合剂论文; 复方论文; 大鼠论文; 白细胞论文; 黏膜论文; 《医药前沿》2017年8月第23期论文;