1.湘潭市第一人民医院 重症医学科 411101；2.湘潭市第一人民医院 老年医学科 411101
【摘 要】目的：探究miRNA-122在152例脓毒症肝损伤患者中表达变化及与临床特征分析。方法：选取2015年1月-2016年6月在本院重症医学科收治疗的152例脓毒症肝损伤患者作为研究对象，收集患者临床资料，测定患者第1、5、10天血清中miRNA-122的表达探究其影响因素。结果：脓毒症肝损伤患者在入院第1天、第5天以及第10天的miRNA-122水平与对照组健康人群相比，均存在明显的统计学差异（P＜0.05）。脓毒症肝损伤患者与重症脓毒症肝损伤患者在不同时间段的miRNA-122水平均存在明显的统计学差异（P＜0.05），并且后者的miRNA-122水平均高于前者。脓毒症肝损伤患者与重症脓毒症肝损伤患者在SOFA评分、APECHEⅡ评分以及肾功能不全等方面对比差异具有明显的统计学意义（P＜0.05）。结论：脓毒症肝损伤患者miRNA-122水平可以作为评价病情严重程度的临床标记物。脓毒症肝损伤患者的影响因素主要包括miRNA-122水平、肾功能不全、SOFA评分以及APECHEⅡ评分情况。miRNA-122对脓毒症肝损伤患者病情严重程度影响较大，需要对其进行更深入的研究。
【关键词】miRNA-122；脓毒症肝损伤；肾功能不全；SOFA评分；APECHEⅡ评分
Expression and clinical characteristics of miRNA-122 in 152 patients with sepsis and liver injury
Abstract：Objective：To explore the expression of microRNA-122 and clinical characteristics in 152 patients with sepsis induced liver injury.Methods：152 patients with sepsis induced liver injury were selected from January 2015 to June 2016 in ICU of our hospital，and their clinical datas were collected.The levels of serum microRNA-122 were determined and analyzed in the 1，5，10 days.Results：Combined with the healthy people，the levels of serum microRNA-122 were higher in patients with sepsis induced liver injury in the 1，5，10 days，there were significant differences（P < 0.05）.Compared to patients with early sepsis and liver injury，the microRNA-122 levels were significantly higher in patients with late severe sepsis and liver injury（P < 0.05）.With late severe sepsis and liver injury，those patients had higher SOFA score and APECHE II score，and worse renal function than early sepsis and liver injury（P < 0.05）.Conclusion：Serum microRNA-122 can be a clinical marker in patients with late severe sepsis and liver injury.The influencing factors of patients with sepsis and liver injury mainly include microRNA-122 levels，worse renal function，SOFA score and APECHE II score.It needs an in-depth study of microRNA-122.
Key words：microRNA-122；Sepsis；Liver injury；Renal dysfunction；SOFA score；APECHE
miRNA-122存在于人体的肝脏中，可以对肝脏的生理和病理过程中进行调节，在患者出现肝损伤时，体内会出现miRNA-122表达上调的现象 [1.2]。有研究报导可以将miRNA-122作为脓毒症肝损伤患者预后的重要判定指标[3]，因此探究miRNA-122在脓毒症肝损伤患者中表达变化及与临床特征分析具有重要的意义。
1 研究对象及方法
1.1研究对象
选取2015年1月-2016年6月在本院重症医学科接收治疗的152例脓毒症肝损伤患者作为研究对象，研究对象患者年龄25-62岁，其中早期脓毒症肝损伤患者75例，晚期重症脓毒症患者77例。80例健康人作为对照组。研究对象纳入标准：（1）患者临床症状符合国际脓毒症的判定标准。（2）患者符合中华医学会肝病学分会重型肝病与人工肝组的《肝衰竭诊疗指南》分级标准。（3）患者同意本次研究，并且签署知情同意书。
1.2数据收集
在患者入院第1天、第5天和第10天中收集患者的血清，检测对照组和研究组血清内的miRNA-122水平变化。采用APECHEⅡ评分和SOFA 评分对患者进行测定。另外，记录患者出现的基础疾病、C反应蛋白（CRP）、白细胞以及一般资料情况，探究其影响因素。
1.3实验仪器和试剂
实验采用mirVana miRNA提取试剂盒、天根生化公司的荧光定量检测试剂盒以及梯度PCR仪，另外采用美国Biorad公司生产的荧光定量检测系统。
1.4miRNA-122提取
采集患者静脉周围血液，对其进行3000r/min的离心处理，运用mirVana miRNA提取试剂盒行反转录，之后运用PCR试剂盒进行反应，总体积为20μL，RT反应产物、自备引物以及反向引物的体积分别为2μL、0.4μL和0.4μL，之后运用荧光定量检测仪对miRNA进行定量检测，通过公式1进行计算。
公式1
1.5判定标准
采用序贯器官衰竭估计表（SOFA）评分对患者进行测定，总分为15分，患者得分越高，病情越明显。同时采用APECHEⅡ评分对患者进行测定，总分为20分，患者得分越高，病情越重。
1.7统计学处理
采用SPSS20.0对数据进行统计分析，两组间差异比较采用t检验，计量资料采用以均数±标准（ ）表示。对数据进行正态检验，非正态数据采用中位数表示，P＜0.05表示具有统计学意义。
2 结果
2.1脓毒症肝损伤患者的miRNA-122检测结果，具体数据如表1所示。
在本次分析中，三组患者的miRNA-122水平在第1天、第5天、第10天的比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。另外，在研究组患者的治疗中，发现随着脓毒症病情严重程度加重伴有肝损伤加剧，其miRNA-122表达呈现逐渐提升的趋势，可见其与患者的脓毒症肝损伤病情严重程度存在明显的关联。
3 讨论
脓毒症是重症患者高发病率的疾病之一，进而由脓毒症导致的多器官功能障碍是危重患者死亡的主要原因。脓毒症导致的肝损伤常见于腹腔感染、肺部感染等革兰阴性（G-）菌血症的ICU患者，影响患者的预后与脓毒症的持续时间和严重程度直接相关，主要表现为高胆红素血症和血清碱性磷酸酶升高，以直接胆红素升高为主（4）。miRNA-122是一种微小分子RNA，在肝组织中高表达，占肝脏总miRNA 的70%以上，其与肝细胞表型维持、细胞增殖、物质代谢、感染以及肝细胞癌等有密切关联，因此，深入研究miRNA-122基因功能改变与脓毒症肝损伤发生发展的作用规律，为进一步提高该疾病的临床治疗水平具有重要意义。Leelahavanichkul A的研究发现在脓毒症肝损伤的小鼠模型中，随着细胞因子释放增加而增加了血清中的miR-122表达，导致病情加重（5）。
有研究表明SOCS3在脓毒症肝脏内基因表达增加，考虑为脓毒症产生的炎性因子刺激肝细胞内JAT/SATA信号通路，导致SOCS3负反馈抑制剂表达增加，提示SOCS3在脓毒症肝损伤的发生发展中发挥着重要作用（6）。有生物信息学预测，在脓毒症肝损伤中SOCS3表达增加时，可以通过肝细胞内miRNA-122的下调并甲基化SOCS3而抑制基因功能，可以降低SOCS3的表达（7）。提示在脓毒症肝损伤中下调miRNA-122可靶向抑制SOCS3功能。因此，miRNA-122可通过SOCS3介导的信号通路调节脓毒症肝损伤的发生发展，可成为治疗的重要靶标，也作为一个重要生物标志物预测脓毒症患者病情严重程度有重要作用。因此本实验通过研究不同程度的脓毒症肝损伤患者血清中miRNA-122表达变化与临床特征，探索能有效反映脓毒症肝损伤患者病情严重程度的新标志物，具有重要意义。
本研究表明，通过检测脓毒症肝损伤患者血清中miRNA-122表达发现随着病情加重，而表达水平增加，组间差异具有明显的统计学意义（P＜0.05），可以认为miRNA-122可以有效评估患者的病情危重程度，与Leelahavanichkul A的研究结论基本一致。进一步的研究中，可以将其作为预测脓毒症肝损伤患者预后的重要指标。相关临床特征研究中发现，APACHEⅡ评分、SOFA评分、并发AKI是脓毒症的独立危险因素（8），同时我们的研究与顾永辉（9）的研究结论基本一致。总而言之，脓毒症肝损伤患者的影响因素与SOFA评分、APECHEⅡ评分以及肾功能不全具有明显的关联，并且miRNA-122表达水平对患者疾病的严重程度存在较大的影响，miRNA-122表达越高，脓毒症肝损伤病情越加严重。这提示miRNA-122有望成为脓毒症肝损伤治疗的新靶点。然而，脓毒症肝损伤过程中miRNA-122还通过对哪些靶基因表达的影响来发挥作用，及具体的信号通路，仍有待今后进一步的研究。
参考文献：
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[9]顾永辉 卞叶萍 林兆奋，APACHEⅡ、SOFA评分及降钙素原水平对脓毒症严重度及预后的评估价值，《医学与哲学（B）》 2015年12期
通讯作者：
易钊泉，1982年7月，男，湖南湘潭，研究生，主治医师，脓毒症与肝脏疾病
论文作者:易钊泉1（通讯作者） 范春2
论文发表刊物:《中国蒙医药》2016年4月第4期
论文发表时间:2016/9/26
标签：患者论文; 损伤论文; 评分论文; 病情论文; 血清论文; 水平论文; 统计学论文; 《中国蒙医药》2016年4月第4期论文;