赵振
大庆市疾病预防控制中心 163311
【摘要】目的：对HIV抗体的检测是目前最常用的诊断艾滋病的方法。为此，本文详细阐述了HIV抗体筛查和确认过程中可以采用的各种试验方法。
【关键词】HIV抗体；艾滋病；试验
【中图分类号】R446.61【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）11-037-01
引言 ：
为了做好艾滋病的控制和预防工作，我们必须正确地对HIV病毒的感染作出诊断，在传染源上做好控制工作。目前检测人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体是最常用的诊断艾滋病的方法，这种方法不但特异性、敏感性高，方法简单方便，最重要的原因是HIV抗体在HIV病毒感染后除了早期很短的“窗口期”外的整个生命周期内能够稳定的存在并可以被检测到。而本文着重讨论HIV抗体的检测方法，包括HIV抗体的筛查试验和HIV抗体的确认试验两部分。
1 HIV抗体的筛查试验
根据不同的检测原理可以分为酶联免疫吸附法、免疫层析法和颗粒凝聚法。
1.1 酶联免疫吸附试验（ELISA）
酶联免疫吸附方法又称作酶标免疫分析方法（EIA），是美国食品和医药管理署（FDA）批准的艾滋病毒检查方法。自1985年第一代ELISA试剂诞生以来，随着医药技术和生物技术快速发展，ELISA已经发展到第三代的双抗原夹心法和第四代的抗原抗体联合检测法。目前已经应用的ELISA法有8种，国内使用最广泛的是第三代双抗原夹心法试剂，几乎不用第一代和第二代试剂。国际上有一些国家已经将第四代的ELISA试剂对血源进行筛查，该方法和第三代HIV-1/2试剂相比，检出结果时间要提前4-9天。
酶联免疫吸试验适用于对大批量的标本进行检测，是各大、中、小型医院和各级疾控机构筛查HIV抗体的主要技术方法。其基本原理是先将需要检测的抗体或抗原固定在固体载体的表面，然后将用酶标记后的抗体或抗原和被固定的住的相应的抗体和或抗原发生反应，加底物显色并用酶标仪测定检验结果。该方法可使用尿液、血液和唾液样品[1]。
1.2 快速诊断试验
快速诊断试验具有简便、快捷、不要求特殊设备等优点，适用于基层和应急应用，其最大的缺点在于价格过高，特异性和敏感性低于ELISA，不适用于市内的血液筛选。快速诊断采用的基本原理有三种，即免疫层析、免疫斑点和乳胶凝集。目前在我国批准上市的有金标快速诊断试剂和Abbott生产的Determine试剂。金标法可以适用于初筛检测，凡是鉴定为阳性的人，需要用另外一种方法如ELISA或者蛋白印记法进行确定。而determine分为全血法和血清法两种，其中全血法效果更佳。除了这两种方法以外，还有尿液HIV检测法、唾液HIV检测法和家庭HIV检测法。尿液检验法敏感度较好，但是特异性较差，如果尿液被检测为阳性，还需做其他的检查。由美国食品和医药管理署（FDA）批准的Orasure唾液试剂特异性和敏感性均较高，适用于进行筛查[2]。
1.3 免疫荧光试验
该方法作为HIV检验的补充方法于1992年获得FDA批准，具有较高的敏感性和特异性。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆运用免疫荧光试验测定HIV病毒抗体时一般选用的是间接方法，将HIV抗原和待检测的血清发生作用后，同有荧光标记的生物素抗人IgG结合。这种方法的优点是使用具有荧光标记的生物素抗人IgG可以检测发生于人体上的多个具有不同特异性反应，具有普遍适用性。该方法既可以检测抗体，又可以联合检测抗体抗原。有效试验的阳性、阴性对照必须符合试剂盒的规定。
2 HIV抗体的确认试验
确认试验主要包括免疫印迹试验（WB）、免疫荧光试验（IFA）、条带免疫试验（LIATEK HIVIII）和放射免疫沉淀试验（RIPA）。
2.1 免疫印记试验（WB）
对于HIV抗体的确认诊断，它是首选的试验方法，其检验结果通常被当作判断其他检验方法优劣好坏的“金标准”。WB的敏感性在一般情况下不低于初筛试验，但是特异性很高，这主要是由于基于HIV不同抗原组分的浓缩和分离能够检测出针对不同抗原的抗体，故而可以通过WB检测初筛试验的准确性。试剂有HIV-1/2混合型和单一的HIV-1或者HIV-2型。
2.2 免疫荧光试验（IFA）
IFA具有经济、简便和快捷等优点，曾经被推荐用于诊断WB不确定的样品。其缺点是该方法需要昂贵的荧光显微镜和接受过良好训练的人员，其观察和试验结果易受到主观因素的影响。该试验首先将被HIV感染的淋巴细胞固定在玻璃片上并与待检血液发生反应，之后加入被荧光素标记后的抗人免疫球蛋白，透过荧光显微镜可以看到试验结果，如果细胞浆内出现特殊荧光表明该标本呈阳性[3]。
2.3 条带免疫试验
这种方法在操作的过程中与免疫试验差不多，但是在免疫试验中，抗原采用的是通过化学合成的多肽，而且抗原是采用人工固定的形式。
2.4 放射性免疫沉淀试验
这种方法在运用中充分采用了检测的敏感性和特异性，但是此类方法在检测的过程中时间比较长，而且操作复杂，要借助同位素的分析，首先将被放射性同位素的氨基酸将被感染的细胞放在培养机中，然后分析病毒的复制过程中，在病毒复制中，很多氨基酸就会进入到病毒的蛋白质中，然后借助去垢剂将病毒的细胞分解，将那些反应比较强烈的抗原去除，再将上层的清液与血清混合在一起，如果在检测中含有大量的抗体，那么抗体就会产生沉淀，将病毒的蛋白质分离。
3 结语
艾滋病毒会对人体的免疫系统造成严重的损伤，导致人体出现各类疾病，艾滋病毒的防御工作的前提是诊断艾滋病毒，本文中分析的几种艾滋病抗体的检测方法中，有各自的优点，也存在不足之处，在临床上应用中应该对实际的情况分析，由于艾滋病毒近年来在世界范围内蔓延，对人类的生命造成严重的危险，世界范围内感染艾滋病毒的人越来越多，特别是病毒亚型的进展导致艾滋病毒更难清除，所以，找到科学的检测艾滋病毒的方法还是非常重要的，这对预防和控制艾滋病毒的发展起到重要的作用。
参考文献：
[1]梁释予. 艾滋病病毒实验室检验方法的研究进展[J]. 当代医药论丛,2014,10:53-54.
[2]李昊雪,涛波,杨虹. HIV实验室检测技术研究进展[J]. 医学动物防制,2013,12:1353-1357.
[3]姚瑞霞. 艾滋病病毒实验室诊断方法及患者检测指标[J]. 哈尔滨医药,2015,01:49-50.
论文作者:赵振
论文发表刊物:《系统医学》2016年11期
论文发表时间:2016/9/22
标签：抗体论文; 免疫论文; 抗原论文; 方法论文; 艾滋病毒论文; 特异性论文; 试剂论文; 《系统医学》2016年11期论文;