（1六安市食品药品检验中心 安徽六安 237000）
（2六安市中医院药剂科安徽六安 安徽六安 237000）
【摘要】目的：优选清膈养阴颗粒的最佳提取工艺。方法：采用适合医院制剂生产的提取方法水煎煮法，选择三因素三水平正交试验，以出膏率、浸膏中绿原酸含量为考察指标，对提取次数、提取时间、加水量进行考察。结果：确定的最佳提取工艺为提取2次，每次1h，第一次加8倍量水，第二次加6倍量水。结论：此工艺可作为清膈养阴颗粒的提取工艺，方法简便，结果稳定。
【关键词】清膈养阴颗粒；正交设计；提取工艺；绿原酸
【中图分类号】R94 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）15-0230-02
Optimization of extracting process of QinggeYangyinGranules
ZhengMuyao1,JiangLei2.1 Institute for Drug control of Lu An;2 Dept of Pharmacy;The Traditional Hospital of Luan;Anhui Luan 237000,China
【Abstract】Objective To optimize the extrcting condition for QinggeYangyinGranules.Methods Chosedecoction to extract the ingredient of QinggeYangyin ,use orthogonal design with three factors and three levels and taking the rate of paste,amont of chlorogenic acid of paeoniflorin as the standards to study the extacting frequency, times and amont of water. Results The optimized extracting condition was to add water with 8folds,extrct for 1 hour first time and add water with 6folds,extrct for 1 hour second time. Conclusion The optimized process is convenient and stable.
【Key words】QinggeYangyin Granules; Orthogonal design;Extracting process;Chlorogenic acid
养阴清嗝颗粒是我院的医院制剂，由金银花、芦根、黄芪、白及、甘草等组成，适用于放射性食管炎表现为气阴两虚，或气虚血瘀，或毒伤血络，淤血内阻，甚则热壅肉腐等证。本实验采用正交实验法优选清膈养阴颗粒的最佳提取工艺，以出膏率结合方中君药金银花中主要有效成分绿原酸在干膏中的含量为指标，综合优选出最佳提取工艺。
1.仪器与试药
Agilent 1200高效液相色谱仪（自动进样系统），紫外检测器，Sartorius BT125D电子天平，KQ5200DA超声仪。
绿原酸对照品（中国药品生物制品检定所，110736-200934）乙腈(色谱纯) ，水为双重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。
2.方法与结果
2.1 干膏得率的计算
将正交试验所得各组提取液浓缩并于80℃烘干，移至干燥器中冷却30min，迅速称重，计算干膏得率。
干膏得率=干膏重量/原药材的重量×100%
2.3 干膏中绿原酸含量的测定[1,2]
色谱条件与系统适用性试验色谱柱：Agilent TC-C18(4.6×250mm，5μm)；流动相：乙腈:0.1%磷酸水溶液（13:87）；检测波长：327nm；流速：1.0ml/min；柱温：25℃；进样量：10?l；理论塔板数按绿原酸峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适量，加50%甲醇制成1ml含80μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品适量，研细，称取2g，精密称定，置50ml棕色容量瓶中，精密加入50%甲醇40ml，称定重量，超声处理（功率200W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45um滤膜滤过，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
绿原酸含量（mg/g）=样品峰面积/对照品峰面积×对照品浓度×稀释倍数
2.1 正交实验设计
以提取次数、提取时间、加水量为考察因素，每个因素在预试验的基础上设3个水平。选用L9(34)正交表安排实验，优选提取工艺，见表1,2。
2.2 正交试验及结果
结果分析表明，以出膏率为考察指标，直观分析显示各因素作用主次为A＞B＞C，即提取次数＞提取时间＞加水量；方差分析显示，A因素对结果有显著影响，B、C因素无显著影响。
以干膏中绿原酸含量为考察指标，直观分析显示各因素作用主次为A＞B＞C，其中A3＞A2＞A1，B3＞B2＞B1，C3＞C2＞C1；方差分析显示，A因素对结果有显著影响，B、C因素无显著影响。综合考虑：因素A选提取2次较为合适，因为不能单纯的以出膏率为考察指标，应兼顾主要成分的提取率，提取2次和提取3次比较，绿原酸差别不大。因素B和C从省时、降耗、节约成本考虑可选择提取时间为1h，加水量为8倍，故最佳工艺考虑为A2B2C2，鉴于第一次加水后煎煮过滤，药渣可吸收部分药液，故第二次加水量根据实际情况可调整为6倍量，即金银花等十味药材加水煎煮2次，第一次加入8倍量水，煎煮1h，第二次加入6倍量水，煎煮1h。
表1 提取因素水平表
3.讨论
结合本制剂的实际情况，提取工艺应采取传统的水提工艺，方法简单，便于操作。若单纯的以出膏率为指标并不能很好反应有效成分的提取情况，故在提取过程中，结合君药金银花中主要有效成分绿原酸在干膏中的含量作为另一指标进行优选。由实验结果分析可以看出，若单纯以出膏率为指标会选择提取次数为三次，而随着提取次数的增加，杂质也会有所增加，但绿原酸含量并未有明显增加，故综合考虑选取的提取次数为2次；提取时间、加水量对出膏率和对绿原酸含量无显著影响，故综合考虑选择提取时间为1h，第次加水量为8倍，第二次加水量为6倍。
本文通过正交试验设计的方法优选清膈养阴颗粒的提取工艺，确定了提取的最佳工艺，优选后的最佳工艺条件提取2次，每次1h，第一次加8倍量水，第二次加6倍量水。通过验证试验证明最佳工艺稳定、可靠。
【参考文献】
[1]张婷，美尔哈巴?热西提，林潇等.HPLC-MS/MS法测定黄芩颗粒中绿原酸和黄芩苷[J].中草药,2012,43(4):711-712.
[2]肖卓炳，郭瑞轲，郭满满等.金银花中绿原酸超声微波双辅助提取工艺优化[J].食品科学,2012,33(22):111-114.
论文作者:郑牧垚1,姜蕾2
论文发表刊物:《心理医生》2016年15期
论文发表时间:2016/9/30
标签：正交论文; 工艺论文; 因素论文; 颗粒论文; 加水论文; 量为论文; 指标论文; 《心理医生》2016年15期论文;