小剂量MIP-1α联合IL-8体外对造血干/祖细胞保护的实验研究

小剂量MIP-1α联合IL-8体外对造血干/祖细胞保护的实验研究

陆华[1]2001年在《小剂量MIP-1α联合IL-8体外对造血干/祖细胞保护的实验研究》文中研究表明目的:本实验旨在通过研究体外小剂量(1ng/ml或10ng/ml)MIP-1α联合IL-8在大剂量化疗药物阿糖胞苷(80mg/L Ara-C)存在的环境中,对人正常早期造血干/祖细胞(CD_(34)~+细胞)的保护作用,探讨二者联合用于临床白血病患者大剂量化疗的可能性,以期为临床提供一种目前在国内技术条件下能实现的安全、可靠的造血干/祖细胞保护方案,并为今后这两种细胞因子的临床应用奠定实验基础。 方法:取患者骨髓,以淋巴细胞分离液(比重1.077)为介质,离心分离单个核细胞。将所得细胞培养在含IL-3和GM-CSF的液体体系中,同时加入MIP-1α和/或IL-8,作用24小时后,加入大剂量Ara-C,再过24小时后洗涤去掉处理因素(以上步骤简称为“Ⅰ期处理”)。将Ⅰ期处理后的细胞做胎盘兰拒染实验,确定细胞活力后,作如下后续实验:①在含有IL-3和GM-CSF的培养液中做Ⅱ期液体培养,7天后,计数各组的活细胞,并与Ⅱ期液体培养前的情况比较,以了解经Ⅰ期处理后存活细胞的增殖能力。②半固体集落培养,计数第3天到第7天的CFU-GM、CFU-E和CFU-Mix,以检测存活细胞的集落形成能力。③流式细胞仪计数各组CD_(34)~+细胞,比较各组经Ⅰ期处理后CD_(34)~+细胞的存活情况。④部分标本在Ⅰ期处理时只经MIP-1α和/或IL-8处理,不经Ara-C处理,用流式细胞仪检测所得细胞的周期分布情况,以初步探讨MIP-1α联合IL-8对人正常造血干/祖细胞保护的机制。另外利用免疫组化染色技术观察CD_(34)~+细胞的形态。 结果:经过Ⅰ期处理后,无论是1ng/ml浓度还是10ng/ml浓度下,各组的活细胞数均无显着差异(p>0.05)。后续实验则表明1ng/ml浓度下,联合组与其它对照组比较,11期液体培养结果,集落培养结果,以及CD3/细胞计数均无显着差异O列刀5):1加g/ml浓度下,*1V1。和1卜8联合组与其它对照组比较,无论是*期液体培养结果,集落培养结果,还是CD34“细胞计数均相差显着O<0刀5卜两种浓度中,各组集落培养均未见白血病细胞丛生长。周期分析结果显示,* MIPIa和 IL七联合组中的 GO/G;期细胞低于处理前组(叼刀5)而高于其它对照组…功刀5卜 结论:*).lug/ml浓度的 MIPIa与相同浓度的 IL叱联合使用,对CDN”细胞无肯定的保护作用。10ng/ml浓度的 MIPI a与相同浓度的 IL七联合使用,对CD34”细胞有明显的保护作用八2)在我们研究的浓度范围内,MIPl a与相同浓度的 ILE联合使用对白血病细胞没有明显的保护作用。*).两种因子在103g/ml的浓度下联合使用,能将CD3厂细胞抑制在G丫G;期。

冷怀明[2]2002年在《《第叁军医大学学报》2002年第24卷主题词索引》文中认为外文字母、数字1 2 5I标记1 2 5I-RGD - 4CY肿瘤αvβ3受体显像的实验研究 (李前伟等 ) 2 4(1 1 ) :1 340 - 1 3421 甲基 4 苯基吡啶MPP+ 对体外培养的中脑多巴胺能神经元活性的影响 (陈锦华等 ) 2

参考文献:

[1]. 小剂量MIP-1α联合IL-8体外对造血干/祖细胞保护的实验研究[D]. 陆华. 第叁军医大学. 2001

[2]. 《第叁军医大学学报》2002年第24卷主题词索引[J]. 冷怀明. 第叁军医大学学报. 2002

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小剂量MIP-1α联合IL-8体外对造血干/祖细胞保护的实验研究
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