长沙医学院2016级本科口腔医学6班 湖南长沙 410219）
[摘要]目的:观察金银花和甲硝唑联合用药对大鼠实验性牙周炎的治疗作用。方法：48只SD大鼠随机分为模型组和正常组。利用细菌接种和丝线结扎方法建立牙周炎动物模型。将造模成功的24只SD大鼠随机分为A组（最佳金银花剂量灌胃+相同剂量生理盐水注射）；B组（用相同剂量生理盐水灌胃+10ug/ml甲硝唑注射）；C组（最佳金银花剂量灌胃+10ug/ml甲硝唑注射）；D组（相同剂量生理盐水灌胃+相同剂量生理盐水注射）并对照观察，检测菌斑指数(PLI)、龈沟出血指数(SBI)和牙周探诊深度(PD)。结果：通过比较PLI、SBI和PD，模型组和正常组之间差异有统计学意义(p<0.05)，造模成功。对照组与模型组比较，差异有统计学意义(p<0.05)，C组与其他三组比较，（p<0.05），A组与B组比较，（P>0.05）。结论：金银花和甲硝唑联合用药对大鼠实验性牙周炎具有一定的治疗作用。
[关键词]金银花;甲硝唑;牙周炎;大鼠
牙周炎(periodontitis)为临床牙科常见疾病，是由菌斑、牙石、创伤性咬合、食物嵌塞等因素引起的牙周支持组织的慢性炎症，以35岁以上人群为主要发病群体[1]。据临床资料记载，发病初期并无明显特异性表现，仅有部分患者可出现继发性牙龈出血或口臭等表现，与牙龈炎症状类似，因此患者易忽视而导致炎症不断发展，并逐渐形成牙周袋，并出现牙周溢脓及牙齿松动等表现以往临床针对牙周炎多采用甲硝唑治疗，甲硝唑是硝基咪唑类的衍生物，具有抗厌氧原虫和厌氧菌的作用，被临床广泛用于治疗厌氧菌引起的系统或局部感染，口服可快速进入唾液、乳汁、肝脓肿的脓液中，从而发挥药效，对病菌及炎症细胞进行抑制，达到治疗效果。但随着用药次数的增多，耐药性、副作用、见效慢等问题逐步出现。不良反应包括刺激胃肠道，抑制白细胞的情况等，治疗起效慢导致患者无法在短期内达到预期效果。目前对慢性牙周炎尚缺少理想的治疗方法，本研究采用细菌接种和丝线结扎等方法建立牙周炎动物模型，观察金银花和甲硝唑联合用药治疗大鼠实验性牙周炎实验效果，现报道如下。
1材料和方法
1.1动物及饲料
SD大鼠，SPF级，48只，体重（150d20)g，雌雄各半，来自长沙医学院实验动物中心。
1.2实验用物品
金银花漱口液：（长沙医学院中医实验室）；甲硝唑片：国药准字H41020125（天方药业有限公司）
1.3大鼠牙周炎动物模型的建立
100μL的2-4×1010CFU/ml的牙龈卟啉单胞菌和4-6×108CFU/ml的伴放线杆菌加入到2%的羧甲基纤维素钠CMC中配置细菌混悬液，腹腔麻醉大鼠，开口器固定大鼠头部暴露双侧上颌磨牙，探针分离牙龈，结扎丝结扎双侧上颌第一磨牙，如结扎丝脱落，随时结扎。细菌混悬液涂抹结扎线，隔一天一次，连续8次。期间喂以普通饲料和自来水。连续观察至第5周。实验设置一系列不同剂量的金银花提取物分别为1ml/100g、2ml/100g、4ml/100g、8ml/100g，对牙周炎大鼠进行灌胃实验。早晚各一次，观察分析实验结果从而确定最佳灌胃金银花的最佳剂量。检测大鼠菌斑指数(PLI)、龈沟出血指数(SBI)和牙周探诊深度(PD)，判断建模成功与否。
取24只口腔健康状况、体重、周龄等比较均无显著性差异的建模成功实验鼠，随机分为4个组，编号为A,B,C,D,每组6只编号为A1-6、B1-6、C1-6、D1-6。建立牙周炎大鼠模型7天后开始对大鼠分组进行干预治疗：A组最佳金银花剂量灌胃+相同剂量生理盐水注射；B组用相同剂量生理盐水灌胃+10ug/ml甲硝唑注射；C组最佳金银花剂量灌胃+10ug/ml甲硝唑注射；D组相同剂量生理盐水灌胃+相同剂量生理盐水注射。ABCD各组均连续治疗7天。连续观察至第10周，比较牙周相关指数:PLI、SBI、PD。
1.4观察指标
1.4.1牙龈指数检查方法[2]：0=牙龈健康；1=牙龈轻度炎症：牙龈的颜色有轻度改变并轻度水肿，探诊不出血；2=牙龈中等炎症：牙龈色红，水肿光亮，探诊出血；3=牙龈严重炎症：牙龈明显红肿或有溃疡，并有自发出血倾向。
1.4.2松动度检查方法：颊舌向松动者为Ⅰ;颊舌向、近中远中向均松动者为Ⅱ；颊舌向、近中远中向和垂直向均松动者为Ⅲ。
1.4.3牙周袋的深度[3]：用牙周探针探选用牙的牙周袋，每牙选近中颊、颊侧、远中颊3个点测量，取均值。
1.5统计方法
全部数据采用SPSS21.0进行分析，显著水平取a=0.05。所有的统计检验均采用双侧检验，组间比较采用t检验，p值<0.05将被认为差别有统计学意义。
2.结果
2.1比较模型组和正常组大鼠PLI、SBI、PD
通过PLI、SBI、PD检验，证实建立牙周炎动物模型成功（见表1)。
组间比较，p<0.05。
2.3金银花和甲硝唑联合使用对PLI、SBI、PD的影响
3.讨论
慢性牙周炎是最常见的一类牙周炎，由长期存在的慢性牙龈炎向深部牙周组织扩展而引起。因此早期诊断和治疗牙周炎十分重要。本实验所采用的方法是根据公认的牙周炎动物造模方法。充分利用、细菌接种和丝线结扎等促进牙周炎发生发展的全身和局部因素，建立牙周炎动物模型。实验开始第5周后，模型组大鼠上颌双前牙丝线缝扎处可见大量软垢附着，牙龈呈鲜红色，松软光亮，触之易出血，龈乳头糜烂、坏死，牙周袋形成、加深;体重明显减轻，皮毛无光泽，肢体卷曲，甚至出现烦躁不安等表现。PLI，SBI，PD指标的检测表明造模成功。
流行病学研究显示，慢性牙周炎是成年人牙齿缺失的主要原因，严重影响患者的日常生活质量。慢性牙周炎是一种以菌斑生物膜为始动因子、多种因素共同作用导致四种牙周支持组织（牙龈、牙周膜、牙槽骨和牙骨质）破坏为特征的慢性炎症性疾病[4]。主要临床表现是牙龈炎症、出血、牙周袋形成、牙槽骨吸收、牙槽骨高度降低、牙齿松动移位、咀嚼无力，严重者牙齿可自行脱落或者导致牙齿拔除，是我国成年人丧失牙齿的首位原因。其病因有牙菌斑微生物、牙石、食物嵌塞、糖尿病、不良习惯、吸烟等。其治疗目标是去除菌斑生物膜，改变局部炎症微环境，抑制牙周组织破坏的进展。
机械性清创治疗是慢性牙周炎的主要治疗方式，龈上洁治、龈下刮治与根面平整（subgingival scaling and root planning , SRP）等基础治疗术是最常见的牙周治疗方式，已经被临床证明能够有效地减少牙周炎症和探诊深度、改善临床附着水平。但龈上洁治、SRP等基础治疗术也存在一些局限性，如器械很难完全到达深而复杂的牙周袋以及狭窄的根分叉和根面凹陷等部位，也无法清除位于牙本质小管内的微生物病原体[5]。
因此，对于慢性牙周炎患者可辅助局部或全身抗生素治疗，以期加强临床疗效。临床上常用甲硝唑（metronidazole,MNZ），甲硝唑具有抗滴虫病、阿米巴病和广谱的抗厌氧菌作用，能有效地杀灭厌氧菌，是WHO推荐的抗厌氧菌感染首选药物。甲硝唑对多数厌氧菌所致的慢性牙周炎有强大的抗菌作用，在临床上用于辅助牙周基础治疗，症状改善短期内显著。李慧宏[6]使用甲硝唑片治疗43例牙周炎患者，结果总有效率为86.05%。洁治、刮治术联合甲硝唑对牙周炎疗效更佳，陈传耀[7]等在服用甲硝唑的基础上加牙齿洁治术治疗牙周炎，总有效率为93.39%。但极易复发，且随之带来的耐药菌群发生及全身不良反应等问题仍无法解决。同时因其胃肠道等不良反应常导致患者依从性不佳，而限制其应用。
金银花，为忍冬科植物忍冬（Lonicerajaponica Thunb）的干燥花蕾或带初开的花。金银花既能宣散风热,还善清解血毒,用于各种热性病，具有抗病毒、增强免疫、抗炎及解热、抗血小板聚集、降血脂、降血糖、抗生育、抗过敏、兴奋中枢、抗内毒素、利胆、保肝、抗肿瘤等功效。其中发挥药理作用的有效成分为挥发油、有机酸中的绿原酸和异绿原酸。近年来,随着对金银花研究的不断深人,金银花具有广谱的抗菌作用。宋海英等发现,金银花对白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌等细菌均有显著的抑菌作用。金银花药理作用多样,但在临床实践中,多与其他中药或西药联合应用。
近年来中医药以疗效稳定、毒副作用小、弥补西医偏重局部的缺陷及改善生活质量等优势逐渐被应用辅助治疗牙周炎，受到临床医师的关注。中医药可以通过多种药物的配伍作用起到控制菌斑微生物、消炎、促进组织再生的协同作用，对牙周炎的治疗效果明显。中医学认为，牙周炎属中医的“牙宣、齿动、齿漏”范畴，齿为骨之余，为肾所主，并为足阳明胃经所络，故与胃、肾关系密切，胃火炽盛及肾亏虚是其主要机制，所以在治疗上多采用补肾、清胃火之法[8]。中西医结合治疗牙周炎，既能发挥西药的速效作用，也能发挥中药多成分协同治疗作用，从而减少用药量，缩短用药时间，降低不良反应。
许多天然药植物具有一定的抑菌作用，其抗菌谱广，毒性低，过敏反应少，可以联合应用，且资源丰富，已变成牙周病防治的热点领域之一。
本实验结果显示，金银花和甲硝唑联合用药治疗大鼠实验牙周炎有效，能降低菌斑指数、龈沟出血指数、牙周探诊深度。由于模型组比例较小，在统计分析中可能存在检验效能不足的问题，对客观问题的说明在某种程度上有一定局限性，需要进一步研究论证。
参考文献
[1]李娜,文冰,江莉莉,帅宾宾,陈福清,张琴,胡妮娅.三种不同含漱液对口腔超声洁治时空气中菌落数的影响[J].中国感染控制杂志,2019,18(03):193-199.
[2]朱宇锋.中西医结合在慢性牙周炎治疗中的有效性[J].现代诊断与治疗,2017,28(17):3164-3165.
[3]巫金娜.金银花含漱液联合牙周基础治疗对重度牙周炎疗效的临床研究[J].吉林医学,2016,37(08):1893-1895.
[4]刘佳. 复合中药制剂局部应用辅助治疗慢性牙周炎临床效果评价[D].河北医科大学,2016.
[5]牛志英,王郑军,周朝宇.养肾平消方联合甲硝唑片治疗慢性牙周炎60例[J].中医研究,2013,26(06):34-35.
[6]李慧宏,杭凊.中草药配合治疗牙周炎疗效观察[J].中华中医药学刊,2013,31(02):435-437.
[7]陈传耀,曾智.中西医结合治疗牙周炎引起口臭疗效观察[J].吉林中医药,2008(07):505-506.
[8]袁萍 ,姚曙光.金银花敷贴含服治疗急性牙周炎[J].内蒙古中医药,2001(02):37.
论文作者:陆慧君1张峥2余芳3张宁4彭智杰5陈昱安通讯作者
论文发表刊物:《医师在线（学术版）》2019年第17期
论文发表时间:2019/10/28
标签：牙周炎论文; 甲硝唑论文; 牙龈论文; 剂量论文; 大鼠论文; 生理盐水论文; 炎症论文; 《医师在线（学术版）》2019年第17期论文;