天津市宁河区疾病预防控制中心检验科 301500
摘要：生活饮用水对社会上生存的每一个人来说都是必不可少的，国家政府和相关部门要保障人们的生活质量水平和身心健康就必须要重视起用水安全问题，这样才能更好的维持社会的安全和稳定。在本文中，笔者将针对生活饮用水中的卫生检测进行讨论，特别是针对总大肠菌群的两种检验方法进行讨论，希望能够帮助民众在未来更加安全、放心的用水。
关键词：生活饮用水；微生物检验；方法和评价
伴随着社会经济建设的不断发展，人们的生活水准也有了质的飞跃。在当前这个时代，由于时代不断地进步，以及民众自身经济水平的提高，对生活质量也有了更高的要求。而生活饮用水的质量问题，就是民众最为关注的问题之一。这不仅仅是因为生活饮用水关系到民众日常的生活和生产，更是因为生活饮用水的质量直接关系到民众的身体健康。对于普通人来说，水是必不可少的。从生理学上来解释，水不仅仅是人体构成的重要物质之一，同时对于人体体温的调节以及人体的新城代谢都有着极为重要的作用。在这样的情况下，不仅仅是民众个体，政府自然而然也会重视起生活饮用水的质量问题。而我国政府，更是根据社会情况的不同，多次修改了生活饮用水的质量标准，希望能够为民众带来更加便捷、绿色的生活。
一般情况，生活饮用水都需要经过过滤、沉淀、消毒等步骤，让水中有害的微生物有效减少后再进行供水使用，避免造成人体上的不适。然而，从目前的情况上来看，水源污染、用水质量不合格、供水管道损害等情况时有发生，威胁到民众的用水安全。因此，在这样的情况下，如何提高生活饮用水质量，保障民众的用水安全就成了国家政府和相关部门最为重要的议题之一。而除开因为供水管道损害在供水过程中造成的水污染，加强生活饮用水微生物检验就成了保障用水安全的重要手段之一。就目前我国的情况来说，对于生活饮用水的质量需要达到在2006年底由卫生部和国家标准化管理委员会修订并于2007年7月1日全面实施的《生活饮用水卫生标准》（GB5749-2006）的要求。新的《生活饮用水卫生标准》对于水质的要求更加严格，水质指标从原来的35项增加至106项，总共增加了71个项目。而在这71个项目中，对于微生物指标也增加了4项，同时规定CFU/mL为100，并且绝对不能检出总大肠菌群。在本文中，笔者就将针对总大肠菌群的两种检测方法进行分析，判断出其中的差别。
一、多管发酵法
对管发酵法是针对民众生活饮用水中总大肠菌群的检测方法之一。此方法是根据总大肠菌群的特性来进行。由于总大肠菌群属于革兰氏阴性无芽胚杆菌，因此当培养温度达到37摄氏度的时候，如果进行24小时的培养，那么就会发酵乳糖并产出酸和糖，同时还具有厌氧和需氧的特性。
（一）实验器材
冰箱、灭菌试管、灭菌吸管、载玻片、试管（带试管塞）、小倒管、试管架、量筒、酒精灯、恒温箱、移液管、吸耳球、接种环、蛋白胨培养液、EC培养液、烧杯、玻璃棒、电子天平、取样勺、标签纸、记号笔、灭菌锅、蒸馏水、洗瓶、其他辅助实验器材等
（二）实验步骤
1）首先要在双料乳糖蛋白胨培养液以及单料蛋白胨培养液中放入不同量的水样。水样的量可选取10mL和1mL，而蛋白胨培养液分别需要10mL。在此之后，还需要采取1mL的水样与9mL的无菌生理盐水混合到一起。然后再将此溶液取1mL放进单料乳糖蛋白胨培养液中，并且对于每一种稀释度的样品进行5管接种。
2）在进行水样取样的时候，如果发现水源被污染的十分严重，那么就需要加大稀释度。而如果水样少于1mL的时候，那么在稀释的时候应当稀释10倍再进行接种。当然在接种的时候应当采取逐次递增的方式来进行稀释，稀释的时候还需要注意，所采用的吸管必须要是灭菌吸管。
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3）在接种之后，就需要将其放入恒温为37摄氏度的恒温箱中进行培养，培养应当要持续24小时。24小时之后，需要对试管进行观察，看其中是否有酸和气的产生。如果没有产生酸和气，那么对于总大肠菌群的检测结果为阴性。如果有，那么还需要进行其他的操作来进行检验。
4）当发现试管中溶液产生了酸和气的时候，首先要将溶液放置于伊红美蓝琼脂板之中进行转种，并且在放入恒温箱中进行时间为24小时的培养。24小时之后对伊红美蓝琼脂板上的菌落进行观察并进行染色，随后再采用镜检的方式来查看其结果。如果证实为革兰氏阴性无芽胚杆菌，那么还需要使用乳糖蛋白胨培养液来进行培养，并且同样需要放置于恒温箱中度过24小时的培养期。如果发生了产酸气的现象，那么总大肠菌群结果则为阳性。
二、滤膜法
使用滤膜法对总大肠菌群进行检测，可以十分精确的检测出水样中的总大肠菌群。采用滤膜法主要是采用对水样过滤的方式来进行，其大致的操作方法就是通过对乳糖黏贴微孔滤膜，然后再在恒温箱中进行培养，通过观察是否有产酸产气的现象以此来检测出水样中的总大肠菌群。
（一）实验器材
0.45 μm 微米孔滤膜、分度吸管、恒温箱、电子天平、冰箱、显微镜、试管、酒精灯、锥形瓶、载玻片、抽滤设备、无齿镊子等其他辅助实验器材。
（二）实验步骤
1）采用滤膜法首先要做的就是灭菌，而灭菌时所常见的手法有两种，一种是滤器灭菌法，一种是滤膜灭菌法。滤器灭菌法是使用火焰进行高温灭菌，通常灭菌时间会需要20~25分钟。而滤膜灭菌法就是将滤膜加入烧杯之中，之后倒入蒸馏水，通过将水连续煮沸的方法来达到灭菌的目的，煮沸的次数需要连续3次。
2）在灭菌之后要做的就是对水样进行过滤。在进行水样过滤的时候需要用到灭菌滤膜和无齿镊子。将滤膜取出后放到无菌滤床上，之后将100mL的水样注入到过滤器当中，并打开滤器的阀门使其进行抽滤，从而使得水样可以顺利进行过滤。
3）在经历了灭菌和过滤之后，最终就是要对水样进行培养。在这一个环节，需要的是在水样过滤后，对水样进行抽气。当抽完气候马上关闭过滤器的阀门，同时将滤膜放置到品红亚硫酸钠培养基中，再放入恒温箱进行培养。通过培养的结果来判断水样中的总大肠菌群结果。
三、关于两种检验方法的评价
采用这两种方法进行检验有着不同的好处。采用多管发酵法能够通过反复的操作检测出水样中的微生物含量。然而使用多管发酵法的实验步骤较为繁琐，所使用的时间也相对较长。因此在对一些杂质含量比较低的水样检测中，采用滤膜法更为恰当。因此，从两种检测方法的优劣来说，如果是针对较为专业的、严谨的生活应用水微生物检验，应该采用多管发酵法。而从检验的结果来看，滤膜法则较为精密。
结束语
综上所述，在人类社会的生活与生产当中，水是必不可少的。而用水安全也关系到人们生活质量的水平以及身体的健康。因此，在对于生活饮用水的卫生检验上一定不能掉以轻心，特别是对于总大肠菌群的检验，一定要加强再加强，这样才能保障人们的用水安全。
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[5]肖生广.生活饮用水微生物检验方法和评价标准研究[J].世界最新医学信息文摘：连续型电子期刊，2015（60）
论文作者:刘杰
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2017年第23期
论文发表时间:2018/1/12
标签：滤膜论文; 生活饮用水论文; 水样论文; 微生物论文; 培养液论文; 蛋白胨论文; 用水论文; 《中国误诊学杂志》2017年第23期论文;