湖南省郴州市第三人民医院 检验科 湖南郴州 423000
【摘 要】目的：分析微柱凝胶卡式法在临床输血中的应用价值。方法：选取2013年8月~2014年8月期间收治的有输血史、妊娠史以及短时间内需多次输血的患者240例，于输血前采取微柱凝胶卡式法对血液标本进行抗体筛检，筛检阳性患者，并进行抗体特异性的鉴定，再选取相应抗原为阴性的患者，对两组患者进行交叉配血检测，同时与凝聚胺法检测结果作比较。结果：微柱凝胶卡式法检测的不完全抗体检出率为97.67%，凝聚胺法不完全抗体检出率为85.42%，两种检测方法不完全抗体检出率比较差异有统计学意义（P<0.05）；12例交叉配血不合标本中，微柱凝胶卡式法对直接抗人球蛋白检出阳性率为58.33%，凝聚胺法对直接人球蛋白检出阳性率为50.00%，但两种检测方法阳性检出率比较差异不显著（P>0.05）。结论：在临床输血中采取微柱凝胶卡式法可有效保证其安全性；交叉配血前，对患者进行不规则抗体筛检，对有妊娠史、输血史及短时间内需多次输血的患者是非常重要的。
【关键词】临床输血；微柱凝胶卡式法；不规则抗体；筛检；交叉配血；安全性
输血是临床用于特殊治疗及抢救患者生命的重要措施，而输血前对患者进行血型鉴定，是保证交叉配血中输血安全的关键所在。传统的交叉配血方法有聚凝胺法、盐水法、酶法等，但这些处理方法存在操作繁琐、检验时间长、灵敏度低及操作过程中影像因素多的缺点，难以保证输血安全。而微柱凝胶卡式法可有效避免传统交叉配血方法的缺点，具有操作简便、安全、灵敏度高的优点，在血型血清学检测中得到广泛应用[1]。由此，我院对2013年8月~2014年8月有输血史、妊娠史以及短时间内需多次输血的患者240例的临床资料进行分析，旨在探讨微柱凝胶卡式法的临床价值。
1 资料和方法
1.1 一般资料
选取2013年8月~2014年8月有输血史、妊娠史以及短时间内需多次输血者的备血和配血标本240例，男125例，女115例，年龄6~82岁，平均（58.6±2.4）岁。有输血史173例，妊娠史62例，短期内多次输血5例；其中输血史合并短期内需多次输血的患者有29例，妊娠合并输血史有12例，妊娠史合并输血史及短期内需多次输血的患者有2例。
1.2 方法
1.2.1 仪器与试剂选择
选择血型定型检测卡、抗人球蛋白检测卡，ABO血型反定型选择抗体筛选红细胞试剂盒、红细胞试剂盒及谱细胞，并提供离心机及孵育器。
1.2.2 抗体筛查
本组所有血液标本进行交叉配血检测，均采取微柱凝胶卡式法进行抗体筛检，严格按照试剂盒及仪器说明书进行。入院后，抽患者静脉血清40ul，与浓度为5%的筛细胞悬液20ul混合，并放入反应孔内，在37℃温度环境下，孵育10~15min，并采用离心机离心，观察其反应结果。根据红细胞筛选试剂盒说明书的要求对血液标本进行判读，若筛查结果呈阴性，则需进一步进行交叉配血检测。对交叉配血不合的标本行抗体筛检。筛查结果呈阴性，但交叉配血检测中出现主侧凝集者，对患者血样标本进行抗体特异性鉴定，将鉴定结果与谱细胞反应结果进行对比，对其抗体类型进行分析，最终筛选出抗体及相应抗原为阴性的同血型供血者或受血者进行交叉配血试验。
1.2.3 直接抗人球蛋白检测
对交叉配血次侧凝集者及交叉配血不合的血液标本进行直接抗人球蛋白试验，判断红细胞对血型抗体的灵敏度，同时对供血 者血浆标本，行不规则抗体筛查[2]。
1.3 观察指标
详细记录两种检查方法的不完全抗体检出率及人球蛋白检出率，对其进行统计分析。
1.4 统计学处理
详细统计本组结果，计数资料位以（%）表示，组间比较采取χ2检验，（P<0.05）时则代表组间计数资料比较差异有统计学意义。
2 结果
2.1 交叉配血结果
采用微柱凝胶卡式法进行交叉配血检测中，有8例血样标本出现主侧凝集或次侧凝集，比例为3.33（8/240）。凝聚胺法配血检验中，有35例血样标本出现主侧凝集和次侧凝集，比例为14.58%（35/240）。微柱凝胶卡式法检测的不完全抗体检出率为97.67%（232/240），凝聚胺法不完全抗体检出率为85.42%（105/240），两种检测方法不完全抗体检出率比较差异显著（P<0.05），有统计学意义。
2.2 抗体筛查结果及直接人球蛋白试验
经交叉配血检测，共检出102例血样不合标本，其中有3例抗体筛查呈阳性，占2.94%；共检出12例交叉配血不合及出现次侧凝集的标本，微柱凝胶卡式法检测直接抗人球蛋白结果阳性者有7例，阳性检出率58.33%，凝聚胺法结果阳性者有6例，阳性检出率为50.00%，两种方法检测的阳性率比较差异（χ2=1.3975，P=0.2371），无统计学意义。
3 讨论
输血是临床治疗的重要措施，输血前进行血型鉴定、抗体筛查、交叉配血检测及血液免疫学检查等多种方法，对保证输血安全有重要意义，其作用原理均为抗体、抗原反应。凝聚胺法、盐水法及抗人球蛋白法是以往临床常用于输血检验的方法，其中，凝聚胺法操作简便，且能在短时间检测出结果，但受血浆蛋白及冷凝集素等因素的影响，难以检测出Kell血型系统中的抗K抗体，且不适用于某些特殊血型的抗体检测。盐水法操作简便，但不完全抗体检出率低。而抗人球蛋白检出率相对较高，但操作繁琐、且耗时长，存在一定的局限性[3]。
微柱凝胶卡式法是微柱凝胶技术与免疫血清学技术结合的产物，与传统检测方法相比，具有操作简单、灵敏度高、特异度高、重复性好等优点。有文献报道，微柱凝胶卡式法较聚凝胺法的灵敏度高3个滴度左右，较抗人球蛋白检测高出5个滴度左右，且特异度高[4]。本研究比较了两种检测方法对不完全抗体的检出率，结果发现微柱凝胶卡式法对不完全抗体检出率（97.67%）高于凝集胺法的检出率（85.42%），提示微柱凝胶卡式法的灵敏度高，与文献报道一致[5]。本研究采取微柱凝胶卡式法检测出的7例阳性标本中，有2例为假阳性，主要原因是血样标本因球蛋白浓度过高所致。因此，交叉配血检测中采取微柱凝胶卡式测定时，所有标本均须完全抗凝，且红细胞的浓度因维持在0.6%~1.0%。本组经抗体筛查有3例阳性标本，说明存在妊娠史或输血史及短时间内需多次输血的患者极易会出现不规则抗体，针对此类患者，输血前，首先应筛查与其相符的血液，以保证临床输血安全[6]。
综上所述，在交叉配血检验中，采取微柱凝胶卡式测定具有操作简便、灵敏度高、特异度高的优点，可保证临床输血安全，可推荐临床使用。
参考文献：
[1]周雪丽,阎石,李鹏等.微柱凝胶卡式法Coombs试验在自身免疫性溶血性贫血诊断中的应用[J].中华血液学杂志,2012,33(1):31-33.
[2]叶巧国,杨毓,何静等.微柱凝胶卡式法在交叉配血及不规则抗体检测中的应用[J].现代医院,2011,11(12):59-61.
[3]陈丽娟,刘燕明.微柱凝胶卡式法不规则抗体筛查与输血安全[J].中国输血杂志,2011,24(10):884-885.
[4]刘芳.微柱凝胶卡式法在临床安全输血中的应用价值[J].中国当代医药,2015,22(4):132-134.
[5]陈丽娟,高华英.微柱凝胶卡式法交叉配血次侧不合原因分析[J].北京医学,2010,32(8):686-687.
[6]黄柳梅.达亚美微柱凝胶卡式法在输血相容性检验中的优越性[J].医药前沿,2014,12(16):124-124.
论文作者:段炼
论文发表刊物:《航空军医》2016年4期
论文发表时间:2016/6/1
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