南通市中医院 江苏南通 226001
摘要：目的：测定野菊花中当归酰豚草素B的含量。方法：采用高效液相色谱法测定野菊花中当归酰豚草素B的含量，流动相为乙腈-水（65：35），柱温300℃；流速1.0ml/min；检测波长205nm。结果：当归酰豚草素B在4.004-40.04µg/ml的范围内线性良好（r=0.9998），平均加样回收率96.67%，RSD=1.51%，野菊花中当归酰豚草素B的平均含量为0.13%。结论：该方法重复性好、精密度高，可用于测定野菊花中当归酰豚草素B的含量。
关键词：野菊花；当归酰豚草素B；含量测定
野菊花为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥头状花序。以色黄无梗、完整、气香、花未全开者为佳[1]。《名医别录》中记载野菊花“性苦、辛，微寒，归肺肝二经”，具有“清热解毒、疏风平肝”的功效。药理研究表明，野菊花具有抗微生物、抗炎、抗肿瘤、保肝、抗血小板聚集等作用，临床用于治疗风热感冒、肺炎、慢性咽炎、病毒性肝炎等疾病[2]。
野菊花富含黄酮类、倍半萜类、挥发油类、有机酸类等多种成分，有研究表明当归酰豚草素B是野菊花抗乙肝病毒的活性成分[3]，但这种成分的含量测定并不多见，本研究拟对野菊花中当归酰豚草素B的含量进行分析。
1.仪器与试药
1.1仪器
Agilent 1100LC高效液相色谱仪；电子天平（Metter Toledo AG285）；电热套（HM500型，北京科委仪器公司）；超声波清洗器（KQ2500DE，昆山超声仪器有限公司）。
甲醇、乙腈为色谱纯（上海星可生化有限公司），水为超纯水（自制）。
野菊花购自南通三越中药饮片有限公司（批号分别为140625、141105、140512），经南通市中医院药剂科鉴定为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥头状花序。
当归酰豚草素B经提取分离得到，纯度大于98％。
2方法与结果
2.1对照品溶液的制备
精密称定对照品当归酰豚草素B5.005mg，至10ml容量瓶中，以甲醇溶解并定容。取2ml至于25ml容量瓶中，加甲醇定容，即得对照品溶液。
2.2供试品溶液的制备
取野菊花2.0g，加甲醇溶液60ml，浸泡0.5h，加热回流提取2h，过滤，浓缩滤液至10ml，微孔滤膜滤过，滤液即为供试品溶液。
2.3色谱条件
色谱柱Agilent Benetnach C18（4.6mm×250mm，5µm）；流动相乙腈-水（65：35），柱温300C；流速1.0ml/min；检测波长205nm。在此条件下，理论塔板数不低于3000。
2.4线性关系考察
依次精密量取对照品溶液1，2，4，8，l0ml至l0ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，分别进样10µl。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线方程。当归酰豚草素B回归方程为Y=11521X-10.87，线性范围4.004-40.04µg/ml，r=0.9998。
2.5精密度实验
取当归酰豚草素B浓度为4.004µg/ml的对照品溶液，进样10µl，按照上述色谱条件连续进样6次，测定峰面积，结果当归酰豚草素B的RSD为0.38%，表明仪器精密度良好。
2.6稳定性试验
精密吸取供试品溶液10µl，分别在0，4，8，12，24，48h进样，按照上述色谱条件，测定峰面积，结果当归酰豚草素B的RSD为0.88%，表明供试品溶液在48h内稳定。
2.7重复性试验
取同一批次的野菊花6份，按照2.2项下制备供试品溶液，按照上述色谱条件，分别进样10µl，测定峰面积，结果当归酰豚草素B含量的RSD为0.92%，表明本方法重复性良好。
2.8加样回收率试验
称取已知含量的野菊花药材6份，每份1.0g，加入对照品溶液，按2.2项下供试品制备方法操作，按照上述色谱条件，分别进样10µl，测定峰面积，计算回收率。结果见表1。
3.讨论
当归酰豚草素B在野菊花中的含量相对较少，以取自2014年的野菊花为例，当归酰豚草素B在野菊花药材中的平均含量为0.13%。但是作为具有抗乙肝病毒作用的活性成分来说，其应得到足够的重视。此外，本次研究只测定2014年度的野菊花药材中当归酰豚草素B的含量，并未考虑存放时间对当归酰豚草素B的含量的影响，对此可另作考察。
参考文献：
[1]国家药典委员会．中华人民共和国药典一部[S]．北京：北京化学工业出版社，2015：314
[2]陈传千，沈艳平等.野菊花提取物药理作用的研究进展[J].吉林医药学院学 报，2010，31（3）：175
[3]李国栋，陈园园等.野菊花中萜类和黄酮类化合物保肝作用研究[J].中草药，2013，44（24）：3510
论文作者:蒋晟昰
论文发表刊物:《健康世界》2015年27期供稿
论文发表时间:2016/3/28
标签：豚草论文; 当归论文; 野菊花论文; 溶液论文; 含量论文; 色谱论文; 甲醇论文; 《健康世界》2015年27期供稿论文;