湖南省临湘市疾病预防控制中心 检验科 414300
【摘 要】目的：了解湖南省临湘市近期出现的由饮用水污染所引起的腹泻病例临床资料，分析病原学方面的特点，为如何防控饮用水污染提供依据。方法：选取2018年8月-2018年9月期间，在临湘市人民医院就诊的腹泻患者20例，均在收集其咽拭子或肛拭子，送至检验科，分析细菌培养分离结果、细菌PCR及测序分析结果。结果：20例患者样本经培养且分离后发现未检出金黄色葡萄球菌、志贺氏菌以及沙门氏菌；其中8份拭子检出诺如病毒，经病毒侧序列可知为G II.4型；未检出轮状病毒等其他病毒。结论：腹泻病例多为相同小区居民，腹泻原因为二次供水箱受到诺如病毒感染物污染。
【关键词】饮用水污染；感染性腹泻；病原学检测
感染性腹泻的发病原因多为病原性微生物，比如轮状病毒、金黄色葡萄球菌等，以腹泻为典型临床表现，在全世界均有所分布，属于一种常见的消化系统传染病。据一项来自中山市范围内关于感染性腹泻的不完全报道显示，2015-2016年期间，中山市4家医院1643份标本中致病微生物检出率26.47%，以病毒为主要感染源，比如诺如病毒GII型等[1]。本次研究以2018年8月-2018年9月期间某地区出现的一起感染性腹泻患者20例，分析其饮用水污染源及病原学检测结果，现报告如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
2018年8月-2018年9月期间，湖南省临湘市人民医院急诊收治感染性腹泻患者20例；男16例（80.00%），女4例（20.00%），年龄11-76岁，年龄平均（35.75±11.95）岁；发病至就诊时间2-25h，平均时间（6.71±3.05）h。其中，感染性腹泻诊断标准参照《WS271-2007感染性腹泻诊断标准》[2]。
1.2方法
所有患者均在入院后治疗前先行获取其咽拭子或肛拭子，其中13例获得咽拭子，7例获得肛拭子；将样本送至检验实验室进行检验；检验所用主要仪器或试剂如下：恒温培养箱，生物安全柜，超净工作台，志贺氏菌增菌肉汤，亚硫酸铋琼脂及伊红美蓝培养基等。其中，细菌鉴定条为梅里埃API细菌鉴定试剂条；BOEN全自动微生物鉴定系统，用于鉴定细菌类型。PCR检测扩增：设置阴性对照物无菌水，内无DNA或RNA酶；检测仪器为美国ABI 7300 PCR仪，并使用配套试剂盒；PCR扩增包括45个循环，在单个循环中，当满足55℃、40s的条件时，收集荧光。扩增阳性标准，满足下列2条：（1）存在对数增长曲线；（2）Ct值：①≤37，无需重复试验；②＞37，需重复试验；若未满足扩增阳性（1）条件，提示结果为扩增阴性。在试验中，严格按照相关检测仪器、试剂盒使用规则，并在遵守无菌操作原则的条件下完成实验。
调查人员在与到院就诊腹泻患者交谈后，得知所有腹泻患者均来自同一居民小区，且该小区均为二次供水；考虑饮用水、环境等因素是造成腹泻的原因，经现场调查后，排除其他因素，确定感染原因系饮用水污染，除腹泻患者所在家庭外，在小区内随机选取50户作为饮用水样本获取末梢水样本，后至二次供水箱采集样本；二次供水箱内有枯叶、树枝等漂浮物，气味不佳，并且与市政相关部门相配合，检查自来水管线；在获取二次供水箱内水样后，将其与末梢水样一起送至实验室，依次开展氨氯检测、亚硝酸盐检验及硝酸盐氮相关指标的检验，再开展细菌、病毒方案的检测及鉴定，检测仪器与试剂盒与腹泻患者肛拭子或咽拭子检测方案一致。
待腹泻患者样本、饮用水样本病毒扩增检测后，将其送至相关单位进行病毒测序，测序对比库如下：（1）GenBank；（2）EMBL；（3）DDBJ；（4）PDB。将测序对比结果输入计算机，形成数据库，并获得报告。
2.结果
2.1实验室检测结果
20例患者样本经培养且分离后发现未检出金黄色葡萄球菌、志贺氏菌以及沙门氏菌；其中8份拭子检出诺如病毒，检出率40.00%；经病毒侧序列可知为G II.4型；未检出轮状病毒等其他病毒。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆其中，检出诺如病毒样本水样，来自二次供水水箱及末梢水水样。
2.2饮用水污染调查结果
2018年8月-2018年9月时间内，湖南省临湘市人民医院急诊收治感染性腹泻患者20例，系同一小区居民；经调查后得知，该小区由同一二次供水站负责提供饮用水。经现场调查发现，该二次供水站水箱中漂浮枯叶、枯枝等异物，地下自来水管线存在老化、自来水泄露现象。结合实验室检验结果，确定本次感染性腹泻事件系饮用水感染所致，且为二次供水水箱受到诺如病毒感染物感染所致。受到本次饮用水污染事件波及的腹泻患者经过对症治疗后，在3-7d内痊愈，回归家庭；未出现重症患者；感染性腹泻患者在医院被隔离后治疗，其排泄物也进行相关处理，避免造成环境污染及传染病扩散。
3.讨论
感染性腹泻在全世界范围内均属于广受关注的公共卫生问题，尤其是对于发展中国家而言，更是如此。其主要症状为腹泻，属于传染病。而饮用水突发感染，则源自人为事件或自然灾害，主要是指不良污染物在一定因素作用下，在短时间内通过供水管线或自然水源造成自来水水质发生恶化，可能或已经造成饮用水供给人群身体健康损伤。目前，已有文献报道，感染事件背后可能人为因素偏重[3]（成都），而其致病微生物则以病毒为主[4]（徐州），比如轮状病毒、诺如病毒及性状病毒等。因此需持续关注饮用水的安全问题，并采取相应措施，以达到降低感染性腹泻发生风险，保证居民用水安全的目的。除自来水以外，包装饮用水污染也是能够导致感染性腹泻，现已有报道称部分地区出现了铜绿假单胞菌感染的包装饮用水污染事件[5]。
本次研究中，感染性腹泻患者集中在8-9月期间入院治疗，经病毒测序后发现测试结果显示，感染微生物系诺如病毒G II.4型，系二次供水受到感染所致；所有感染性腹泻患者在3-7d内痊愈，未出现重症患者。诺如病毒在全世界均以所分布，属于肠道系统的腹泻病毒。此类型感染性腹泻，在任何地区、任何季节均可暴发，在任何年龄段均可发作，该病毒即使剂量较低，也可造成一定的感染，生存力比较顽强，尤其是本案属于G II.4型，属于最近几年发生率较高的诺如病毒类型[6-7]。而且感染源不仅限于被感染的水或食物，感染性腹泻患者也可看做感染源，故在发现感染性腹泻患者时需隔离治疗，并开展一系列对症处理措施，比如改造饮用水工程，加强消毒系统的建设等[8]；以本案为例，比如修复自来水管线泄漏点，由疾控中心与相关政府部门相配合对二次供水水站及周围环境完全清洗消毒，多次检测二次供水水箱及末梢水水样后以确定能够继续使用供水管线及二次供水站，疾控中心及医疗单位派人进入社区开展诺如病毒等能够引发感染性腹泻的致病微生物相关知识普及工作，以消除居民恐惧，舒缓其恐慌心理，另由政府相关部门负责在此次饮用水污染处理期间，向受到波及的居民小区运送饮用水。
参考文献：
[1]黄恩苗，王翠玲，王曼，等.2015-2016年中山市感染性腹泻病原学监测结果分析[J].现代预防医学，2017，44（16）：3040-3043，3047.
[2]中华人民共和国卫生部.WS271-2007感染性腹泻诊断标准[S].北京：人民卫生出版社，2007.
[3]陈俊，高绪芳，杜慧兰，等.2009-2014年成都市生活饮用水突发污染事件分析[J].环境与健康杂志，2015，32（2）：136-138.
[4]孙传武，金丹，周强.2013-2015年徐州市感染性腹泻病毒病原学监测结果分析[J].现代预防医学，2017，44（13）：2448-2452.
[5]黄建锋，汪新，刘鹏，等.包装饮用水铜绿假单胞菌污染情况调查分析[J].食品工业，2018，39（1）：232-233.
[6]史永林，张文艳，金晶，等.安徽省诺如病毒G II.4/Sydney 2012变异株分子特征分析[J].安徽预防医学杂志，2016，22（6）：363-366.
[7]施建芳，潘丽峰，傅慧琴，等.2012—2015年上海市浦东新区诺如病毒GII型流行情况[J].职业与健康，2017，33（15）：2058-2061.
[8]孙丽群.2012至2014年秦皇岛市海港区饮用水水质检测结果分析及对策[J].河北医药，2017，39（8）：1264-1267.
论文作者:徐伟红,黄卓,蔺玉兰
论文发表刊物:《中国结合医学杂志》2019年2期
论文发表时间:2019/4/24
标签：感染性论文; 病毒论文; 患者论文; 饮用水论文; 水污染论文; 临湘市论文; 检出论文; 《中国结合医学杂志》2019年2期论文;