（重庆市璧山区人民医院 重庆 402760）
【摘要】本研究的主要目的是探讨CD244（rs3766377）基因多态性对乙肝慢性感染结局的影响。我们分组（无症状携带者组、慢性乙型肝炎组、乙肝后肝硬化组、乙肝后肝癌组检测了CD244（rs3766377）基因多态性。我们发现rs3766377可影响乙肝病毒感染者发展为肝硬化及肝癌。结论：CD244 基因多态性rs3766377与慢性乙肝患者发展为肝硬化及肝癌有明确的关系。
【关键词】乙型病毒性肝炎，CD244，基因多态性
【中图分类号】R373.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）24-0079-01
慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染是我国面临的一个严峻的卫生问题。成人感染乙型肝炎病毒后约10%的患者会发展为慢性感染[1]。
机体对HBV病毒的清除依赖于健全的细胞免疫功能，而慢性HBV感染者中，特异性免疫低下及病毒逃避机体免疫是导致持续性感染的重要原因。HBV特异性CD8+T细胞、CD4+辅助性T细胞的功能及数量是影响机体特异性免疫功能的关键因素[2]。大量的研究证明，慢性HBV感染者体内病毒特异性T淋巴细胞和调节性T淋巴细胞功能和数量均受损[3-5]。因此，本研究通过病例-对照方法来探讨CD244（rs3766377）基因多态性与慢性乙型病毒性肝炎的相关性研究。
1.资料与方法
1.1 一般资料
收集从2016年09月至2018年09月就诊于重庆市璧山区人民医院的309名HBV慢性感染者（chronic HBV infection，CH），包括无症状携带者（asymptomatic carrier，ASC）28名，慢性乙型肝炎（chronic HBV hepatitis，CHB）90名、乙肝肝硬化（liver cirrhosis，LC）93名、乙肝肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）98名。所有纳入的研究者之间均无血缘关系。本研究通过了重庆市璧山区人民医院医学伦理委员会的批准，且所有的受试者均签署了书面知情同意书。
1.2样本采集及生化酶学指标
从每位患者抽取3～5ml血液，于-80℃冰箱保存以备用。通过问卷调查记录其性别、年龄、吸烟及饮酒、既往病史等基本情况。HBV病毒血清标志物、肝功能等指标检测由重庆市璧山区人民医院检验科完成。
1.3基因组DNA的提取及基因分型
使用美国Promega公司Wizard Ge-nomic DNA纯化试剂盒进行外周血基因组DNA的提取。基因组DNA于-80℃储存备用。采用Sequenom实验平台对筛选的SNP进行高通量基因分型。为进行质量控制，每个96孔板设置了成对的样本及阴性对照。
1.4 统计学分析
数据分析由SPSS22.0软件完成。使用HWE软件来检查正常组与清除组数据是否符合哈迪温伯格平衡（Hardy-Weinberg，H-W）（P＜0.001）。计量资料使用Student t检验或Mann-WhitneyU检验进行比较；计数资料使用χ2检验进行比较；使用二分类logistic回归分析校正性别及年龄后比较基因型及基因模型（显性模型（dominant genetic model）和隐性模型（recessive genetic models）在各组中的差异。Hardy-Weinberg（H-W）遗传平衡由Stata20.0软件完成。采用Haploview software（v4.2）软件分析单体型频率。所有检验P值均为双侧。P＜0.05认为有统计学意义。
2.结果
2.1 基本资料
相比于女性患者，男性患者在发生肝硬化和肝癌的风险更高（P＜0.05）。在各个组间无显著差异，表1。
表1 研究对象的临床特点
ASC，无症状携带者（asymptomatic carrier）；CHB，慢性乙型肝炎（chronic HBV hepatitis）；LC，乙肝后肝硬化（liver cirrhosis）；HCC，乙肝后肝癌（hepatocellular carcinoma）。
3.讨论
CD244（别名：2B4），来自于淋巴细胞活化信号分子（signaling lymphocytic activation molecule，SLAM）家族。其可表达于CD8+T细胞、NK细胞、粒细胞及单核细胞等细胞上。既往研究表明，在慢性HBV感染的患者中，其CD8阳性T细胞上CD244高表达，从而影响T细胞对病毒的杀伤作用。本研究发生，rs3766377与肝癌有明确的相关性，可导致肝癌的发生率增加为正常的3.3倍。
本研究也存在一定的不足：（1）纳入样本数目较小，可能造成一定的偏倚；（2）没有进行SNP的功能试验；（3）没有纳入乙肝病毒的相关因素。在今后的研究中，我们需要增大样本、设计更严谨的实验来验证本研究的结果。
总之，本研究表明CD244基因多态性rs3766377与慢性乙肝患者发展为肝硬化及肝癌有明确的关系，为临床的诊治提供更好的思路。
【参考文献】
[1]汤永志，陈巧玲，江挺，等.Rs4129009基因多态性与慢性HBV感染的相关性研究[J].浙江医学，2017(13):1068-1071.
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[3]徐峰，王娟，王静，等.乙肝后肝硬化中医证型与白介素-28B基因多态性的相关性研究[J].武警后勤学院学报(医学版)，2017(2):104-108.
[4]赵孝梅，何燕，张婷，等.HLA-DP基因2个单核苷酸多态性位点与贵州少数民族人群HBV感染的关联研究[J].中华流行病学杂志，2016，37(3):389-393.
[5]陈仁，廖金瑶，罗晓丹，等.慢性乙肝患者HBsAg水平与HBV-DNA相关性研究[J].中华疾病控制杂志，2016，20(8):856-859.
论文作者:彭洪,李天科（通讯作者）
论文发表刊物:《医药前沿》2019年24期
论文发表时间:2019/9/26
标签：多态性论文; 基因论文; 肝癌论文; 乙肝论文; 肝硬化论文; 乙型肝炎论文; 细胞论文; 《医药前沿》2019年24期论文;