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摘要：目的：以注射用炎琥宁含量测定为例，探讨高效液相色谱法在药品检验中的应用。方法：选用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别对注射用炎琥宁含量测定检验方法的精密度及准确度进行比较。结果：高效液相色谱法进行含量测定日间五次平行测定结果的相对标准偏差为0.25%，回收率为98.87%，检验方法的精密度及准确度均优于紫外分光光度法。结论：高效液相色谱法在药品检验中用于药品含量测定，具有精密度高、准确性好，是一种可靠的定量分析方法，可广泛应用于药品检验中。
关键词：高效液相色谱法药品检验含量测定
高效液相色谱法于20世纪60年代末诞生至今，经过近50年的发展技术日趋成熟，已成为分析化学中重要的组成部分。高效液相色谱法作为一项重要的仪器分析技术，广泛应用于化工、环境、生物、医药、食品等领域[1]。高效液相色谱法于1985收录于《中国药典》至今，使用高效液相色谱法进行鉴别、检查、含量测定的药品已超过2000种，已成为药品质量控制的关键手段之一[2]。本文通过比较高效液相色谱法和紫外分光光度法在测定注射用炎琥宁含量的差异，探讨高效液相色谱法在药品检验中的应用，为寻求可靠的定量分析发法提供参考。现将研究过程报道如下：
1 仪器及试剂
1.1主要仪器
高效液相色谱仪：Agilent1260型生产于美国安捷伦科技公司
紫外-可见分光光度计：UV-2550型生产于日本岛津公司
电子天平：CPA225D型生产于德国赛多利斯公司
1.2主要试剂、药品
注射用炎琥宁（批号150612，规格0.4g，陕西博森生物制药股份集团有限公司）
脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品（批号111598-201513，中国食品药品检定研究院）
乙醇（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）
磷酸二氢钾（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）
甲醇（色谱纯，Dikma Technologies Inc）
试验用水为二次蒸馏的纯化水
1.3 检验方法
1.3.1紫外分光光度法
取本品适量（约相当于炎琥宁28mg）精密称定，置于100ml的容量瓶中，加少量稀乙醇使之溶解后加入0.1ml醋酸，然后用稀乙醇定容后摇匀，再精密量取5ml，置50ml容量瓶中，加稀乙醇定容后摇匀作为供试品溶液；精密称取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品适量，同法制成对照品溶液。分别取上述两种溶液，在251nm的波长处测定吸收度，按外标法进行计算。
1.3.2高效液相色谱法
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.05%磷酸二氢钾溶液（用磷酸调pH值为2.5±0.05）（68：32）为流动相，检测波长为251nm；取本品适量（约相当于炎琥宁28mg），置100ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密称取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品适量，同法制成对照品溶液。分别取上述两种溶液各20?l，注入液相色谱仪，记录峰面积，按外标法进行计算。
2.观察项目及结果
2.1精密度试验
取注射用炎琥宁（批号150612）5支，除去铝塑组合盖和标签，称量瓶加样的重量，倾出内容物，并用适宜的溶剂清洗干燥后，称量空瓶的重量，计算平均装量。按照1.3检验方法项下的溶液配制方法和实验条件，分别称取装量差异项下的供试品5份和对照品5份配制成供试品溶液和对照品溶液进行测试，记录吸光度和峰面积，计算注射用炎琥宁的标示百分含量，并计算每种方法的相对标准偏差（RSD）。结果显示高效液相色谱法日间五次平行测定结果的相对标准偏差为0.25%，高于紫外分光光度法，详见表一。
2.2准确度试验
精密称取脱水穿心莲内脂琥珀酸半酯对照品14mg和注射用炎琥宁适量（约相当于炎琥宁14mg），分别置于50ml容量瓶中，按照1.3检验方法项下所用试剂溶解并稀释至刻度，精密量取等体积的脱水穿心莲内脂琥珀酸半酯对照品溶液和注射用炎琥宁溶液混合后制得加样回收率测试溶液，按照1.3检验方法项下规定的测试浓度进行配置，分别进行测试，记录吸光度和峰面积，计算对照品的回收率，结果显示高效液相色谱法回收率为98.87%，高于紫外分光光度法，详见表二。
3 讨论
高效液相色谱法（HPLC）是色谱法的一个重要分支，被测物质溶液在不同极性的单一溶剂或缓冲液的流动相中，经高压输液系统的带动，泵入装有固定相的色谱柱中，被测物质溶液各成分被分离后，进入检测器，从而实现分离分析的目的[3]。
近年来，仪器分析广泛应用于食品、药品等检验过程中，根据检验目的选择适当的分析方法。不同的仪器分析方法具有不同的侧重点，在进行含量测定时，特别是制剂中主成分的含量时，宜充分考虑杂质以及辅料的干扰，所选择得检验方法要有良好的选择性、灵敏度和准确度。高效液相色谱法能够将被测组分和其他组分分离开来，排除干扰，保证了检验结果的准确性[4]。
《中国药典》中采用紫外分光光度法进行炎琥宁含量测定，相关高效液相色谱法测定炎琥宁原料药及制剂的报道较少，本研究选用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别对注射用炎琥宁含量测定检验方法的精密度及准确度进行比较，结果显示高效液相色谱法进行含量测定日间五次平行测定结果的相对标准偏差为0.25%，回收率为98.87%，检验方法的精密度及准确度均优于紫外分光光度法。本研究意在为高效液相色谱法在药品检验中的应用提供数据支持，为纯度要求较高的原料药和制剂的含量测定寻找更为适宜的检测方法。
参考文献：
[1]冯景春，王芹，冯开. 高效液相色谱法的应用与发展前景[J]. 广东化工，2014，41（12）：192-192.
[2]张洪秀. 高效液相色谱法在药品检验中的应用效果评价[J]. 化工管理，2016（3）：210-210.
[3] 钱永健，陈永壮. 高效液相色谱法测定注射用炎琥宁含量[J]. 亚太传统医药，2015，11（4）：43-44.
[4] 李东文. 高效液相色谱法和紫外-可见分光光度法检测茴三硫片含量的有效性比较[J]. 海南医学院学报，2013，19（4）.
论文作者:马越黎
论文发表刊物:《健康世界》2016年第20期
论文发表时间:2016/11/15
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