（青海大学医学院 西宁 青海 810000）
【摘要】目的：研究紫色悬钩子提取液二元醇质体凝胶对日光性皮炎小鼠模型的保护作用。方法：将紫色悬钩子果实捣碎后先用乙醇于磁力搅拌器30℃，750r/min提取两次，合并滤液；将残渣用蒸馏水于磁力搅拌器30℃，750r/min提取两次，合并滤液，分别得到醇提液和水提液。采用乙醇注入－超声法将所得提取液分别制备成二元醇质体凝胶，以同种方法制备空白二元醇质体凝胶用于对照。取30只小鼠分为空白组、醇提物组和水提物组，并将小鼠1cm×2cm范围内备皮后涂抹上述凝胶，在距离小鼠20cm处于300nm紫外灯照射1小时。两天后皮肤出现红肿、红斑即造模成功，取下小鼠皮肤进行病理切片和HE染色，镜检，以SPSS24.0统计软件进行分析。结果：与醇提物和水提物组相比，空白对照组小鼠皮肤出现明显红肿、红斑，甚至破溃，表皮细胞出现明显坏死。与空白对照组相比，醇提物组和水提物组均可显著减轻小鼠皮肤炎症症状，皮肤损伤程度显著降低（P＜0.05）。结论：紫色悬钩子果实提取物能够较好地预防日光性皮炎，且乙醇提取物效果更佳。
【关键词】紫色悬钩子；日光性皮炎；二元醇质体凝胶
【中图分类号】R751 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）20-0025-02
Protective effect of raspberry binary Ethosomes on mouse model of actinic dermatitis
Lu Haohao,Tang Rongfan,Hou Chunyu,Wang Chuqiao,Tong Li
Medical College,Qinghai University,Xining,Qinghai 810000,China
【Abstract】Objective To study the protective effect of binary Ethosomes from purple raspberry extract on mice model of solar dermatitis.Methods Purple and raspberry fruit mash with ethanol in the magnetic stirrer first after 30℃,750 r/min extracted twice,merge the filtrate.Residue using water to extract in the magnetic stirrer 30℃,750 r/min extracted twice, merge the filtrate, alcohol extract and water extract respectively.Ethanol injection-ultrasonic method was used to prepare dihydric hydrogel, and blank dihydric hydrogel was prepared by the same method. Thirty mice were divided into the blank group, the alcohol extract group and the water extract group, and the mice were skinned within 1cm*2cm and then coated with the above gel. The mice were irradiated by 300nm ultraviolet light at a distance of 20cm for one hour. Two days later, the model was successfully established when the skin showed redness and erythema. The skin of the mice was removed for pathological sections and HE staining, and microscopic examination was performed.SPSS24.0 statistical software was used for analysis.Results Compared with the alcohol extract group and the water extract group, the skin of mice in the blank control group showed obvious erythema, erythema, even ulceration, and obvious necrosis of epidermal cells. Compared with the blank control group, both the alcohol extract group and the water extract group could significantly reduce the symptoms of skin inflammation and the degree of skin injury in mice (P＜0.05). Conclusion Purple raspberry fruit extract can prevent solar dermatitis, and ethanol extract has better effect.
【Key words】Purple raspberry;Solar dermatitis;Binary Ethosomes
日光性皮炎（Sunshine dermatitis）是一种长时间暴露在日光下所致的皮肤病[1]，该疾病是由于太阳光中波长为290~320nm的紫外线照射皮肤，引起皮肤组织释放组织胺等一系列炎症介质产生的炎症反应。临床表现为红肿、红斑、水泡、糜烂甚至休克，该疾病若未及时治疗则可能留有疤痕，给患者的生活带来极大的痛苦[2-3]。而紫色悬钩子（Rubus irritans Focke）蔷薇科，悬钩子属落叶灌木，该属植物含有挥发油、黄酮苷、萜类、鞣质、酚类等多种化学成分， 具有抑菌、抗肿瘤、抗氧自由基、抗炎、保护心血管、抗过敏等多种药理作用[4-5]。按照日光性皮炎的发病机理，该植物是治疗日光性皮炎的良好药材，本研究旨在为紫色悬钩子预防日光性皮炎皮肤病提供理论依据及实验基础。
1.实验材料
1.1 实验动物
KM小鼠（体重18～22g，雌雄各半）。
1.2 实验药材及试剂
紫色悬钩子果实；大豆卵磷脂；聚山梨醇酯-80；无水乙醇；1，2-丙二醇；三乙醇胺；pH=6.8（±0.01）磷酸盐缓冲液；卡波姆940；HE染色试剂盒。
1.3 实验仪器
磁力加热搅拌器；紫外灯；旋转蒸发仪。
2.实验方法
2.1 提取实验
2.1.1紫色悬钩子果实的提取 将紫色悬钩子果实捣碎，在磁力加热搅拌器上先用乙醇于30℃，750r/min提取9小时，共提取两次，过滤，合并滤液，旋蒸溶剂，得醇提物；将滤渣置于磁力加热搅拌器上用蒸馏水于30℃，750r/min提取9小时，共提取两次，过滤，合并滤液，旋蒸溶剂，得水提物。
2.1.2二元醇质体的制备 采用乙醇注入-超声法制备二元醇质体[6]。分别取处方量的醇提物和水提物加入磷酸盐缓冲液溶解，低温4℃保存。准确称取处方量的大豆卵磷脂、聚山梨醇酯-80溶解于处方量的二元醇相中（无水乙醇:1，2-丙二醇=7:3），在30℃，750r/min的条件下缓缓将磷酸盐缓冲液加入二元醇相中，持续搅拌30min，探头超声3min（频率20kHz，超声3s，间隔3s），即得水提物和醇提物二元醇质体，以相同的方法制备加入生理盐水的二元醇质体作为对照。
2.1.3凝胶的制备 将2g卡波姆溶于200ml水中，充分溶胀。用三乙醇胺缓慢调节pH为6.5～7.0，将二元醇质体与其质量比2:3混合，搅拌即得。
2.2 动物实验
2.2.1分组及给药 将30只KM小鼠随机分为三组，每组各10只，分别为对照组、醇提物组和水提物组，适应性喂养3天。在小鼠背部皮肤1cm×2cm范围内脱毛，每天涂抹等量二元醇质体凝胶（0.15g?cm-2），每隔8小时一次，一日三次，共涂抹3天[7]。
2.2.2日光性皮炎造模 小鼠涂抹给药3天后，将小鼠固定，于20cm处紫外300nm线照射，连续照射一小时后给药一次，再连续照射1小时。照射完毕后12小时再给药一次。72小时后可见对照组、醇提物组和水提物组小鼠皮肤出现明显红肿、红斑甚至组织破溃，说明造模成功。建立皮肤组织损伤程度评价标准[8]，见表1。
注：*：剂量单位为g?cm-2。
3.2 小鼠病理切片分析
空白对照组由于未加入提取物小鼠皮肤均出现红肿、红斑及炎症细胞浸润，说明空白醇质体凝胶不具备预防日光性皮炎的作用；水提物组和醇提物组皮肤损伤等级均较空白对照组低，说明紫色悬钩子果实提取物中含有预防日光性皮炎的有效成分。但水提物组和醇提物组相比，醇提物组对日光性皮炎产生了更佳的预防作用，可能是由于紫色悬钩子有效成分大部分于醇提物中，具体为何种成分，需要进一步实验分析。
4.小结
日光性皮炎为一种长时间暴露在日光下所致的皮肤病，皮肤经紫外线照射后引起血管扩张渗透增加、组织水肿等一系列反应[9-10]，患上此病的患者长时间无法直接接触日光，为其生活带来了极大的不便。而根据本实验研究发现，紫色悬钩子果实中含有能够预防日光性皮炎的有效成分，经动物实验显示该成分药理效果高，极具开发价值，同时本实验也为紫色悬钩子治疗日光性皮炎提供了理论指导和实验基础。我们有理由相信，该类药材的更多药理作用将逐步被挖掘出来，为日光性皮炎患者及其皮肤敏感脆弱的人群带来福音。
【参考文献】
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作者简介：鲁昊昊，男，出生于1997年12月，本科。
论文作者:鲁昊昊,汤荣凡,侯春羽,王楚桥,童丽
论文发表刊物:《医药前沿》2019年20期
论文发表时间:2019/9/6
标签：日光论文; 小鼠论文; 钩子论文; 质体论文; 性皮炎论文; 紫色论文; 皮肤论文; 《医药前沿》2019年20期论文;