法医毒物检验中毒物的快速筛查与检测研究进展
蒋 笑
宿迁子渊司法鉴定所,江苏 宿迁 223800
摘 要: 毒物学检验是法医检验工作当中的重点内容,也是案件侦破的重要证据。在此过程中,做好检测技术的应用十分关键。在本文中,将就法医毒物检验中毒物的快速筛查与检测研究进行一定的研究。
关键词: 法医毒物检验;毒物快速筛查;检测
一、引言
在毒物学检验中,因案件复杂、毒物种类繁多,主要检验内容主要为常见未知毒物筛查以及多目标毒物筛查。在该过程中,对于筛查检测的准确性以及效率也具有了较高的要求。对此,即需要能够积极做好该部分技术的把握,以技术的科学应用更好地实现工作目标。
二、主要技术类型
(一)常见未知物筛查
在法医毒理学检验中,常见未知物以及多目标筛查是重点工作内容。其中,对于多目标物的筛查主要是对于滥用、频繁使用毒物而言的,在具体解释以及处理中具有较为简单的特点。在此过程中,能够滥用、频繁使用的毒物仅仅为一部分,无法对大量滥用毒物筛查、未被频繁使用的需求进行满足。在此过程中,通过高分辨率质谱技术的应用,能够对化合物质量数进行精确测量,为未知毒物的筛查打下良好的基础。在常见未知物筛查中,其平台为高频反率质谱平台,能够对代谢物以及未知毒物进行检测,且在具体实验中,也将形成大量数据,需要应用软件对流程进行简化,在谱库中搜索的情况下做好匹配化合物的报告。目前,很多仪器公司都对软件进行了积极研发,能够对数据的采集、处理、结果报告生成进行有效的简化。在获得样本MS谱图的情况下,即能够都不同质量提取例子色谱图进行生成,对色谱峰进行鉴定,同时在谱库当中搜索,对同其匹配的化合物进行报告。
VPA处理可显著抑制SH-SY5Y细胞中自噬标志蛋白LC3-II的水平(图8),同时还抑制p62的降解,但不影响Beclin1的表达;而使用miR-34c-5p抑制剂联合处理则可使LC3-II与p62的水平得到恢复。联合使用自噬抑制剂氯喹(CQ)处理可引起LC3-II与p62的堆积(图8)。
(二)液相色谱质谱联用法
该技术是目前较为成熟的一类技术,但该技术目前形成时间相对较短。电力电压以及流动相组成等方面还没有形成通用标准,也没有对专门的标准质谱数据库进行建立,对此在未知毒物的定性筛选方面存在一定的困难。但该技术在复杂基质毒物分析中,依然是一项热点技术。在实际处理当中,在实验参数优化的基础上对毒物质谱数据库进行建立,通过多反应监测模块对毒物进行快速筛选也成为了该技术的主流方式。在以该技术对毒物进行快速筛选时,建立质谱数据库是一项关键性内容,将直接对筛选毒物的数量与种类产生影响。目前,该技术在毒物筛查种类方面不断增加,已经达到了数百种,在该种情况下,对数据库进行建立,应用配套软件自动开展检索成为了关键性应用。目前,已经有研究人员建立了556种杀虫剂质谱谱库,对不同蔬菜的上百种杀虫剂进行筛查,获得了较好的筛查效果。同时,也需要研究人员建立了串联质谱谱库,根据化合物保留时间,应用MRM模式对生物体液多种毒物的识别方式,加快建立代谢快速筛查方式。
(三)免疫法
在该方式中,即是以抗原抗体为基础的免疫技术,其中,较为成熟的技术有:第一,放射免疫法。该技术是以放射性同位素抗原抗体反应以及敏感性形成的微量分析方式,在实践中获得了迅速的发展。该技术在应用中具有特异性强、材料用量少以及灵敏度高的特点,能够对吗啡、氯丙嗪、苯妥英钠、庆大霉素等药物进行准确的测定。但该技术在应用中容易出现假阳性以及交叉反应情况,如果没有科学处理组织样品,未灭活pH值以及降解酶等也将对结果准确性产生影响,目前之间被荧光免疫分析方式取代;第二,荧光偏振免疫法。在该方式中,应用荧光基图案对放射性同位素进行代替,作为标记物分析方式进行应用,在实际应用中在灵敏度以及重复性方面具有较好的表现,能够进行快速的自动化筛选。在此基础上,不同方式陆续建立,主要是对小分子物质进行测定,在毒品分析、农药残留量分析、环境食品监测以及临床检验中具有较为广泛的应用;第三,酶联免疫吸附法。该方式是目前国际上应用较多的毒物筛查技术,能够实现多种药物的检测,具有较高的特异性以及较高的检测灵敏度。有研究人员应用该技术对上百例死亡案件的玻璃体液、肌肉组织以及血液滥用药物进行筛查,在筛查后进行确证,获得了准确的结果。目前,以该技术形成的检测试剂盒在多个国家中应用,如环境检测、法医毒理学以及食品安全等领域,但在试剂盒当中,在结合物、酶底物以及免疫吸附剂性能控制方面存在一定的难度,具有较高的使用成本,在现今国内还没有得到广泛的应用。
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三、结束语
在上文中,我们对法医毒物检验中毒物的快速筛查与检测研究进展进行了一定的研究。对于法医毒物分析这项工作来说,其将涉及到较多的检材种类以及毒物类型,应用新技术进行快速筛查也成为了现今检验工作的重点要求,这就需要不断做好新技术研究,在更新、改进技术的情况下保障检验效果。
[ 参 考 文 献 ]
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中图分类号: D919.4
文献标识码: A
文章编号: 2095-4379- (2019 )21-0161-01
作者简介: 蒋笑(1987- ),男,汉族,江苏镇江人,本科,宿迁子渊司法鉴定所,司法鉴定人,从事司法鉴定法医物证和法医毒物。
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