黄煜伦[1]2002年在《雷公藤单体抑制胶质瘤细胞与血管生成的实验研究》文中研究指明第一部分 雷公藤单体对胶质细胞与内皮细胞的体外作用的实验研究 目的 研究雷公藤单体对胶质瘤细胞及血管内皮细胞株的体外抑制作用 方法 通过MTT法测定四种雷公藤单体对胶质瘤细胞株SHG44、C6、U251及血管内皮细胞株ECV的体外抑制作用。 结果 发现雷公藤单体中叁萜类红素等对胶质瘤细胞有一定的抑制作用而且对血管内皮细胞有明显的抑制作用。而雷公藤二萜类单体雷公藤甲素及LLDT-10对胶质瘤细胞有极明显的抑制作用，但对血管内皮细胞无作用。 结论 红素对血管内皮细胞有明显抑制作用而二萜类中的雷公藤甲素等对胶质瘤细胞有明显的抑制作用。体外实验为今后体内实验提供了依据。 [关键词]：雷公藤红素雷公藤甲素 内皮细胞 胶质瘤 第二部分 雷公藤红素抑制血管生成的实验研究 目的：探讨雷公藤红素对血管生成的抑制作用。 方法：采用MTT法测定雷公藤红素对血管内皮细胞株ECV增殖的影响，观察雷公藤红素对ECV迁移实验和小管形成实验的作用，以及对鸡胚尿囊膜血管生成的影响。血管生成抑制的体内实验采用Matrigel plug实验。 结果：雷公藤红素明显抑制ECV的体外增殖，IC_(50)为1.33μg/ml，而且可抑制ECV的迁移和小管形成，并呈明显的剂量依赖性。同时也抑制鸡胚尿囊膜血管生成作用和Matrigel plug中的血管新生。 结论：雷公藤红素具有明显抑制血管生成的作用，有可能成为极具前途的血管生成抑制剂。
李建斌, 祝新根, 程祖珏[2]2012年在《雷公藤单体抑制神经胶质瘤的研究进展》文中研究表明雷公藤单体是从传统中草药雷公藤中分离出的化学单体成分,主要包括二萜、叁萜、倍半萜、生物碱等,具有免疫抑制、抗炎、抗肿瘤等活性。近年来的文献报道雷公藤单体中雷公藤甲素和雷公藤红素以剂量-效应方式抑制颅内恶性肿瘤神经胶质瘤生长。其作用与调控抗凋亡蛋白Bcl-2,促凋亡蛋白Bax、核因子NF-κB的表达及下调Ras/Akt和Ras/ERK信号转导通道诱导肿瘤细胞凋亡;降低RNA聚合酶转录活性,抑制肿瘤细胞的增殖分化;抑制血管内皮细胞(EC)的血管内皮生长因子(VEGF)受体降低EC的增殖、迁移及小管的形成能力抑制肿瘤血管生成等机制相关。深入研究雷公藤单体的生物学效应及其分子机制将有助于阐明其药理机制。寻找高效低毒的单体将是今后研究的重点。
李建斌[3]2013年在《雷公藤内酯醇抑制人神经胶质母细胞U87细胞增殖和侵袭的作用及机制》文中研究说明目的：恶性神经胶质瘤是颅内恶性程度最高的肿瘤，具有浸润侵袭性生长的特性，手术难以完全切除，且易于复发，患者如果不接受治疗平均生存期仅几个月。目前临床上对神经胶质瘤采取手术、放疗、化疗、免疫等手段进行综合治疗，但患者预后不佳。侵袭是神经胶质瘤的标志性恶性生物学特性，也是神经胶质瘤预后差的重要原因。神经胶质瘤的侵袭受到多机制的调控，其中核因子κB (NF-κB)家族中P65的表达与神经胶质瘤的侵袭性具有显着相关性，激活NF-κB可促进CB和MMP-9转录，增强水解细胞外基质能力促进侵袭进程。因此NF-κB可以为抑制神经胶质的侵袭提供一个作用靶点。雷公藤内酯醇(triptolide)是从传统中草药中提取得单体化合物，临床上常作为免疫抑制剂治疗免疫系统疾病。近来研究发现雷公藤内酯醇对神经胶质瘤细胞具有抑制增殖、诱导凋亡的作用，但是对其是否具有抑制侵袭的作用还不得而知。本研究拟对triptolide处理过的神经胶质瘤细胞株U87进行检测，观察triptolide对U87细胞的增殖及侵袭能力的影响，并进一步研究triptolide抗侵袭作用的可能机制，初步探讨NF-κB信号通路与triptolide抗神经胶质瘤作用的关系，为将来把triptolide开发成为抗神经胶质瘤的药物提供理论基础。方法：1.通过甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）测定雷公藤内酯醇处理后U87细胞增殖抑制率；2.划痕实验和体外transwell小室模型检测雷公藤内酯醇对U87细胞迁移能力和侵袭能力的影响；3. Real-Time PCR分别检测雷公藤内酯醇对U87细胞的组织蛋白酶B（Cathepsins B CB）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）的mRNA转录水平的影响；4.蛋白印迹法检测雷公藤内酯醇对U87胶质瘤细胞的CB、MMP-9和p65蛋白活性的影响。结果：1、在U87细胞上雷公藤内酯醇以剂量-效应方式抑制胶质瘤细胞增殖，其IC50值是25.36μg·L-1。2、雷公藤内酯醇可减弱U87胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力，划痕实验：72h后对照组迁移细胞数45±3个，且细胞形态无改变，生长良好。雷公藤内酯醇组72h迁移细胞数11±2个细胞伪足变短，活力下降。Transwell侵袭实验：迁移穿过基质胶与滤膜侵袭入下室的U87细胞数为：对照组平均102.5±3.0个，雷公藤内酯醇组平均55.4±2.7个，雷公藤内酯醇作用后U87胶质瘤细胞的侵袭能力显着下降（P <0.05），有显着性差异。3、RealTime PCR:藤内酯醇处理24h后恶性胶质瘤U87胶质瘤细胞的CB、MMP-9基因的mRNA的表达较空白对照组均明显下降。CB和MMP-9的转录明显受到抑制，Cathepsins B基因和MMP-9基因的2-△△CT值分别是0.64和0.28（P<0.05）4、蛋白印迹法：24h后空白对照组相比雷公藤内酯醇组的p65蛋白活性明显被抑制，同时MMP-9、CB的蛋白水平也明显下降。结论：1.在体外，triptolide能抑制神经胶质瘤的增殖和侵袭。2.Triptolide抗神经胶质瘤侵袭的作用可以通过抑制p65蛋白活性来抑制NF-κB的转录活性，继而下调CB基因及MMP-9基因的表达，降低神经胶质瘤细胞迁移和水解细胞外基质的能力，阻碍肿瘤细胞迁移来实现。
李良[4]2009年在《雷公藤单体对胶质瘤细胞及血管内皮细胞的体外作用的实验研究》文中研究指明目的:研究雷公藤单体对胶质瘤细胞及血管内皮细胞株的体外抑制作用。方法:通过MTT法测定四种雷公藤单体对胶质瘤细胞株SHG44、C6、U251及血管内皮细胞株ECV的体外抑制作用。结果:发现雷公藤单体中叁萜类红素等对胶质瘤细胞有一定的抑制作用而且对血管内皮细胞有明显的抑制作用。而雷公藤二萜类单体雷公藤甲素及LLDT-10对胶质瘤细胞有极明显的抑制作用,但对血管内皮细胞无作用。结论:红素对血管内皮细胞有明显抑制作用而二萜类中的雷公藤甲素等对胶质瘤细胞有明显的抑制作用。体外实验为今后体内实验提供了依据。
参考文献：
[1]. 雷公藤单体抑制胶质瘤细胞与血管生成的实验研究[D]. 黄煜伦. 苏州大学. 2002
[2]. 雷公藤单体抑制神经胶质瘤的研究进展[J]. 李建斌, 祝新根, 程祖珏. 中国实验方剂学杂志. 2012
[3]. 雷公藤内酯醇抑制人神经胶质母细胞U87细胞增殖和侵袭的作用及机制[D]. 李建斌. 南昌大学. 2013
[4]. 雷公藤单体对胶质瘤细胞及血管内皮细胞的体外作用的实验研究[J]. 李良. 辽宁中医药大学学报. 2009